微小牛蜱Bm91基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

从我国半饱血微小牛蜱雌性成蜱肠道和唾液腺中提取总RNA;参照GenBank中已发表的微小牛蜱Bin91基因的核苷酸序列,设计了1对特异性引物.采用RT-PCR技术扩增Bm91基因,测序正确后将其亚克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K的EcoR I酶切位点,构建重组表达载体pPIC9K-Bm91.再次测序正确后将其用Sac Ⅰ内切酶线性化,电转化毕赤酵母GS115并经G418抗性筛选高拷贝重组菌株后用甲醇诱导表达.表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析,结果显示,Bm91基因获得了成功表达,诱导表达的培养上清液中表达出具有反应活性的83 ku的重组Bm91蛋白.     

鸡白细胞介素-2受体基因γ链的转录分析与表达

以脾单个核细胞总RNA为模板,对鸡白细胞介素-2受体基因γ链(chIL-2Rγ)进行了RT-PCR,获得了一1 047 bp的开放阅读框,编码由348个氨基酸残基组成的分子质量为37.8 ku的蛋白多肽。预测的鸡IL-2Rγ多肽链中包含4个保守半胱氨酸残基、1个WSXWS基序和7个N连接的糖基化位点。鸡IL-2Rγ与其他动物IL-2Rγ在氨基酸水平上的同源性仅为21.4%~38.2%。RT-PCR检测发现,鸡IL-2RγmRNA分布于大脑、小脑、脊髓、腔上囊、脾、胸腺、骨髓、盲肠扁桃体、腺胃、肌胃、空肠、卵黄囊憩室、回肠、盲肠、直肠、心脏、肾、肺、肝、骨骼肌和皮肤,而在十二指肠和睾丸中没有检测到其转录。构建了鸡IL-2Rγ胞外区的原核重组表达载体,进行了表达和鉴定。     

猪肺炎霉形体Dnak-P97融合基因的表达及其产物的生物学活性

应用DNA重组技术,将猪肺炎霉形体黏附因子P97 C末端基因与猪肺炎霉形体伴侣蛋白Dnak C末端基因同时克隆到pET-30a表达载体上,构建了重组表达载体.将鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21,用终浓度为1.0 mmol/L的IPTG诱导6 h.用BugBusterTM Ni-NTA His·Bind纯化试剂盒在自然条件下对目的蛋白进行了纯化;经Western-blotting和动物试验,证实,该蛋白具有良好的生物学活性.     

青海高原产纤维素酶康氏木霉的酶促动力学研究

对分离自青海省东部土壤的产纤维素酶康氏木霉 (Trichodermakoningii) 0 14 3p株进行产酶条件优化及酶促动力学特性研究。结果表明 ,T .koningii 0 14 3p菌株在麦麸为碳源、尿素为氮源、起始 pH值为 7.0、2 8℃培养 6d的条件下产酶量最高。在此产酶优化条件下 ,0 14 3p菌株的湿固体发酵物滤纸酶活力 (FPA)可达 32 μmol/min ,为原产酶条件的 1.6倍 ;酶作用的最适温度为 5 0～ 5 5℃ ,最适 pH 4 .8。T .koningii 0 14 3p菌株可作为纤维素酶解饲料的酶源菌 ,具有良好的饲用前景     

孙春兰：推动国资国企改革“三个转变”

推动新一轮国资国企改革，要加快“三个转变”。一是推动国有资本由分散向集中转变。通过重组整合，推进国有资本向大集团和龙头企业集中，向重要行业和关键领域集中，向主业和价值链高端环节集中，打破行业、产业、所有制的界限，形成新的竞争优势。     

公共事

乳业质量推出重大举措 国务院6月13日公布的婴幼儿配方乳粉企业兼并重组工作方案提出，力争到2015年形成10家左右年销售收入超过20亿元的大型婴幼儿配方乳粉企业集团。到2018年底形成3至5家年销售收入超过50亿元的此类乳业集团。14日，由工信部牵头的“食品工业企业质量安全追溯平台”正式开通，6家婴幼儿乳粉生产企业、     

黄奇帆：用重组改造世界

黄奇帆，从上海焦化厂一名工人成为重庆市的市长，他一路走来，历经42年。黄奇帆1968年9月到上海焦化厂工作时只有16岁。在这里。黄奇帆一干就是6年。1974年9月，     

解构和重组:2011国际社会的位移

解构和重组,是2011年国际社会的关键词;寰球同此凉热,是这个时代的特征。中国不可能在量级如此之大、变动如此剧烈的运行中置身事外。世界正在位移,中国如何应对?在强化对外开放的同时,也必须加快对内改革的步伐     

“后汶川家庭”现象分析及其心理援助

本文通过对汶川大地震后的部分家庭进行分析,针对不同类型的＂后汶川家庭＂所面临的问题,提出相应心理援助的方式。     

@微天下

@经济观察报:"央企重组"已成为"主辅分离"的代名词——没完没了的主辅分离。央企重组蜕变成割韭菜运动,还揭示出这种经济结构的本质,即央企不但获取垄断行业的超额利润,还以主辅分离的重组名义反复套现,获取额外利润。@左晓蕾:汤敏:纳闷为何德国常无危机?近解,因德无房泡。