超滤管在陈旧生物检材中的应用

目的探讨millipore超滤管滤过方法对陈旧生物检材DNA分型检验的应用价值。方法将23份陈旧血样分别剪取同样合适大小的血片3组,标为A、B、C组,磁珠法提取DNA,分别用80μL、80μL、20μL洗脱液洗脱得到模板DNA,其中A、C组模板直接扩增,B组用millipore超滤管滤过浓缩后扩增。PCR产物用AB3130x L基因分析仪检测,Gene Mapper ID V3.2软件进行自动分型。所得实验数据用SPSS软件分析处理。结果 A组没有1例样本扩出全部STR基因座,B组有18例样本扩出全部STR基因座,C组有11个样本扩出全部STR基因座。结论应用millipore超滤管滤过方法可以明显提高陈旧生物检材的DNA分型成功率。     

DNATyper Y21试剂盒基因座在河南人群中的遗传多态性

本文采用DNA Typer Y21试剂盒对中国河南地区汉族604个健康无关个体进行19个Y-STR基因座和1个常染色体STR基因座遗传多态性进行调查。采用血卡样本进行直扩,用DNA Typer Y21试剂盒进行扩增及检测。结果在20个基因座共检出164个等位基因和601种单倍型,其分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05)。所调查的河南人群20个STR基因座具有较好识别能力,该试剂盒与Yfiler Plus相同基因座遗传学数据比较无显著差异。     

手部脱落细胞DNA转移及二次转移的实验研究

目的研究脱落细胞遗留者洗手时间及所接触客体类型对手部脱落细胞转移的影响,同时考察手部脱落细胞DNA是否能够发生二次转移。方法 9名志愿者在洗手后30min、2h、6h分别握持木柄螺丝刀、橡胶柄螺丝刀、胶木插头1min和佩戴粗纱手套15min,对上述物品进行DNA提取检测,同时进行手部脱落细胞的二次转移实验。结果从志愿者接触过的物品中能够获得的STR基因座数量随着接触者洗手后时间的延长而增加;在洗手后30min和2h的触摸实验中,4种客体检出的基因座数量存在统计学差异,从手套中检出的基因座数量多于从木柄和橡胶柄螺丝刀中检出的数量;从脱落细胞遗留状态较差者握持过的螺丝刀中,检出了与该物品没有直接接触的脱落细胞遗留状态较好者部分STR基因座。结论接触者最后一次洗手时间是影响脱落细胞DNA转移的一个重要因素,在接触性DNA的提取检测和结果解释过程中,对有可能发生的二次转移现象应予以高度注意。     

利用种属特异性SSR荧光引物检出稀释液中罂粟DNA1例

正基于DNA检测技术建立的罂粟种属鉴别系统,能准确识别幼苗期罂粟、罂粟植株残渣、罂粟壳和罂粟种子,但针对涉毒案件中稀释液体所含罂粟的DNA种属检验目前尚无报道~([1-2])。本文应用种属特异性SSR荧光引物(simple sequence repeat,微卫星标记)的DNA检测技术,通过提取、扩增方法的优化,从1例涉毒案件送检的罂粟稀释浆液样本中检出SSR谱带并成功破案,为将来涉毒案件中类     

指纹脱落细胞的STR检验

正现场遗留的帽子、口罩、衣服、手套等生物学检材,一般含有较多脱落细胞,DNA检验比较容易,然而对于指、掌纹短时间接触部位,由于所含脱落细胞少,且部分细胞核DNA容易降解,STR分型成功率较低。本研究对指纹脱落细胞分别应用Chelex-100、QIAamp DNA Investigator Kit、Mag Attract M48 DNA Manual Kit磁珠及直接扩增法进行STR检验,并比较分析。     

PowerPlex~ 21试剂盒扩增后的分型图谱中Y片段丢失的识别

目的依据分型图谱,直观、简便识别是否存在Amelogenin基因Y片段丢失的可能。方法采用计算分型图谱中等位基因峰高之和比值的方法,统计1 968份人员样本经Power Plex~ 21试剂盒扩增后Amelogenin与D3S1358基因座之间的均衡性、Amelogenin X等位基因与Amelogenin Y等位基因的均衡性以及D3S1358基因座不同等位基因的均衡性情况。结果 90.8%的女性样本Amelogenin X等位基因峰高不低于D3S1358基因座等位基因峰高和的60%,94.9%的男性样本Amelogenin X等位基因的峰高不超过D3S1358基因座等位基因峰高和的70%。结论 Power Plex~ 21试剂盒扩增后的分型结果中,当Amelogenin基因只检测到Amelogenin X等位基因,且Amelogenin X等位基因的峰高不及D3S1358基因座等位基因峰高之和的70%时,应考虑存在Y片段丢失的可能性。     

法医DNA遗传分析仪毛细管阵列评价方法及实验比对

毛细管阵列是法医DNA遗传分析仪的关键耗材,影响着DNA检验的成败。通过空间校正评判阵列检测窗口性能;以LIZ500内标和Ladder为研究对象,确定重现性评价标准和RSD值;同时考察阵列分离效率,并检测扩增样品分型能力,旨在确定毛细管阵列品质评判的性能指标。实验证明,各项性能指标能够满足对毛细管阵列产品的评价需求,从而为其质量鉴定及在刑侦领域的实际应用提供理论依据和参考,并通过实际对比试验对国产毛细管阵列的应用推广提供了可信的数据支撑。     

硅珠法提取腐败肋软骨DNA

本文对硅珠法在提取腐败肋软骨DNA方面进行实验研究,硅珠提取法克服了常规Chelex-100提取法扩增效率低的缺点,具有简捷、灵敏的优点,并不受检材种类和条件影响,扩增成功率高,实验所需时间短,有很强的应用价值。     

男性Amelogenin基因座X片段缺失1例

使用Amelogenin基因座进行性别检测是目前检检验性别的主流手段,扩增检测Amelogenin基因座能同时检验X和Y染色体,结果解释简单,X和Y特异谱带之间只有6BP差异,即使严重降解的DNA也不会出现只扩增二个等位基因中的一个等位基因[1]。     

人体脱落上皮细胞DNA检验3例

一、案例简介案例1 2007年4月,某地农场内,一男子被杀害,发现时尸体已高度腐败,无法确定其身份。经调查,怀疑死者为农场内职工黄某,但该职工为孤儿,又无儿无女,无法从亲缘关系鉴定来确定其身源、而确定身源又是本案侦破的突破点。于是,考虑从该职工作的起居场所提取可供检验比对的检材进行DNA检验。现场勘查发现床上的枕头套比较适合,将枕套提取回实验室进行检验。