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目的探讨建立室温保存10年队上大麻干叶及大麻树脂DNA提取方法。方法采用SDS及改良高盐低pH方法,改变提取缓冲液中β-巯基乙醇终浓度,增加用酚、氯仿快速抽提过程,提取新鲜和陈旧大麻(树脂)DNA,应用大麻叶绿体trnLintron引物进行PCR,琼脂糖凝胶电泳法检测扩增产物。结果用高盐低pH方法获得了10年以上大麻干叶及树脂清晰的电泳图谱,其中成功提取了1份23年陈旧大麻的DNA。结论高盐低pH方法操作简便、实用,可望用于陈旧、微量大麻植株的DNA检测,对于涉毒案件中特殊大麻标本的检验具有一定意义。 相似文献
95.
目的利用线粒体DNA(m tDNA)上细胞色素氧化酶辅酶Ⅱ(COⅡ)中635bp基因序列,解决嗜尸性苍蝇及其卵和幼虫种类鉴定的难题。方法随机采集放置在呼和浩特地区室外草地家兔尸体上的嗜尸性苍蝇、幼虫、苍蝇腹中的卵。利用Chelex方法提取上述苍蝇m tDNA;通过Perk in-E lm er 9600扩增仪进行PCR扩增;琼脂糖水平电泳和银染显色技术进行扩增结果检测;PCR胶回收试剂盒纯化;AB I 377测序仪测序;DNAMAN 4.0序列分析软件,进行序列比对,截取等长度片段;MEGA2.1软件包进行序列分析和构建系统发育树。结果上述嗜尸性苍蝇m tDNA上COⅡ基因序列在双翅目嗜尸性苍蝇的种内差异均数小于1%,种间差异均数大于3%,成虫与幼虫、卵无明显差异。以此能够根据COⅡ序列差异判断两个个体是否同种。然而,对于亲缘关系非常接近的铜绿蝇和丝光绿蝇来说,由于二者的种内、种间进化分歧均数非常接近,运用上述两个片段则很难区别。结论m tDNA上COⅡ序列分析能有效地对绝大多数嗜尸性苍蝇进行种类鉴定。该检测方法快速、简便和精确,能作为法医鉴别嗜尸性苍蝇种类的依据。 相似文献
96.
用随机引物PCR(AP PCR)技术对鸡柔嫩艾美球虫(Eimeria tenella)黑龙江株(H)、山东株(S)及黑龙江株与山东株的杂交株(F1)进行了研究,同时对 2 个不同地理株的子代株与亲代株和F1 株的亲缘关系进行了分析。结果,鸡柔嫩艾美球虫不同地理株之间以及同一地理株的亲代与子代之间存在DNA多态性;并且不同地理株间的种内变异程度较大(Si=0.642 3~0.637 0);同一地理株亲代与子代之间的亲缘关系也稍有改变,但其变异程度不大(Si=0.983 0~0.981 1)。对F1 株的AP PCR分析发现,F1 株与H株、S株的相似值分别为0.692 9、0.682 5,介于H株与S株相似值和传代株间的相似值之间。结果表明,F 株既具有两亲本株的遗传性状,又发生了变异。 相似文献
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一种简便的DNA提取方法在动物毛发检验中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立一种简便的DNA提取方法,用于动物毛干的DNA抽提。方法利用PCR缓冲液及蛋白酶K在PCR仪上对毛发进行消化,以此DNA为模板,扩增mtDNA 12S rRNA基因的部分片段并进行序列测定,测序结果在GenBank上进行BLAST搜索,再利用DNAMAN软件进行同源性分析。结果利用这种新DNA抽提法能从无毛囊毛发中获得后续PCR扩增所需的线粒体DNA。结论该法在无毛囊毛发样本鉴定中具有较高的应用价值。 相似文献
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1案例资料
2008年某日上午,四川籍服务员叶某某去宾馆上班,发现宾馆的门开着,服务台被翻动的很凌乱,并发现老板娘陈某某满身是血的躺在地上,立即报警。 相似文献
99.
FTA-DNA直接提取法的研究与应用 总被引:1,自引:1,他引:0
目的建立一种简约且易于自动化操作的Whatman FTA卡血样DNA提取方法。方法取直径1.2mm FTA卡血样,分别用FTA-DNA直接提取法及FTA常规提取方法提取DNA,AB-Identifiler^TM试剂盒分别进行10山和25山体系检测比较,并筛选批量grA卡血样DNA自动化提取程序。结果200份grA卡血样分别采用2种方法提取DNA模板,25μl体系PCR-STR检测,分型结果均良好。10μl体系检测,FTA-DNA直接提取法优于FTA常规提取方法,图谱RFU值为1000~2000,采用自动化工作站运行该提取程序较手工操作DNA分型图谱均衡性更佳;采用FTA常规提取方法检测,图谱RFU值100~2000,小片段优先扩增现象明显,且有19%的样本出现丢峰现象,采用自动化工作站运行该程序对其结果改善不明显。经工作站运行FTA-DNA直接提取法自动程序及10山体系检测本2万余份FTA卡采集的血样,均获得16个STR基因座DNA分型结果。结论本文建立的FTA-DNA直接提取法适用于FTA卡血样自动化DNA建库。 相似文献
100.
根据GenBank中的鹌鹑线粒体DNA(mtDNA)12sRNA基因保守序列,用Primer5.0软件设计了1对针对鹌鹑的特异性扩增引物,建立了一种检测鹌鹑动物源性成分的PCR方法.通过聚合酶链式反应(PCR)从鹌鹑肉和鹌鹑肉骨粉样品中扩增到了235 bp的目的片段,而参考物种鸽、鸡、鸭、鹅、鸵鸟、鹧鸪、牛、羊、马、驴、鱼和空白对照则无目的片段,说明该引物只对鹌鹑有特异性.测序结果表明,鹌鹑组织PCR产物的核苷酸序列与GenBank中检索到的相应序列相吻合;该方法的检测灵敏度为1 g/kg. 相似文献