三唑仑及α-羟基三唑仑检验

使用内部质量控制的酶水解、液一液萃取法提取,ＧＣ—ＥＣＤ及ＧＣ—ＭＳ／ＭＳ检测 法对体内组织、体液的三唑仑及α－羟基三唑仑进行检测,能够同时定量检测出其他方法 难于检测的。一羟基三哇仑和三哇仑成份。该法具有方法简便、灵敏度高、重现性好、线 性范围广、回收率高的特点,经办案实践,证实能够满足实际办案工作的需要。     

内毒素血症山羊NO代谢的变化及氨基胍对山羊血浆NO水平的影响

为了探讨内毒素(LPS)血症时NO在机体病理损伤中的作用,将22 只山羊随机分为5组,即内毒素血症模型组(LPS 1 800 EU/kg)、内毒素血症氨基胍(AG)组(AG 25 mg/kg)、大剂量内毒素血症模型组(LPS 5 400 EU/kg)和大剂量内毒素血症AG组和对照组。分别于处理后第1、4、8和24 h采集血液,检测血浆中NO水平、环磷酸腺苷活性及血清中一氧化氮合酶活性。结果表明,山羊内毒素处理后一氨化氮合酶活性增强、NO含量增加、环磷酸腺苷浓度升高。提示,内毒素血症时,过量的NO在机体病理损伤中起中介作用,给予诱导型一氧化氮合酶抑制剂AG能缓解内毒素血症进一步恶化。     

石胆酸诱发豚鼠胆囊炎动物模型的病理学研究

以酶病理组织化学方法结合胆汁生化分析，研究了石胆酸（ＬＣＡ）诱发豚鼠胆囊炎和胆结石的形成过程中，肝胆系统内源性β葡萄糖苷酸酶（βＧＣＤ）、酸性粘多糖及多种胆汁成分的变化。结果表明，ＬＣＡ能造成肝损伤，引起豚鼠增生性胆囊炎病变；肝和胆囊中内源性βＧＣＤ活性明显升高；胆汁βＧＣＤ含量显著升高，且与ＵＣＢ／ＴＢ比值显著正相关。     

dUTP/UNG体系研究进展及法医学应用展望

尿嘧啶-DNA糖基酶（UDG）是一种普遍存在的酶,在DNA损伤修复中起着关键作用。其亚家族I(UNG专一性识别并催化去除DNA中的尿嘧啶。UNG结合d UTP组成的d UTP/UNG防污染体系,是消除PCR产物污染的重要方法。目前法医实验室DNA检验灵敏度不断提高,但是随之而来的污染问题引起研究者的日益关注,在法医学实验室应用d UTP/UNG防污染体系在防污染上具有独特优势,但是目前尚未有相关报道。文章综述了d UTP/UNG防污染体系的技术原理及研究进展,并展望了其在DNA实验室应用的优势和可行性。     

青海高原产纤维素酶康氏木霉的酶促动力学研究

对分离自青海省东部土壤的产纤维素酶康氏木霉 (Trichodermakoningii) 0 14 3p株进行产酶条件优化及酶促动力学特性研究。结果表明 ,T .koningii 0 14 3p菌株在麦麸为碳源、尿素为氮源、起始 pH值为 7.0、2 8℃培养 6d的条件下产酶量最高。在此产酶优化条件下 ,0 14 3p菌株的湿固体发酵物滤纸酶活力 (FPA)可达 32 μmol/min ,为原产酶条件的 1.6倍 ;酶作用的最适温度为 5 0～ 5 5℃ ,最适 pH 4 .8。T .koningii 0 14 3p菌株可作为纤维素酶解饲料的酶源菌 ,具有良好的饲用前景     

广东省东莞市犬狂犬病的流行病学调查

调查了广东省东莞市2008年犬的饲养情况及2006年的免疫情况;应用ELISA对2006～2007年采自东莞市32个镇区的1 772份犬血清样品进行了狂犬病病毒抗体效价的检测;采用RT-PCR方法对2006～2007年采自上述区域的104份犬脑组织样品和789份犬唾液样品进行了病原学检测.结果,全市共养犬10万多只,其中农村和城镇各占50%,狂犬病疫苗的注射率约为83.5%.1 772份犬血清样品中,免疫合格率为52.31%,其中2006年的免疫合格率为35.92%,2007年的免疫合格率为70.69%;893份犬脑组织和唾液样品中,狂犬病病毒的阳性率为1.57%.结果表明,2007年东莞市犬的狂犬病免疫水平有大幅度提高,当地犬可能携带狂犬病病毒.     

福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的克隆及其原核表达

根据福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的序列,设计并合成了1对特异性引物,在引物的5'和3'端分别加入含有BamHⅠ和SalⅠ限制性酶切位点的序列,以福氏志贺菌2a菌株基因组DNA为模板扩增了marA基因序列.将PCR产物与pMD18-T载体连接,转化到大肠杆菌DH5α.鉴定成功获得目的片段后,经BamHⅠ+ SalⅠ双酶切并与载体pET-30a连接,构建原核表达质粒pET-30a-marA,并将其转化宿主菌BL21(DE3)pLys,用IPTG诱导其表达.SDS-PAGE分析表明,重组载体pET-30a-marA可成功地在大肠杆菌中表达MarA蛋白.Western-blotting检测证明,该蛋白能与志贺菌阳性血清发生特异性反应.     

动物源食品中残留克伦特罗检测抗体的制备与应用

采用重氮化法将盐酸克伦特罗 (CL)与牛血清白蛋白 (BSA)交联 ,用紫外扫描和凝胶电泳对交联物鉴定后免疫新西兰纯毛白兔 ,制备抗血清。经鉴定 ,抗血清中含有针对CL的抗体 ,效价为 3.2× 10 5;以此抗体为基础 ,设计了间接酶联免疫法 ,该法的检出限为 0 .0 96ng/mL ,对加于尿液、血液和组织中CL的回收率为 80 %～ 12 0 % ;通过重复性、灵敏度、准确性等指标对该法进行了评估 ,并与高效液相层析 (HPLC)及国外进口试剂盒进行了比较 ,表明该法的各项参数均能满足实际检测的需要。     

不同硒添加剂对仔猪生长肝脱碘酶Ⅰ活性和血清甲状腺激素水平的影响

将 2 34头杜×长×大断奶仔猪分为 13组 ,分别以纳米硒和亚硒酸钠 2种硒源 ,0 .1、0 .2、0 .3、0 .4、0 .5、1.0mg/kg 6个硒水平添加到基础日粮中 ,研究了纳米硒和亚硒酸钠对仔猪生长、肝脱碘酶Ⅰ活性和血清甲状腺激素的影响。结果显示 :亚硒酸钠硒水平 0 .1mg/kg组仔猪的生长性能趋于平台 ,0 .3～ 1.0mg/kg组仔猪的生长性能随着硒添加浓度的增加而下降 ,1.0mg/kg组仔猪的生长性能显著低于 0 .2～ 0 .4mg/kg组仔猪。纳米硒水平 1.0mg/kg组仔猪的生长性能保持在高峰平台。硒添加浓度为 0 .1～ 0 .3mg/kg时 ,亚硒酸钠和纳米硒对仔猪生长性能的影响无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;硒添加浓度为 0 .4～ 1.0mg/kg时 ,纳米硒组仔猪生长性能显著高于亚硒酸钠组 (P <0 .0 5 )。硒添加浓度为 0 .1～ 0 .2mg/kg时 ,两种硒源对脱碘酶Ⅰ活性、血清T3、T4 的影响无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;硒添加浓度为 0 .3～ 1.0mg/kg时 ,纳米硒组脱碘酶Ⅰ活性和血清T3水平显著高于亚硒酸钠组 (P <0 .0 5 ) ,血清T4 水平显著低于亚硒酸钠组 (P <0 .0 5 )。纳米硒的Weinberg剂量 效应的最适剂量范围宽于亚硒酸钠。     

雷公藤红素对多发性骨髓瘤细胞株LP-1凋亡的诱导作用

目的 研究雷公藤红素对多发性骨髓瘤细胞LP 1凋亡的诱导作用及可能机制。方法 通过雷公藤红素体外作用于多发性骨髓瘤LP-1细胞,研究其对于细胞增殖及细胞凋亡的影响。采用EnoGeneCellTM细胞计数试剂盒 8(cell counting kit-8,CCK-8)研究雷公藤红素对LP-1多发性骨髓瘤细胞体外增殖的影响,采用膜联蛋白Ⅴ（Annexin Ⅴ）-增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein, EGFP）荧光染色法定性检测及流式细胞术定量检测雷公藤红素对LP-1多发性骨髓瘤细胞株凋亡的诱导作用,采用级联酶底物显色法检测雷公藤红素对LP-1多发性骨髓瘤细胞Caspase-3酶原活化状态的影响。结果 雷公藤红素能明显抑制LP-1多发性骨髓瘤细胞体外增殖,其半数抑制浓度（half inhibitory concentration, IC50）为0.881 7 μmol/L。雷公藤红素可诱导LP-1细胞发生细胞凋亡,此效应具有剂量依赖性,雷公藤红素60.0 μmol/L作用于LP-1细胞24 h可诱导细胞凋亡百分率达到80.7%。雷公藤红素可引起LP 1细胞Caspase 3酶原活化。结论 雷公藤红素可抑制多发性骨髓瘤细胞株增殖,诱导其凋亡,此作用可能通过Caspase 3酶原活化途径而实现。