鼠抗人转铁蛋白单链抗体基因的构建

目的为了得到可经载体连接表达、并只由抗体可变区构成的单链抗体基因而进行本实验.方法经扩增得到的鼠抗人转铁蛋白抗体轻、重链可变区基因经凝胶电泳分离、离心柱纯化及定量,同能柔性折叠的一段短连接肽基因一起进行扩增拼接反应,而后在含限切酶位点的引物指导下扩增引入限切酶SfiI和NotI的酶切位点识别序列,产物以电泳鉴定、纯化和定量,再分别用SfiI和NotI酶切消化,最后再柱纯化.结果得到了携带可与载体连接的粘性末端的鼠抗人转铁蛋白单链抗体基因.结论两个不同的基因通过两端含互补序列的第三个基因片断可只经过扩增而无需DNA连接酶的作用而连接起来.对于抗体基因可由此而产生新的轻重链基因的组合,有可能产生性能更优异的抗体.     

开四关法治疗老年功能性便秘临床疗效观察

目的 观察开四关法治疗老年功能性便秘的临床疗效。方法 将70 例老年功能性便秘患者按随机数字表法分为治疗组和对照组,各35例。治疗组采用开四关法,对照组予常规针刺法。分别于治疗前后观察两组患者每周自主排便（spontaneous bowel movements,SBM）次数、便秘患者生活质量评价量表（patient assessment of constipation quality of life questionnaire,PAC-QOL）评分及简明生活质量量表(36-item short-form health survey,SF-36）评分,并检测一氧化氮（nitric oxide,NO）、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）、血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide,VIP）水平。结果 治疗组临床疗效优于对照组（P＜0.05）;在治疗2周、4周后,治疗组SBM次数均显著大于对照组（P<0.05）。两组患者治疗后PAC-QOL和SF-36总评分均有显著变化（P<0.05）,且治疗组较对照组改善明显（P<0.05）。治疗组治疗后NO、NOS、VIP降低程度显著大于对照组（P<0.05）。结论 开四关法治疗老年功能性便秘疗效确切,其部分机制可能与降低血清NO有关。     

棘球蚴囊液抗原A和B在酶联免疫吸附试验中的应用比较

用醋酸缓冲液和４０％饱和硫酸铵连续沉淀法从绵羊棘球蚴囊液（ＳＨＣＦ）中得到部分纯化抗原（ＳＰＰＣＦ），并从中分离了抗原Ａ和抗原Ｂ，分别用单克隆抗体反向间接血凝试验（Ｍ－ＲＰＨＡ）、单克隆抗体双扩散试验（Ｍ－ＤＤ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）进行了鉴别，表明自制的三株单克隆抗体（ＭｃＡｂ）均识别ＳＨＣＦ、ＳＰＰＣＦ及抗原Ｂ，而不识别抗原Ａ；用ＥＬＩＳＡ对阳、阴性血清检测，ＳＰＰＣＦ、抗原Ａ和抗原Ｂ的阳性检出率分别为８３．３３％、８３．３３％和７５％，阴性符合率分别为７２．２２％、８６．１１％和７５％，表明抗原Ａ的敏感性和特异性均优于ＳＰＰＣＦ和抗原Ｂ。     

抗HCG-B单克隆抗体酶免疫法进行血痕中妊娠鉴定

血痕妊娠鉴定在某些犯罪侦察案中有其重要的法医学鉴定价值。从血痕等检材中进行法医学妊娠鉴定已有多种方法报道。目前常用的HCG测定方法主要有乳胶凝集抑制试验(LAIT),反向被动血凝试验(LAT)以及一些LAT、LAIT的改良法。这些方法由于灵敏度低,特异性差而在法医学HC     

ABO基因分型及其在法医学中的应用

为建立一种ABO血型系统基因分型方法，采用PCR-RFLP技术，成功地将ABO系统区分为AA，AO，AB，OO，BB，BO六种基因型。对240名中国汉族无关个体血样的ABO（基因型频率调查结果表明，6种基因型的频率分布为0．0125～0．3834，符合Hardy－Weinbeng遗传平衡法则（P＞0．1），其DP值为0．8161。家系分析表明，亲代a、b、o基因传递遵守孟德尔遗传规律。对法医学中常见的血痕、混合斑、骨组织及毛发根部等生物样品进行检测，均能准确判定ABO基因型，并可在实际案件鉴定中应用。     

猪瘟疫苗免疫母猪所产仔猪的母源抗体检测

采用间接血凝试验 (IHA)和斑点酶联免疫吸附试验 (DotELISA)检测仔猪血清猪瘟母源抗体 ,其在 10、2 0、30和 40日龄的抗体阳性率分别为 94.1%、96 .9%、70 .4%、31.0 %和 82 .4%、96 .9%、74.1%、34.5 %,表明IHA用于仔猪早期的母源抗体检测比DotELISA更敏感。在此基础上用IHA检测了 10、15、2 0、2 5、30、35、40和 45日龄仔猪血清母源抗体 ,其群体抗体阳性率分别为 97.1%、95 .1%、93.9%、80 .0 %、74.3%、38.2 %、36 .7%和 33.3%,抗体平均效价分别为1∶10 9、1∶70、1∶47、1∶2 9、1∶2 3、1∶10、1∶9和 1∶8。     

单克隆抗体酶联免疫吸附抑制试验测定精斑G2m（n）因子

人类免疫球蛋白同种异型(human immunoglobulin allotypes)包括Gm、Km及Am等系统.在法医学实践中可用于个人识别和亲子鉴定.关于人精液中同种异型因子的检测报道极少,我们应用抗G2m(n)因子的检测国内外均未见报道,我     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性支气管炎抗体的研究

建立了辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记兔抗鸡ＩｇＧ检测鸡传染性支气管炎（ＩＢ）抗体的间接ＥＬＩＳＡ法，其抗原包被浓度为４ｍｇ／Ｌ，待检血清与酶结合物的最佳稀释度各为１８０，酶结合物、抗原抗体的作用时间分别为６０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，封闭液的浓度和作用时间分别为１％和６０ｍｉｎ，ＯＤ值大于０．２８７的判为阳性。用此法检测经ＩＢＶ灭活苗免疫鸡所产蛋孵出的雏鸡的母源抗体，ＯＤ值的Ｐ／Ｎ值为６．０，１５ｄ后降至２．０以下。检测１１日龄经ＩＢＶＨ１２０弱毒苗免疫雏鸡的抗体，其Ｐ／Ｎ值于免疫后第１８ｄ达峰值（３．７）。调查的５４群发病鸡，其抗体阳性率为１００％，Ｐ／Ｎ值为４．０～７．５     

猪瘟病毒单克隆抗体的制备及其免疫组织化学研究

通过杂交瘤技术制备猪瘟病毒单克隆抗体,对酶联免疫吸附试验筛选的阳性单克隆抗体进行免疫组织化学研究,从中发现1株单克隆抗体能与感染猪瘟病毒的猪肾、肝病理组织切片及PK15细胞产生特异性染色反应,与非感染猪的肾、肝组织切片和PK15细胞无染色反应。单克隆抗体与猪瘟病毒感染的PK15细胞或猪肝、肾小血管内皮细胞中的猪瘟病毒呈现较强的特异性棕色着染,表明该单抗是针对猪瘟病毒的单克隆抗体,对研究猪瘟病毒在宿主细胞中的生命活动和繁殖定位有非常重要的意义。该单抗命名为YNF,培养上清液和腹水的抗体效价分别为1∶80和1∶10 000。抗体蛋白属IgG类,亚类为IgG2/κ。