不同消毒方式对现场DNA检出影响研究

目的 探讨新型冠状病毒敏感的消毒方式对于常见现场生物物证如血、脱落细胞的检出影响,探索在疫情期间现场勘查、实验室检验及尸体解剖前后的合理消毒方式.方法 采用《消毒剂使用指南》推荐的几种不同浓度化学消毒剂和紫外线照射等方式,对常量的血、口腔拭子和稀释的血、唾液斑进行作用后的样本DNA检出情况进行对比.结果 常用消毒方式对...     

DNase-Ⅰ纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA

目的研究脱氧核糖核酸酶I(DNase-I)纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA的方法在法医学中的应用。方法收集79份性犯罪案件混合斑检材,分别用DNase-I纯化结合碱性裂解法和差异裂解法提取精子DNA,采用STR荧光标记复合扩增体系进行16个STR基因座分型,并比较检验结果。结果应用DNase-I纯化结合碱性裂解法提取精子DNA,64例检材分型成功;应用差异裂解法提取精子DNA,57例检材分型成功;两种方法比较结果存在显著性差异(P=0.039),DNase-1纯化结合碱性裂解法提取精子DNA的STR分型成功率更高,成本低廉。结论DNase-I纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA可提高检验成功率,操作简便,快速,易于自动化,适于法医学个体识别鉴定。     

Successful STR and SNP typing of FTA Card samples with low amounts of DNA after DNA extraction using a Qiagen BioRobot EZ1 Workstation

FTA Cards (GE Healthcare) have been used for more than 4 years in Denmark for the collection of buccal cells as reference samples in crime cases. Semi-automated protocols for STR typing of DNA on punches of FTA Cards are routinely used. In average, full STR profiles were generated from approximately 95% of the FTA Cards with a standard punching protocol, while partial or no STR profile were obtained from 5% of the samples. Here, the Qiagen BioRobot^® EZ1 Workstation (Qiagen) and the EZ1 DNA Investigator Kit (Qiagen) was used to extract DNA from 29 FTA Cards from which a complete STR profile was not generated with the standard punching protocol. All 29 samples were successfully typed with the AmpF?STR^® Identifiler™ PCR Amplification Kit (Applied Biosystems) and with the SNPforID 49plex SNP assay. The lowest amount of DNA that resulted in complete STR and SNP profiles was 80 pg. The STR and SNP profiles were identical to those generated from another sample collected from each of the 29 individuals.     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅰ)

应用 MYO DNA 探针对中国人进行了 DNA 遗传指纹图检验。从两个家系16人及100个无关个体中取肘静脉血提取 DNA,用限制性内切酶 HinfⅠ或 HaeⅢ水解,1%琼脂糖凝胶电泳分离,经 Southern印迹转移,MYO DNA 探针杂交,获得了清晰可辨的 DNA 指纹图谱。结果每个个体在3.0Kb 以上均能检出10条以上杂交区带,个体间的相关概率<4×10~(-9),由杂交区带构成的图谱是个体特异的,杂交区带遵循孟德尔的显性遗传方式由亲代向子代遗传;具有 DNA Fingerprints 的特点。对两起亲子鉴定的案例进行指纹图检验,孩子所存在的杂交区带,除来自母亲外,其余可在嫌疑父亲带中找到,肯定了孩子与嫌疑人的父子关系。MYO DNA 探针在亲子鉴定与个人识别的法医学鉴定中有着重要的实用价值。     

根据Y-染色体特异DNA序列鉴定牙齿性别

人类牙齿的性别鉴定,是法医学个体识别中的一个重要部分。作者们应用限制性内切酶 HaeⅢ、Sau3A 水解60颗牙髓 DNA,琼脂糖凝胶电泳分离酶解片段,在紫外灯下直接观察。根据 Y-染色体特异 DNA 序列,3.4kb 长片段的有无,判断牙齿的性别。为牙齿性别的法医学鉴定提供了一种简单、准确的新方法。     

大鼠肝细胞DNA含量与早期死亡时间关系的图像分析研究

实验选择 15只大鼠 ,处死后 ,在 2 4h内 ,每隔 1h取肝组织块进行细胞学涂片、福尔马林液固定、Feul gen染色、自动图像分析仪测量、统计学处理数据。结果表明 ,肝细胞DNA含量在死后 2 4h内 ,随死亡时间的延长而较有规律的下降。其中积分光密度、平均光密度、异形指数是用来研究死亡 2 4h内肝细胞DNA降解规律 ,并准确推断死亡时间的较好指标。     

“中国罪犯DNA数据库“模式库:13个STR位点基因在中国人群中的分布

目的:对D3S1358、vWA、FGA、D8S1179、D21S11、D18S51、D5S818、D13S317、D16S539、THO1、TPOX、CSF1PO、D7S820等13个STR位点进行多态性调查,探索其用于"罪犯DNA数据库"的可行性.方法:用多重PCR和四色荧光自动化检测技术分析13个STR位点的基因型,计算各位点等位基因的分布频率.结果:获得13个STR位点在中国南北汉族、维吾尔族、回族人群中的等位基因分布频率资料.结论:上述位点适合作为中国人群的遗传学标志,用于"中国罪犯DNA数据库"的建立.     

MVR-PCR及其法医学的应用

小卫星可变重复单位作图(MinisatelliteVariantRepeatmapping,MVRmapping)是近十年发展起来的一项DNA分析技术。本综述对该技术的分子学基础、发展过程及其在法医学的应用作了系统的阐述。认为该技术在个人识别与亲子鉴定方面发挥着为其它DNA分析技术所不可替代的作用,正在成为法医学生物检材检验的重要手段之一。     

HLA-DRB1基因分型芯片的法医物证学应用价值研究

目的对HLA-DRB1基因分型芯片在个体识别中的应用价值进行研究。方法根据HLA-DRB1基因座不同等位基因的独特序列设计探针,制成分型芯片。将待测样品DNA用末端标记了CY5的引物进行PCR扩增,产物与芯片进行杂交,根据杂交产生的荧光信号值确定样品在HLA-DRB1位点的基因型。将这一方法应用于561份样本的HLA-DRB1基因分型,根据基因型分布统计分析其法医学应用价值。同时,进行了家系调查和方法灵敏度分析,并应用于部分案例。结果利用微量检材,HLA-DRB1基因芯片可检测DRB1位点等位基因26个,基因型的分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,该位点的观察杂合度(Ho)为0.888,期望杂合度(He)为0.902,多态信息含量(PIC)为0.893,平均非父排除率(PE)为0.801。家系调查和案例运用的结果表明,HLA-DRB1位点等位基因由亲代向子代的传递符合孟德尔遗传定律。结论HLA-DRB1为高度多态位点,其基因分型芯片可在亲子鉴定和个体识别中发挥重要作用。     

国内外“DNA数据库”遗传学标志的比较研究

目的通过英、美、中"DNA数据库"遗传学标志的比较,探寻我国大规模建库宜用的STR位点.方法用复合PCR扩增和四色荧光技术对我国汉族群体进行基因型检测,获得D2S1338、D19S433、CODIS等15个STR位点的多态性分布资料,并结合目前国内外法医学者报道的其它STR位点进行比较分析.结果Profiler Plus试剂盒中的STR位点和D16S539、D2S1 338、D19S433、Penta D、Penta E任中国人群中有重要应用价值.结论为便于建立DNA实验室技术标准和质控标准,提倡开发和使用适合我国人群的商品化STR检测试剂盒.