用斑点ELISA方法检测p30确证人类精斑

作者建立了检测精浆特异性抗原p30的斑点ELISA试验方法,确证人类精斑。p30最小检出量为0.4ng。用该法盲测了室温存放1年的生物性斑痕180例,无一例假阳性和假阴性,证明用此法确证人类精斑的敏感性和特异性均优于传统的方法,具有操作简便、快速,检材用量小,结果准确等优点。     

猪带绦虫TS61抗原基因的克隆及表达分析

以PCR扩增猪带绦虫TS61抗原基因 ,与载体 pUC18连接后进行测序 ;并构建了该基因的pGEX 1λT原核表达载体 ,制备了其原核表达产物 ,进行浓度梯度SDS PAGE和免疫印迹分析 ;对该基因的碱基序列及其编码蛋白进行了同源性比较。结果表明 ,猪带绦虫TS61抗原基因含 893对碱基 ,编码含 70个氨基酸残基的多肽 ,分子质量为 8.0ku ,等电点为4.19。在基因库和欧洲分子生物学实验室数据库中均未发现该基因的同源序列。重组质粒在大肠埃希氏菌中表达的融合蛋白分子质量为 3 4ku ,该蛋白抗原能被兔抗猪囊尾蚴超免疫血清所识别。     

布氏杆菌单克隆抗独特型抗体细胞株的建立及免疫特性测定

在建立了布氏杆菌单克隆抗体细胞株的基础上,筛选具有强保护作用的细胞株A_7免疫BALB/C鼠,进行细胞融合。用竟争抑制ELISA筛选出5个阳性孔。克隆化后首次建立了9个布氏杆菌单克隆抗独特型抗体细胞株。其中F9株经传25代后及液氮冻存复苏后仍能稳定地产生生高效价的抗独特型抗体。其Ig类型鉴定为IgG_(2a),并证实具有抗原“内影象”。以鼠RBC为载体将其吸附于RBC上进行小鼠免疫试验,检测结果表明该抗独特型抗体具有良好的免疫原性,能诱导免疫动物产生相当效价的抗布氏杆菌抗体(Ab_3)。     

改良法检测微量血痕Gm抗原

Gm抗原为Grubb于1956年首次报道,其后相继发现了一系列密切相关的Gm抗原,讫今已叙述过的这类抗原至少有24种之多。世界卫生组织在1965年对Gm命名进行了修正,即是用数字来表示这一系统的有关抗原。由于Gm抗原是共显性的常染色体连锁等位基因的遗传产物,因而其表现型呈复染的遗传多态性。Gm抗原存在于     

中国大陆株日本血吸虫23kD基因重组抗原的研究──23kD抗原大亲水区多肽基因重组抗原的制备及抗原性测定

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术从中国大陆株日本血吸虫成虫ｃＤＮＡ文库筛选到一编码２３ｋＤ抗原大亲水区多肽的克隆基因，并把它连接到ｐＧＥＸ载体上进行ＤＮＡ序列分析和蛋白质表达。结果表明，该克隆基因和编码菲律宾株日本血吸虫２３ｋＤ抗原大亲水区多肽的克隆基因碱基组成非常相似，１９３个碱基中只有一个不同，而且这个碱基差异不影响氨基酸序列组成。该重组基因在大肠杆菌里得到高产量表达，而且融合蛋白的纯化很方便。免疫印渍转移试验表明，该融合蛋白能被慢性感染日本血吸虫的小鼠血清、辐照致弱日本血吸虫尾为免疫动物血清、日本血吸虫成虫膜抗原和血吸虫谷腕甘肽转移酶（ＧＳＴ）免疫小鼠血清所识别，具有较强的抗原性。     

应用DotELISA检测鸡白血病病毒群特异性抗原

利用斑点酶联免疫吸附试验( DotELISA) 的基本原理,根据蛋清可以直接吸附在硝酸纤维素( NC) 膜上的特点,建立了DotELISA 检测鸡白血病病毒(ALV) 群特异性抗原的方法,并与双抗体夹心酶联免疫吸附试验( DASELISA) 进行比较,两种方法具有相同的特异性和敏感性。     

应用重组猪生殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白为抗原建立I-ELISA检测方法的研究

用重组杆状病毒表达的猪生殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白作为抗原,建立了诊断猪生殖和呼吸综合征(PRRS)的I-ELISA,与IDEXX公司试剂盒检测结果的符合率为97.3%,与间接荧光抗体试验(IFA)的符合率为100%.用该方法检测国内猪血清85份,阳性率为18.8%;能检出PRRS疫苗免疫猪6 d的血清抗体;与猪瘟、伪狂犬病、猪巴氏杆菌病、猪霉形体病阳性血清无交叉反应.     

增殖细胞核抗原在非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义

研究非霍奇金淋巴瘤 (NHL)中 ,增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达水平 ,探讨其与非霍奇金淋巴瘤恶性度的关系。方法 :常规HE染色进行组织学分类 ,利用免疫组织化学 (LSAB法 ) ,确定肿瘤的免疫表型 ,检测淋巴瘤中PCNA的表达。结果 :62例非霍奇金淋巴瘤中 ,低度恶性 3 9例 ,高度恶性 2 3例 ;48例为B细胞淋巴瘤 ,14例为T细胞淋巴瘤。该组病例中 ,PCNA阳性 62例 ,阳性细胞数均 10 %以上 ,PCNA的阳性程度与NHL的恶性度有关 ,在低度恶性组多表现为 +～ , 占 2 5 6% ,而高度恶性组只有 1例为 +, 占 5 2 2 %。 10例淋巴结反应性增生组织中 ,滤泡中心可见少数 (阳性细胞数 <10 % )散在分布的PCNA阳性细胞。结论 :PCNA表达的阳性程度与NHL的恶性度有关 ;PC NA在NHL高度恶性组的高表达提示我们在组织学水平判断NHL的恶生程度PCNA将是很重要的参考标记物     

5种消毒药对鸡传染性腔上囊病病毒的杀灭效果试验

用市售的腆类化合物、氯制剂、双季铵盐类化合物、酚类制剂和醛类制剂与鸡传染性腔上囊病病毒(IBDV)相混合,在4℃和30℃作用24 h,用1000 ID50的剂量作用后的病毒液感染23日龄健康AA鸡.感染后72 h扑杀试验鸡,取其腔上囊,用IBD-ELISA快速诊断盒检测IBDV抗原,仍呈阳性反应;用3 mL/L的甲醛溶液与IBDV病毒液混合,在37℃作用24、36和48 h后,按以上剂量感染鸡,感染后72 h扑杀,取其腔上囊,用IBD-ELISA快速诊断盒检测IBDV抗原,全部呈阴性.     

乳牛孕酮人工抗原的制备与鉴定

采用二环己基碳化二亚胺偶联法将孕酮-11α-半琥珀酸酯(11-αOH-P4-HS)分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)载体偶联,制备乳牛孕酮人工抗原P4-BSA和P4-OVA,并用SDS-PAGE对制备的人工抗原进行测定。再用制备的人工免疫抗原P4-BSA免疫BALB/c小鼠制备免疫血清。用P4-OVA作为ELISA检测抗原,方阵滴定法确定检测抗原的最佳包被浓度,间接ELISA测定免疫血清中抗体的特异性及效价。结果表明,成功制备了乳牛孕酮人工抗原,P4-OVA的最佳包被浓度为5.82×10-5ng/mL,最佳封闭液为50 mL/L的羊血清,免疫血清具有良好的特异性。