大鼠脑挫伤后神经元一氧化氮合成酶表达的研究

为观察脑挫伤后NOS1的表达及其与损伤时程的关系 ,采用自制自由落体撞击法致大鼠右顶叶局灶性脑挫伤模型 ,于不同时间段处死大鼠后 ,进行NOS1的免疫组织化学及原位杂交法研究 ,结果发现NOS1及其mRNA表达水平与伤后经过时间有一定相关性 ,即随着伤后经过时间的延长 ,NOS1及其mRNA表达逐渐增加 ,并能较好地鉴别脑挫伤之死前伤和死后伤 ,可作为推断脑挫伤经过时间的参考指标之一。     

An autopsy case of intraoperative death due to pulmonary fat embolism--possibly caused by release of tourniquet after multiple muscle-release and tenotomy of the bilateral lower limbs

Acute interstitial pneumonitis (AIP), also known as Hamman-Rich syndrome, is a distinct type of idiopathic interstitial pneumonia affecting patients of both genders without pre-existing lung diseases. We describe the case of a fulminant form of AIP and discuss the pathophysiological mechanisms of AIP with reference to the histological pattern. A 15-year-previously-healthy male boy presented to the Hospital with a 6-day history of malaise, fever and cough. The clinical prodromes were followed by the acute onset of increasing shortness of breath rapidly progressing in acute respiratory failure. Chest X-ray demonstrated bilateral diffuse airspace opacification; the high resolution CT confirmed the presence of bilateral, symmetric diffuse ground-glass attenuation. The patient was admitted to the intensive care unit, but died after few hours. An autopsy was performed within 24h. The histological examination of lung specimens showed a pattern of diffuse alveolar damage. immunohistochemical, microbiological and toxicological tests were also carried out. The clinical presentation, the histological findings and the exclusion of infective, traumatic, toxic and metabolic causes of acute respiratory distress syndrome (ARDS) allowed us to conclude that the boy was affected by AIP. In conclusion, AIP is a diagnosis of exclusion. It has a mortality rate ranging about 50%, despite mechanical ventilation. In fatal cases of AIP diagnosis can be based on clinical presentation, radiological, histological and microbiological findings and can be further confirmed by immunohistochemical analysis.     

大鼠早期心肌缺血纤维蛋白原与肌红蛋白的免疫组织化学对比性研究

按Selye法结扎Wistar大鼠冠状动脉左前降支，复制早期心肌缺血（EMI）模型。根据心肌缺血不同时间（15min、30min、1h、2h、3h）分5个实验组，另设1个对照组；每组取心尖部及其邻近的心肌组织制成石蜡切片，进行HE、链霉系合素生物素过氧化物酶（SAB）染色。结果表明：早期心肌缺血30min组，缺血区心肌即出现肌红蛋白（Mb）缺失和纤维蛋白原（Fg）染色增强。随着缺血时间延长，Mb缺失或Fg染色增强范围扩大，程度加重，从心内膜下向外层心肌发展呈“波浪式推进现象”，二者在心肌缺血过程中的变化规律相同，灵敏度相似，但Fg易受血液污染而致其可靠性较Mb差。在注意血液污染的前提下，SABC－Fg技术为诊断EMI提供了新的途径。     

急性心肌缺血再灌注时Bax的免疫组织化学研究

目的　为心肌缺血 /再灌注损伤所致心性猝死的法医学诊断提供形态学依据 ,方法运用免疫组织化学方法 ,研究Bax蛋白在心肌组织中不同区域的表达。　结果　对照组正常心肌组织无Bax蛋白表达。Bax蛋白再灌注 0 .5h后即可在缺血区域表达 ,且表达主要在心肌内层。再灌注 1h后可观察到Bax蛋白不仅表达于心肌内层且已经扩展至心肌的全层。再灌注 2h发现心肌外层表达明显强于心肌内层 ,随着再灌注时间的延长可以发现Bax蛋白的表达逐渐减弱。　结论　在急性心肌缺血再灌注中 ,Bax基因对心肌细胞凋亡的发生有着重要的作用 ,且可以作为心肌缺血再灌注的早期诊断提供一项辅助诊断依据。     

实验性脑挫伤后神经元和星形胶质细胞反应的时间性变化

运用免疫组化技术，以神经元特异性烯酸酶（NSE）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）作为标记物，观察大鼠实验性脑挫伤后不同存活时间中神经元和星形胶质细胞的数量变化。结果发现，伤后3h可见NSE和GFAP染色变化，且随着存活时间延长，脑皮质内挫伤处周围神经元逐步减少，而星形胶质细胞则逐渐增加，具有一定的时间规律性。为脑挫伤后早期存活时间的推断提供了新的方法。     

心肌病猝死者心肌连接蛋白43的免疫组化染色观察

目的探讨心肌病猝死者心肌连接蛋白43(Cx43)染色变化及其与猝死的关系。方法运用免疫组化和图像分析技术,分2组(A和B组)检测20例心肌病猝死者心室肌的Cx43染色情况;并与14例非心肌病猝死者(C组)的检测结果对照。结果扩张型心肌病(DCM)猝死组(A组,11例)心肌Cx43染色明显减弱,阳性着色斑点大小不等、深浅不一、分布不均,有的呈散在颗粒状;其它类型的心肌病猝死组(B组,9例)亦见类似变化;非心肌病猝死的对照组(C组,14例)未见明显变化。定量检测并经统计分析发现,Cx43蛋白染色阳性的面积,A组与B组和C组的差异有非常显著性意义(P<0.01),B组与C组的差异无显著性意义(P>0.05);而平均光密度各组之间的差异无显著性意义(P>0.05)。结论心肌病猝死者心肌Cx43免疫组化染色明显减弱,尤以扩张型心肌病明显;心肌病猝死者心肌Cx43变化可能与其猝死有一定关系。     

早期心肌梗死心肌细胞内纤维连接蛋白的免疫组化观察

应用免疫组化LSAB法，对34例尸检心脏标本，进行心肌细胞内纤维连接蛋白用于早期心肌梗死死后诊断的研究。其中尸检及组织学证实心肌梗死5例，其心肌细胞内纤维连接蛋白均呈阳性。冠状动脉有硬化或冠状动脉口狭窄的可疑心肌梗死18例，其中15例心肌细胞内纤维连接蛋白阳性。非心性死亡对照组11例，心肌细胞内纤维连接蛋白均呈阴性。实验表明，心肌细胞内纤维连接蛋白免疫组化观察在急性心肌梗死，尤其是早期心肌梗死死后诊断上具有重要价值，为早期心肌梗死的死后诊断提供了一个实用方法。     

类胰蛋白酶和IgE测定在过敏性猝死诊断中的应用研究

目的探讨过敏性猝死法医学鉴定的诊断方法和指标。方法采取10例正常人、9例过敏性猝死和19例其他死因（排除过敏反应、冠心病）尸体的静脉血，采用荧光酶联免疫法（Pharmacia UniCAP100过敏原定量分析仪）和酶联免疫吸附试验ELISA法分别测定血清肥大细胞类胰蛋白酶和]gE含量，采用免疫组化方法观察过敏性猝死和其他死因的肺组织中的肥大细胞类胰蛋白酶免疫组化染色。结果过敏性猝死者的血清类胰蛋白酶和IgE含量升高，与其他死因之间的差异具有显著性意义（P〈0．01），其他死因和正常人之间的差异无统计学意义（P〉0．05）；与其它死因相比，过敏性猝死肺组织中的肥大细胞类胰蛋白酶免疫组化阳性染色增强（P〈0．01）。结论过敏性猝死者血清IgE和肥大细胞类胰蛋白酶含量显著升高；过敏性猝死者肺组织中肥大细胞类胰蛋白酶染色增强。     

实验性兔羊水栓塞肥大细胞类胰蛋白酶的含量变化

目的观察家兔羊水栓塞 (AFE)后肺组织中肥大细胞类胰蛋白酶 (MCT)含量的变化。方法分别于健康怀孕家兔耳缘静脉注入羊水、制造羊水栓塞的动物模型 ;取肺组织进行HE染色和免疫组织化学MCT染色 ,镜下观察AFE兔肺组织中MCT的变化。结果对照组兔肺组织MCT呈弱阳性反应 (平均阳性细胞计数 11 2 5个 ) ,注入羊水组和注入胎盘提取液与羊水混合液组肺组织中MCT呈强阳性反应 (平均阳性细胞计数分别为 3 2 98和 45 5 3个 )。结论在羊水栓塞时兔肺组织MCT含量增加     

肥大细胞类胰蛋白酶的免疫组化染色观察

目的　观察过敏性休克死亡者咽喉、肺、小肠组织肥大细胞类胰蛋白酶 (MCT) ,探讨过敏性休克死亡法医鉴定的形态学依据。方法　交通事故致严重颅脑损伤死亡者 10例 (对照组 )、明确诊断为过敏性休克死亡者 15例(实验A组 )和羊水栓塞死亡者 8例 (实验B组 )的尸体 ,分别取其咽喉部、肺及小肠组织 ,石蜡切片 ,HE染色及用免疫组化超敏SP法进行MCT染色。结果　实验A组的咽喉部组织充血、水肿 ,咽喉部粘膜下层MCT增多 (MCT颗粒计数为 48 2 3 ) ;实验B组的咽喉部粘膜下层MCT增多 (MCT颗粒计数为 42 72 )。肺间质尤其是小支气管壁及小血管壁上MCT增多 (MCT颗粒计数分别为 46 98和 43 5 0 ) ,小肠粘膜层MCT增多 (MCT颗粒计数分别为 48 2 3和 42 72 )。对照组的咽喉部、肺和小肠MCT颗粒计数较少 ,分别为 7 79、 12 94和 2 0 2 5。实验A组与对照组相比 ,两组具有显著性差异 (P <0 0 1) ;实验A、B组相比 ,两组无显著性差异 (P >0 0 1)。结论　过敏性休克及羊水栓塞死亡的尸体 ,其咽喉部组织、肺组织及胃肠道组织MCT增多。