荧光二氧化硅纳米粒子的制备及在手印显现中的应用

目的制备二氧化硅纳米粒子并探索其在手印显现中的应用。方法先制备亲油性二氧化硅纳米粒子,然后加入不同的荧光物质,通过控制变量法筛选出最佳的纳米粉末与荧光粉末的质量比。将制备出的荧光二氧化硅纳米粉末与纳米粉末、荧光粉末进行手印显现效果的比较。结果荧光二氧化硅纳米粒子对多种不同载体表面的潜手印有良好的显现效果。结论荧光二氧化硅纳米粉末与传统粉末相比,在显现有背景干扰客体上的手印有明显优势;与普通荧光粉末相比,荧光二氧化硅纳米粉末具有与手印物质结合效果好,毒性小,不易刷糊,成本低的优势。     

10个STR基因座荧光复合扩增体系的研制

目的建立10个STR基因座荧光标记复合扩增体系,并评价其法医学应用价值。方法在北京、山西、广东汉族,辽宁满族、西藏藏族群体中调查STR基因座遗传多态性,筛选出9个具有高度多态性和法医应用价值的STR基因座及性别基因座。构建四色荧光素标记复合扩增体系,制备等位基因分型标准物,编制分析软件,并对体系的种属特异性、灵敏度、稳定性、混合样本等检测能力进行考察。结果建立的复合扩增体系遗传稳定好,累积非父排除率可达0.999 96,累积个体识别率可达0.999 999 999 999 3;与CODIS系统均不存在连锁遗传;各基因座间布局合理、无杂峰、扩增结果清晰易辨,并可实现检测分析自动化。体系种属特异性较好,灵敏度为0.1ng,稳定性好,混合样本检出范围在2∶8～8∶2之间。实际案例检材检测结果好。结论本文建立的复合扩增体系在法医学实践中有较好的应用价值。     

Detection of cellular material within handprints

A novel technique for the visualisation of cellular material has been published harnessing an external binding nucleic acid fluorescence dye, Diamond™ dye (DD), in combination with a digital fluorescence microscope. This technique can effectively detect cellular material on an object transferred by touch allowing targeted collection of latent DNA. Previous studies on the visualisation of touch DNA have focussed on transfer from fingertips only.Here we report on the visualisation of cellular material transferred via twenty different positions over the entire handprint. Three volunteers (a heavy, an intermediate and a light shedder) were asked to press their hands onto a plastic surface with medium pressure for 15 s at undefined time points post-handwashing, creating a complete handprint. DD was applied to the entire area and the presence of cellular material was recorded based on cells within 5 separate frames at each of the 20 positions. All tests were performed in triplicate such that the final dataset contained 1,800 observed frames.This extensive study allows accurate monitoring of cellular transfer deposited by different parts of the hand. Our study highlights which areas of an individual’s hand shed the greatest, or least, amount of cellular material. This simple process can act as a guide for DNA collection from items held within the entire hand, rather than only touched by the fingertips only, such as weapons, knives and steering wheels.     

纳米二氧化钛荧光粉末显现潜在手印研究

目的使用荧光染料包覆纳米二氧化钛颗粒,制备具有荧光效果的纳米二氧化钛粉末材料,并探索应用纳米二氧化钛荧光粉末显现潜在手印的方法。方法使用实验室合成的二酰亚胺染料与纳米二氧化钛微粒按照一定质量比混合制备形成荧光粉末,通过扫描电子显微镜对其进行表征,观察颗粒结构特征。在玻璃、瓷砖、透明塑料片、彩色塑料包装、易拉罐5类非渗透性客体上捺印手印,观察纳米二氧化钛荧光粉末对不同非渗透性客体上新鲜潜手印的显现效果。分别在5种客体上制作遗留时间为1、4、7、15d的手印样本,考察遗留时间对纳米二氧化钛荧光粉末显现自然陈旧手印效果的影响。将新鲜手印置于标准大气压100℃条件下分别加热1~72h,使用纳米二氧化钛荧光粉末显现,考察其对高温老化手印的显现效果。结果纳米二氧化钛荧光粉末为粒径100~200nm的圆形颗粒;在蓝绿光激发下可发出较强的荧光,能显现多种非渗透性客体上的新鲜手印,与背景反差明显并且能显著降低复杂背景对手印纹线的影响;显出新鲜手印中80%以上具有鉴定条件。纳米二氧化钛荧光粉末对遗留15d以内的陈旧手印仍具有较好的显现效果。100℃高温环境对手印显现效果没有明显影响。结论纳米二氧化钛荧光粉末经济、环保,显现操作简单,易于推广。     

槟榔提取物F57中槟榔碱的含量测定

目的:测定促胃肠动力有效部位F57中槟榔碱的含量。方法:采用酸性染料比色法测定促胃肠动力有效部位F57中槟榔碱的含量,测量波长为618 nm。结果:槟榔碱在19.7-115.3μg范围内呈线性关系,回归方程为y=8.900×10-3x-0.077 8,r=0.999 8。加样回收率为100.3%,RSD为0.731%(n=6)。结论:该法简便、灵敏,可为以后类似实验提供方法学借鉴。     

乳牛瘦蛋白基因荧光定量RT-PCR检测方法的建立

根据GenBank中瘦蛋白(leptin)基因序列设计合成了引物和探针,对荧光定量PCR的方法进行了方法学的评估,建立了TaqmanMGB荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明,由 pMD-18T瘦蛋白所构建的标准曲线线性关系良好,建立的瘦蛋白基因荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强(可检测出低于10个拷贝／μL的样品),准确可靠。     

纺织品上潜在手印“502”熏显染色法显现时效研究

为了筛选出＂502＂熏显染色法在涤纶、棉布、毛料等纺织品上汗潜手印的最佳显现方法和显现时效的问题,通过用＂502＂胶对纺织品上汗潜手印进行显现,再用三种荧光剂进行染色显现,筛选出显现效果最好的荧光染色剂,然后对其浓度进行筛选实验,找到显现效果最佳的染色剂浓度,最终确定不同遗留时间不同纺织品上汗潜手印的最佳显现工艺。     

微晶荧光乳浊液显现血、汗指纹的研究

目的　显现非渗透性和半渗透性客体上的血指纹、汗潜指纹。方法　应用微晶小颗粒荧光乳浊液显现血、汗指纹。结果　对常见的各种非渗透性和半渗透性客体上的新鲜和陈旧的血、汗指纹均可显出。结论　该方法与传统的物理显现方法相比较在于显出效果基本不受指纹遗留时间和客体的性质及表面颜色的影响 ,并且此方法实用、可靠 ,同时该配方还可用于非渗透性和半渗透性客体上涉油指纹的显现 ,是常见客体上血、汗指纹显现的一个重要突破     

沂蒙黑山羊发情周期不同阶段卵巢中FSHR和LHR基因表达规律的研究

选取健康未孕的成年沂蒙黑山羊,按发情周期(间情期、发情前期、发情期、发情后期)宰杀取卵巢,采用实时荧光定量差异显示PCR(real-time qRT-PCR)技术,以GAPDH为持家基因,对处于发情周期不同阶段的沂蒙黑山羊卵巢组织内的卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)基因进行了mRNA水平上的相对定量分析。发现FSHR mRNA、LHR mRNA在黑山羊发情周期的卵巢中都有表达。FSHRmRNA的相对表达量依次为0.618 7±0.294 42、1.290 2±0.290 24、2.575 9±0.458 80、0.790 8±0.261 93,其中发情期最高,间情期最低,两者差异极显著(P<0.01)。LHR mRNA的相对表达量依次为2.284 0±0.146 22、0.508 9±0.0789 9、0.340 3±0.045 38、2.859 2±0.205 66,其中发情后期相对表达量最高,发情期最低,两者差异极显著(P<0.01)。结果表明,FSH、LH在黑山羊的整个发情周期中是相互作用、相互影响的。     

牛病毒性腹泻病毒荧光标记单克隆抗体的制备及鉴定

为制备可以区分牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因型的荧光标记单克隆抗体,分别利用分泌抗牛病毒性腹泻Ⅰ型病毒(BVDV-Ⅰ)、牛病毒性腹泻Ⅱ型病毒(BVDV-Ⅱ)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV-Ⅰ和BVDV-Ⅱ)单克隆抗体的杂交瘤细胞株BV1、BV2、BV12,腹腔接种BALB/c小鼠,大量制备单克隆抗体,用辛酸-硫酸铵法提纯,经活性、浓度、纯度检测合格后,利用搅拌法与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联,制备成3种荧光标记单抗。结果显示,3种标记单抗的F/P比值范围均在2.0～4.0之间;细胞DFA法测定其效价均≥1∶200;抗原交叉试验证实标记单抗的特异性良好;标记单抗可以检测到1TCID50的病毒粒子;临床初步应用表明,3种标记单抗的阳性检出率均≥95%,与进口BVDV荧光抗体的符合率为100%。3种荧光抗体的研制对BVDV基因分型鉴定、NCP型BVDV的鉴定以及BVDV与CSFV的鉴别诊断有很好的应用价值,值得进一步开发。