酸性染料比色法测定宁心滴丸的含量

目的：采用酸性染料比色法测定宁心滴丸中的环维黄杨星D。方法：于410nm波长处检测显色后的氯仿提取液。结果：环维黄杨星D在0．9896－7．4420μg/ml范围内的直线回归方程为A＝0．04813＋0．06432C，相关系数γ＝0．9997，回收率为100．0％，RSD＝1．7％。结论：该方法简便、准确、无干扰，可用于宁心滴丸的质量控制。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株和经典毒株的序列差异,分别设计了1对特异性鉴别引物和1条TaqMan探针,建立了检测PRRSV变异株的荧光定量RT-PCR方法,并对该方法进行了特异性、敏感性、重复性试验。结果表明,建立的方法可鉴别诊断PRRSV变异株和经典毒株,具有较高的特异性;可以检测相当于1TCID50的病毒模板,比常规RT-PCR方法的灵敏度高100倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)<10%,具有较好的重复性。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对13份PRRS疑似病例肺组织进行平行检测,结果荧光定量RT-PCR检出11份阳性,高于常规RT-PCR方法。本研究建立的荧光定量RT-PCR方法能检测高致病性PRRSV变异株,不仅特异性好、灵敏度高,而且快速简便,可用于变异PRRSV的临床诊断和流行病学调查。     

新型荧光502粉末与502胶＋荧光染色显现潜在手印的比较

目的对新型荧光502粉末显现非渗透性光滑客体表面潜手印的一步荧光502显现新技术和传统502胶水熏显＋荧光染料染色显现手印技术进行比较研究。方法比较实验研究,对荧光502粉末和502胶水使用同一自动熏显柜先后进行熏显,荧光502粉末熏显结束后直接在蓝光灯下激发进行观察和拍照;502胶水在熏显完成和聚合物完全固化后使用罗丹明6G和BBD溶液进行荧光染色,再进行光致荧光照相。结果一步熏显和二次染色的显现效果基本相同,但两者的显现效果也因检材性质和遗留时间的不同而存在一些差别。结论新型荧光502粉末可以作为一种显现非渗透性光滑客体表面上潜手印的常用方法,尽管新方法对某些客体的显现效果并不好,但对大多数客体来说,其显现效果并不弱于二次染色的方法,并且使用新型荧光502粉末进行一步熏显不会引入有机溶剂,不会引起502聚合物的溶解或造成破坏,确保了纹线及其细节特征不被损坏,也避免了染色后因漂洗不当使手印纹线被冲掉的可能,还不会破坏脱落细胞等生物检材。     

家兔死后离体血液ATP含量变化与放置时间的关系

目的探讨恒温(25℃)条件下家兔死后离体血液ATP含量变化与放置时间的关系。方法健康家兔8只,空气栓塞处死后即刻取右心室血液,置于25℃恒温水浴槽中,每4h应用ATP荧光快速检测仪检测血液ATP含量,所得数据应用SPSS17.0统计学软件进行方差检验及回归分析。结果恒温(25℃)环境下,家兔死后离体血液的ATP含量,在8h内从死后即刻的2.46×10-12mol/L升至3.09×10-12mol/L,8h之后则随PMI的延长而下降,直至56h,56～72h ATP含量在0.13×10-12mol/L时趋于稳定。以Log[ATP]为因变量(y),离体放置时间为自变量(x),对死后0～56h的数据进行回归曲线分析,建立了3个推断离体时间方程,即y=-0.019x-11.359(R2=0.763)、y=0.001x2+0.016x-11.666(R2=0.962)和y=-1.281×10-5x3-0.007x-11.576(R2=0.980),其中三元回归方程的系数为0.980,曲线拟合度最好。结论家兔离体血液ATP含量变化与放置时间呈现一定的规律性,有望应用于死亡时间推断。     

涤纶纤维上分散染料的液-质分析

目的建立液-质联用技术对涤纶纤维上分散染料进行分析的方法。方法以N,N-二甲基甲酰胺为提取剂,在负离子模式下对12个黄色涤纶纤维上分散染料进行分析。结果12种分散染料在负离子模式质谱检测条件下均得到了有效的分析。根据一级负离子模式下总离子流图中准分子离子峰质荷比的不同,可将其中8种样品一一鉴别开。在此基础上,从染料离子化产物中选取响应信号较强的准分子离子为母离子,再对母离子进行二级质谱全扫描,依据二级质谱图中特征碎片峰的数目、质荷比的异同可对纤维上染料进一步进行鉴别。结论液-质联用法是检验有色纤维上染料的一种科学、有效的方法。     

STR和性别位点PCR产物的荧光自动检测

运用荧光染料标记引物、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (denaturingpolyacrylamidegelelec trophoresis,denaturingPAGE)结合荧光法检测6个STR位点 (vWA31A、TH01、F13A1、FES、TPOX、CSF1PO)及1个性别鉴定位点(Amelogenin) ,就荧光自动检测的重复性、准确性、分辩力等方面进行了研究 ,建立了6个STR位点等位基因判定视窗及用荧光DNA测序仪进行STR分析的方法 ,实现电脑自动判读结果。结果表明 ,本文所述STR和性别鉴定的自动检测方法可靠、分辨力高 (可达1bp) ,所得数据有助于荧光自动DNA分型软件系统的数据积累。     

DNA遗传标记STR基因座的高分辨电泳分型

应用聚丙烯酰胺凝胶水平不连续电泳和自动激光荧光DNA分析等两种高分辨电泳技术，比较和评估它们对4个STR基因座分型的准确性。结果表明，两者对HUMTH01、HUMVWA和HUM-FES三个基因座的分型结果完全一致。对HUMTHF13A基因座分型，聚丙烯酰胺凝胶水平不连续电泳获得的结果与自动激光荧光DNA分析不具可比性。     

荧光黄湿粉显现手印方法的初步研究

目的研发一种具有荧光特性的黄湿粉,以提取遗留在不同客体上的不同种类的手印。方法在100mL温水中加入适量的表面活性剂,溶解后加入100g荧光黄颜料,选用不同种类客体及不同种类物质手印进行显现实验,比较显现效果;结果遗留在光滑非渗透性客体及半渗透性客体表面的汗潜、油潜手印,显出的手印纹线流畅、反差强、荧光强;结论荧光黄湿粉可适用于光滑非渗透性客体及半渗透性客体表面新鲜或较新鲜汗潜手印、油潜手印及血潜手印的显现。     

运用PolyCyano UV粉末熏显手印的最佳浓度探究

目的研究PolyCyano UV粉末的熏显浓度对手印显现效果的影响,确定最佳的熏显浓度。方法通过控制熏显的温度、相对湿度和熏显时间等变量来确定熏显浓度的最佳值。结果该粉末熏显手印的最佳熏显浓度为1g/m3~3g/m3。结论该方法具有一步熏显操作简便、显现时间短、用量少、无需二次染色增强、不破坏生物检材、显现效果明显等特点,适合推广使用。     

羊痘病毒实时荧光定量TaqMan PCR检测方法的建立

参照羊痘病毒(CaPV)P32的基因序列,设计合成了2套引物和1条探针,建立了实时荧光定量PCR技术,对细胞培养物、皮肤丘疹、痂皮等组织病料中的GPV进行了特异性检测和敏感性试验。结果显示,用300 nmol／L引物浓度和200 nmol／L探针浓度,获得的Cr值较小,而△Rn最大;可检测到相当于0．1 TCID50的病毒DNA;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系且线性范围宽,相关系数为0．999 5以上;组内和组间试验重复性的变异系数分别为2．3％和3．4％;与常规的PCR相比较,该方法具有快速、特异、敏感、可定量,可同时检测大量样品等优点。表明。荧光TaqMan PCR是一种检测CaPV的良好方法,可对组织病料中低含量的CaPV或持续带毒宿主进行准确检测。