A D19S433 primer binding site mutation and the frequency in Japanese of the silent allele it causes

Short tandem repeat studies are powerful tools for parentage analysis and for identification of missing persons, victims of murder, and victims of mass fatalities when reference samples are unavailable. The primer in the Identifiler kit failed to amplify an allele at the D19S433 locus, producing a silent ("null") allele. The causal mutation is a base change (G>A) 32 nucleotides downstream from the 3' end of the AAGG repeats. The silent alleles are problematical in parentage analysis because when transmitted, they can cause a parent-child inconsistency that is unrelated to Mendelian genetics. The inconsistency is sometimes termed an "apparent opposite homozygosity" and it produces false evidence of nonparentage. Alternative primers were designed to amplify the D19S433 locus alleles and they detect the silent allele. Frequencies of the (no longer) silent allele were determined to be 0.0114 in 176 people from Shizuoka (Honshu) and 0.0128 in 156 people from Okinawa.     

片段长度差异等位基因特异性PCR——一种改良的SNP分型新方法

目的建立一种基于等位基因特异性PCR原理的改良SNP分型新方法:片段长度差异等位基因特异性PCR,并考察特异性引物的3'端第3位、第4位碱基错配对特异性延伸的影响。方法以SNP位点rs759117和rs760887为例,设计两条长度不同、3'末端分别与SNP两个等位基因碱基配对的上游引物,同时在两个等位基因特异性引物3'端第3或第4位碱基引入错配以增加特异性,下游为公用引物。PCR产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显带后确定样本的基因型。结果不同SNP纯合子为长度不同的单一谱带,杂合子则为两条带,其结果与直接测序完全一致。两条特异性上游引物3'端第3或第4位碱基引入错配后非特异性延伸显著减少,且对PCR反应条件的严格性要求明显降低。结论片段长度差异等位基因特异性PCR是一种简单快速而有效的SNP分型新方法;两条特异性引物3'端第3、第4位碱基引入错配可使特异性显著增加     

直接同步扩增5种基因位点

来用直接同步ＰＣＲ扩增５种基因位点及反向打点杂交技术，使扩增产物ＤＮＡ与膜探针条杂交。再通过酶联底物显色反应对ＬＤＬＲ、ＧＹＰＡ、Ｄ７Ｓ８、Ｇｃ和ＨＢＧＧ进行联合分型。该方法特别适用于微量、陈旧或降解的ＤＮＡ样本，其操作简便、迅速，应用在亲子鉴定案例，亲子关系概率高达９９．７５％。该技术在法医学、遗传学及临床诊断中具有重要价值，并将改变ＤＮＡ分型技术难于标准化的局面．     

等位基因特异性PCR技术及其法医学应用

等位基因特异性PCR（allele-specific polymerase chain reaction,AS-PCR）是一种基于等位基因特异性引物引导的PCR技术,可以有效地分析单核苷酸多态性（SNP）,包括碱基的转换、颠换以及插入/缺失多态性,在疾病研究、分子诊断以及法医物证学研究中具有很好的应用价值.本文系统地综述了AS-PCR技术的原理、检测手段、改进方法及在常染色体、Y染色体和线粒体SNP等领域的研究成果,探讨其法医学应用价值.     

绝经后妇女肾虚证与载脂蛋白E基因多态性的相关性

目的探讨绝经后妇女肾虚证与载脂蛋白E（apolipoprotein E，ApoE）基因多态性的相关性。方法以80例绝经后肾虚证妇女及65例绝经后无肾虚证妇女为研究对象，以ApoE基因为候选基因，运用限制性片段长度多态性检测ApoE基因型。结果肾虚组人群ApoE基因型ε2/ε3、ε2/ε4、ε3/ε3、ε3/ε4和ε4/ε4频率分别为11．25％、8．75％、58．75％、11．25％、10．00％，对照组人群ApoE基因型ε2/ε3、ε2/ε4、ε3/ε3、ε3/ε4、ε4/ε4频率分别为15．38％、6．15％、69．23％、9．24％、0；肾虚组人群ApoE等位基因ε2、ε3、ε4频率分别为10．00％、70．00％、20．00％，对照组ε2、ε3、ε4频率分别为10．76％、81．55％、7．69％；肾虚组ApoE等位基因ε4频率明显高于正常对照组（χ^2=4．386，P〈0．05）。结论ApoE等位基因ε4频率升高与绝经后妇女肾虚证相关，可能是肾虚证的危险因子；ApoE基因型ε4／ε4是绝经后妇女肾虚证一个有用的标志物。     

合同相对无效论:以劳动合同为重点——技术化的评价规则和目的逻辑的关联

有效、可撤销、效力未定及无效制度仅仅是合同法上的一种合同效力评价规则,不妨碍其他规则的同时适用.有时,合同有效可以更好地惩戒不法当事人.合同相对无效能更有效保护善意相对人和善意第三人,满足现代商事交易安全的需要.在劳动合同法的理论和实务中,应当确立劳动合同的相对无效制度,更好地保护劳动合同中善意当事人以及与劳动合同存在...