微小牛蜱Bm91基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

从我国半饱血微小牛蜱雌性成蜱肠道和唾液腺中提取总RNA;参照GenBank中已发表的微小牛蜱Bin91基因的核苷酸序列,设计了1对特异性引物.采用RT-PCR技术扩增Bm91基因,测序正确后将其亚克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K的EcoR I酶切位点,构建重组表达载体pPIC9K-Bm91.再次测序正确后将其用Sac Ⅰ内切酶线性化,电转化毕赤酵母GS115并经G418抗性筛选高拷贝重组菌株后用甲醇诱导表达.表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析,结果显示,Bm91基因获得了成功表达,诱导表达的培养上清液中表达出具有反应活性的83 ku的重组Bm91蛋白.     

猪肺炎霉形体Dnak-P97融合基因的表达及其产物的生物学活性

应用DNA重组技术,将猪肺炎霉形体黏附因子P97 C末端基因与猪肺炎霉形体伴侣蛋白Dnak C末端基因同时克隆到pET-30a表达载体上,构建了重组表达载体.将鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21,用终浓度为1.0 mmol/L的IPTG诱导6 h.用BugBusterTM Ni-NTA His·Bind纯化试剂盒在自然条件下对目的蛋白进行了纯化;经Western-blotting和动物试验,证实,该蛋白具有良好的生物学活性.     

胸膜肺炎放线杆菌apx I A基因在不同宿主系统中的表达及密码子偏好性分析

用PCR方法从胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清1型参考株APP259的基因组DNA中,扩增了约954 bp的apx I A基因片段,分别构建了大肠杆菌表达栽体pGEX-4T-1/apx I A和毕赤酵母表达载体pPICZαA/apx I A.对目的基因密码子偏好性进行了分析,发现其中有4个大肠杆菌稀有密码子,占1.2%;有49个毕赤酵母稀有密码子,占15.4%.利用所构建的大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1/apx I A和毕赤酵母表达载体pPICZαA/apx I A分别进行表达.结果显示,目的基因在大肠杆菌中能以包涵体形式进行高效表达,其融合蛋白占菌体总蛋白的32%;在毕赤酵母中则以较低水平分泌表达至培养基的上清液中,40倍浓缩后方能检测到少量目的蛋白.证实,目的基因序列中的密码子偏好性影响其在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达.     

红色基因视阈下的大学生爱国主义精神培育

红色基因是党和国家的宝贵精神财富,它清晰地向世人展示着近代以来我国爱国主义精神的实质与发展脉络。文章阐述了红色基因的精神内涵和时代价值,指明红色基因是新时代大学生理解党的初心和使命的红钥匙,是培育和践行社会主义核心价值观的红内核,是深入开展爱国主义教育的基因库。新时代培育大学生爱国主义精神,应从厚植情怀,打造爱国主义主题教育课堂;利用多渠道,搭建爱国主义教育新平台;加强保障,完善爱国主义教育机制等举措,将爱国主义贯穿于学校教育教学全过程,为培养符合中国特色社会主义事业发展需求的合格人才提供精神引领。     

阿拉善左旗:“三学”掀起党史学习教育新热潮

牢记初心使命,传承红色基因,学习百年党史,凝聚奋进力量。党史学习教育开展以来,阿拉善盟阿拉善左旗(以下简称“阿左旗”)各级党组织以高度的政治责任感和历史使命感投身到党史学习教育中,全旗范围内已形成疏密有致、亮点纷呈、激荡人心的整体态势,营造浓厚的学习氛围,迅速掀起党史学习教育热潮。     

株洲市:传承红色基因,担当时代使命

2020年9月,习近平总书记在湖南考察并发表系列重要讲话,提出要从党的光辉历史中汲取砥砺奋进的精神力量。党的十九届五中全会,提出了十四五规划和2035年基本实现社会主义现代化远景目标。株洲是一片红色热土,在中共党史上具有重要的地位和作用。     

永恒的丰碑——寻找中共在上海的红色基因

上海是一座具有光荣革命传统的城市,有着丰厚的红色基因。本文在实地考察和文献考证的基础上,寻找了上海60多处在中共历史上具有重要意义的革命遗址和旧址,用文字和图片记录了文物建筑背后饱经风霜的遗存,以唤起那些不该被时代忘却的记忆。而继续挖掘和寻踪大批彪炳史册的革命纪念地,是为了让每一位寻踪者在那里接受红色基因的接力和传承！     

知史砺初心 阔步新征程

“欲知大道,必先为史。”习近平总书记在党史学习教育动员大会上,深情回顾共产党人顽强拼搏、不懈奋斗的壮阔历程,号召全党大力发扬红色传统、传承红色基因,赓续共产党人精神血脉,在新征程上攻坚克难、奋勇前行。坚定“不忘来时路”的自觉。从浙江嘉兴南湖之畔的一叶红船,到今天乘风破浪扬帆远航的“中国号”巨轮,我们党百年奋斗史和新中国70多年发展史,是我们理解当代中国一切问题的基础和前提,蕴含了我们党领导人民从站起来、富起来到强起来的伟大飞跃的成功密码。