洛阳地区5种嗜尸性麻蝇分子鉴定研究

目的应用经典DNA条形码和28S r RNA基因鉴定洛阳地区5种常见嗜尸性麻蝇种属,评价其在常见嗜尸性麻蝇种属鉴定中应用的可行性。方法收集洛阳地区常见嗜尸性麻蝇类标本18只,经形态学分类鉴定后,Chelex-100法提取足部DNA,扩增并测序线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(COI)和28S核糖体核糖核酸(28S r RNA)基因片段,BLAST比对后,与来自DNA条形码数据库(Barcode of Life Data,BOLD)的中国和韩国地区20条相应蝇种序列进行比对,用MEGA 7.0软件整理分析所得序列,计算碱基组成、种内及种间进化分歧率,并构建系统发育树。结果形态学鉴定18只嗜尸性麻蝇归于3属5种。每个样本获得COI和28S r RNA的扩增长度分别为646bp和721bp。在线BLAST比对结果显示样本COI序列相似度99%以上,邻近法构建发育树Bootstrap值为1 000,5种麻蝇可以较好聚类,与形态学鉴定结果一致。38个样本COI种内范围为0~0.022,棕尾别麻蝇、酱亚麻蝇和急钩(亚)麻蝇种间范围在0.057~0.090;赤尾麻蝇和红尾粪麻蝇种间范围在0~0.086。5种麻蝇的28S r RNA序列发育树显示,棕尾别麻蝇和急钩(亚)麻蝇明显各自聚类,其余3种成一类。结论对于本研究中的5种嗜尸性麻蝇,基于COI基因的DNA条形码可以有效区分棕尾别麻蝇、酱亚麻蝇和急钩(亚)麻蝇,28S r RNA基因只可以区分棕尾别麻蝇,二者可作为形态学鉴定之外的重要方法补充。     

Asia 1 型口蹄疫病毒多表位基因的设计及其在毕赤酵母中的表达

为制备Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)特异性诊断抗原,根据国内Asia 1型FMDV流行毒株的序列,合成了2个FMDV流行毒株VPl基因的5个抗原表位.采用Insight Ⅱ软件进行蛋白空间构象模拟,证实设计的多表位分子结构符合要求.将合成的多表位基因按设计的酶切位点进行酶切连接,构建了Asia 1型FMDV VP1双拷贝基因重组质粒(pMD18-dVP1Asia).从该重组质粒获得dVP1Asia基因,与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,构建了重组表达质粒pPIC9K-dVP1Asia.用BglⅡ将重组表达质粒线性化后,转化GS115酵母菌.经筛选、鉴定,成功获得了表达FMDV多表位VP1蛋白的阳性重组酵母茵.该阳性重组酵母茵经甲醇诱导,在培养液上清中可检测到目的蛋白.Western-blot结果显示,该蛋白能特异识别Asia 1型FMDV抗体,且具有很好的反应原性.     

应用16S rRNA基因序列鉴定15只鸟类残体

目的 应用鸟类线粒体16S rRNA基因PCR测序方法进行涉案鸟类残体的物种鉴定。方法 以15只未知鸟类残体冷冻肌肉组织为研究材料,采用PCR扩增DNA条形码片段16S rRNA。结果 通过序列在线比对和系统发育分析,判定15份检材涉及珠颈斑鸠（Spilopelia chinensis）、斑鸫（Turdus eunomus）、麻雀（Passer montanus）、金翅雀（Chloris sinica）、燕雀（Fringilla montifringilla）和北红尾鸲（Phoenicurus auroreus）,共计6种鸟类物种,隶属2目6科6属,均为“三有名录”保护动物。结论 16s rRNA基因片段可以作为一个可靠手段对鸟类残体进行准确的物种鉴定,为司法案件的定性与量刑提供可靠的证据。     

八大热点标记海南两会

2011年,是中国共产党建党90周年,也是实施＂十二五＂规划的开局元年和国际旅游岛建设发展的关键之年。经历＂十一五＂的砥砺奋进,海南站在了新的历史起点上。     

2008年台湾政局述评

2008年台湾政局出现重大而深刻的变化。一年来,蓝绿双方围绕民意代表和台湾地区领导人两场重要选举、台湾政局和两岸关系主导权以及陈水扁家族贪腐案展开激烈攻防。年内,政党再度轮替后的岛内蓝绿政治实力对比发生重大逆转,执政8年的民进党沦为在野党,国民党实现了“全面执政”。重新执政后的国民党面临内外各种不利因素,虽掌控大局但步履蹒跚;在野后的民进党连遭打击,“台独”势力遭受重挫,岛内社情民意出现积极变化。     

猪IFN-γ基因的融合表达及其表达产物的生物学特性

依照猪IFN-γ(pIFN-γ)成熟蛋白基因序列设计引物,将已扩增的pIFN-γ基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建了GST-pIFN-γ融合表达载体,该载体转化宿主菌BL21后用IPTG进行诱导表达并对诱导表达条件进行了筛选和优化,筛选出最佳诱导表达条件后大量诱导表达,可溶性的表达产物经GST琼脂糖凝胶亲和纯化;包涵体经DOC洗涤、SKL变性溶解、透析复性进行纯化.经SDS-PAGE和Western-blot分析,证实得到了高纯度的融合蛋白,该蛋白的分子质量为42ku.选择FMDV和PRV两种不同的病毒(RNA病毒和DNA病毒)进行GST-pIFN-γ抗病毒活性测定.结果表明,GST-pIFN-γ融合蛋白可有效抑制这两种病毒引起的细胞病变,其对FMDV的抑制作用远远大于对PRV的抑制.对GST-pIFN-γ融合蛋白的稳定性及机体毒副作用的研究表明,该pIFN-γ的稳定性有较大提高,而毒副作用大大降低.     

吕秀莲李登辉“麻烦制造术”如出一辙

吕秀莲终于按捺不住台独本性,最近越跳越高了。然而我们把她与已被罢了国民党主席的李登辉搞台独的一套相对照,就很容易地发现,他们两人当“麻烦制造者”真有异曲同工之妙。     

台湾新领导人当政后的两岸关系

台湾地区新当选的领导人陈水扁先生已正式宣布就职了。由于他是主张“台独”的民进党的重要成员,又是国民党主政台湾50多年来第一次变更政权所出现的新领导人,因而备受各方瞩目是很自然的。这里,我们想结合他的“就职演说”,试谈一下他主政台湾以后的两岸关系。     

台湾意识的政治化与社会分裂

一2000年陈水扁上台后,不仅全盘接受了李登辉本土化的政治遗产,而且进一步打着“民主、人权”的旗号继续走“台独”路线,他完全违背“四不一没有”的承诺,大搞“宪改”,向“法理台独”迈出危险的一步。“住民自决”、“公民投票”是陈水扁和民进党一贯奉行的政治理念,既是其谋求“台湾独立”的重要手段,又是对抗“泛蓝”阵营与反制中国的工具,工具性和目的性兼而有之。而台湾部分人的非理性政治心态,恰是陈水扁和民进党推行“公投”的社会基础。陈水扁和民进党为了实现其政治理念,利用执政优势精心设计议题来挑动选民最敏感神经,借机煽动民…     

海外侨胞盼统一

今年5月,在智利首都圣地亚哥举行的“中南美洲中国和平统一促进会2006年智利大会”,不仅是我们中南美洲中国和平统一事业的一次盛事,也是全世界华侨华人反“独”促统的盛会.这次大会是声讨“台独”分裂行径,支持祖国统一的大会.有力推动了中南美洲各国的反“独”促统工作.台湾自古以来就是中国的神圣领土,维护国家主权和领土完整是国家的核心利益,是民族的根本所在.祖国统一,人心所向,海峡两岸,血脉相连。早日实现祖国统一是我们海外爱国侨胞的共同心愿。近两年来,两岸关系的发展出现了新的变化,在胡锦涛主席的四点意见发表以后,祖国大陆推…