产气荚膜梭菌EF-Tu基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

通过PCR方法扩增产气荚膜梭菌ATCC13124株EF-Tu基因,利用原核表达载体pGEX-6P-1构建重组质粒pGEX-EF,经双酶切和测序鉴定正确后转化E.coli Rosseta,进行IPTG诱导表达,表达产物纯化后免疫大白兔制备多克隆抗体,应用间接ELISA、Western-blot和间接免疫荧光方法对所得抗体进行检测。结果显示,经1.0mmol/L IPTG诱导5h后蛋白表达量最高,并且主要以包涵体的形式存在,分子质量为69ku。间接ELISA方法检测的多抗血清效价为1∶262 144。Western-blot结果证实,重组蛋白与产气荚膜梭菌ATCC13124株制备的多克隆抗体发生特异性结合,具有良好的免疫原性。Western-blot和间接免疫荧光结果表明,多抗血清能分别与pGEX-EF重组蛋白、ATCC13124菌体裂解液、pcDNA3.1-EF-Tu瞬时转染后的BHK-21细胞及ATCC13124感染的小鼠肠组织中菌体发生特异性结合反应。上述结果表明,此多克隆抗体能够应用于临床诊断。     

地方政府投融资平台运营模式问题研究

在我国现代化、工业化和城镇化建设过程中,地方政府投融资平台发挥了基础性的作用,有力地推动了地方经济社会的跨越式发展,但同时也暴露了诸如举债融资规模膨胀过快、制度缺失、机制运行不够规范等问题。在已有的研究成果中,对地方政府投融资平台运营模式的研究相对较少,文章通过对当前主要模式存在的问题和成因进行梳理,基于“多中心场域治理”的理论基础,构建了“地方政府投融资平台多中心合作型运营模式”。     

猪源多聚免疫球蛋白受体的表达及抗血清的制备

为了制备猪源pIgR蛋白的多克隆抗体,分析NCBI提供的猪源pIgR的胞外区基因序列并设计引物,经过PCR、酶切、连接,将目的 序列克隆入原核表达载体pET-30a(+),测序验证成功后,将带有目的 片段的重组质粒转化入大肠杆菌(E.coli) BL21 (DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,通过Ni-NTA亲和层...     

伪装识别技术的研究进展

测谎仪作为传统的测谎手段,试图通过人体外周局部植物神经反应的变化进行测谎,有一定的局限性。测谎仪的可靠性在很大程度上还决定于与仪器无关的因素,因此受到了最多的关注和质疑。事件相关电位(ERPs)尽管具有很高的测谎特异性和时间分辨率,可监测大脑的即时认知过程和电活动,但其空间分辨率差。大脑功能核磁共振成像(fMRI)可直接观察大脑的功能变化,具有良好的空间分辨率,但这项技术时间分辨率差,只能记录说谎后大脑变化的最终结果,目前该技术仍然处于基础研究阶段。在涉及伪装精神病和伪装认知损害相关诈病的司法心理学实际运用中,心理测试技术得到了更多的应用和研究。     

猪急性腹泻综合征冠状病毒膜蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

为了制备猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)抗膜蛋白(M)多克隆抗体,本研究以SADS-CoV GDS04分离株cDNA为模板扩增M基因片段,并将其克隆至原核表达载体pGEX-6p-1,构建重组质粒pGEX-6p-1-M.测序正确后将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,所获得的重组...     

从欧盟的“特性”透视欧盟多语政策

欧洲一体化的成功令世人瞩目,人们纷纷探讨其成功的原因,旨在保护和促进语言多样性的欧盟多语政策是其中的一个重要方面。文化在当代社会经济中的重要性是不言而喻的,而语言是文化最直接的表达,是民族文化的重要载体和有机组成部分。多语政策已成为欧盟一个专门的政策领域。欧洲一体化的发展使欧盟的超国家色彩日益明显,但欧盟毕竟不是主权国家,而是由主权国家建立的超国家组织。欧盟的这一"特性"决定了其多语政策的特殊重要意义,即:多语政策是保护"联盟的基因密码"的需要,是构建欧洲文化认同的重要条件,是欧盟的"一个深思熟虑的治理工具"。     

SMCY性别特异融合抗原的克隆表达及其抗体制备

目的利用蛋白检测的快速性优势,研究不同性别在SMCY抗原氨基酸序列的差异,筛选出特异性氨基酸序列,并克隆表达性别特异融合抗原,制备相应抗体,建立一种快速鉴别法医物证性别的方法。方法通过对人SMCY和SMCX进行序列分析,发现了三段差异片段,采用搭桥PCR方法获得差异片段全长基因,连接入p ET-28a载体进行原核表达,用Ni柱纯化后的性别特异融合抗原免疫制备多克隆抗体,用ELISA法和western blot检测SMCY多抗与抗原的反应特异性,制作胶体金试纸条检测样本。结果筛选出具有性别特异性的氨基酸序列,获得SMCY性别特异融合抗原,成功制备出多克隆抗体及胶体金试纸条。结论获得SMCY性别特异融合抗原具有很好的抗原活性,制备的多克隆抗体可以与抗原特异性地结合,用于性别鉴定。     

基于深度度量学习的足迹图像检索算法

针对赤足迹光学图像相似度高,传统算法无法快速提取样本有效信息的问题,提出了一种基于深度度量学习的赤足迹图像检索算法,该算法使用多尺度特征融合结构构建主干网络并辅以批去除结构监督学习,同时在嵌入空间内构建动态难样本三元组,解决传统难样本三元组挖掘方式不合理的问题。构建了一个包含250人、2 500枚的赤足迹光学图像数据集,该算法在所构建的数据集上平均检索精度达到88.86%,高于传统难样本三元组算法,可有效地应用于赤足迹光学图像检索。该算法对于足迹领域的自动化识别具有积极意义。     

夜间红外行人图像在可见光行人图像库的检索算法

本文旨在弥补夜间红外模式监控下行人图像与白天监控下行人图像间的模态差异和异构特性,较好实现多摄像头下红外人像与可见光人像数据间的检索和比对任务。设计一种局部参数共享的双路卷积神经网络模型,提取具有全局粗粒度和局部细粒度的两种人像特征,通过对两种特征分别进行特征度量,实现跨模态人像检索模型的训练和优化。结果表明,模型所提取的两种特征在测试数据集上具有较好的应用效果,准确率与目前主流算法相比具有竞争力。本研究能够服务视频侦查工作,提高现有的动态、静态人像比对的应用水平。     

深化认识协商式监督的科学内涵

<正>人民政协的民主监督是协商式监督。习近平总书记在党的二十大报告中强调,“发展全过程人民民主,保障人民当家作主”,“推进协商民主广泛多层制度化发展”,“完善人民政协民主监督和委员联系界别群众制度机制”。这为人民政协进一步加强和完善协商式监督指明了新的方向。深入学习贯彻党的二十大精神,扎实推进协商式监督,需要我们在实际工作中准确把握协商式监督的理论内涵和实践要求。