过敏性休克合并脑干出血致死的法医学鉴定

过敏性休克是外界某些抗原性物质进入已致敏的机体后,通过免疫机制在短时间内触发的一种严重的全身过敏性反应。大脑主要分大脑、小脑、脑干三个部分,脑干是生命的中枢,脑干出血就是脑干部位的血管破裂,出现的血液外渗,造成脑出血。通过一例非正常死亡案例中死者因过敏性休克合并脑干出血致死的案例进行分析,探讨法医学鉴定中过敏性休克合并脑干出血的鉴别要点。     

非洲猪瘟CD2v胞外区基因片段的真核表达及其多克隆抗体的制备

本研究利用真核表达系统表达非洲猪瘟病毒的CD2v胞外区蛋白,研究其免疫特性,制备多克隆抗体并研究其性质,为研发特异性单抗奠定数据基础.以非洲猪瘟病毒Wuhan2019-1株(GenBank:MN393476.1)为模板,合成CD2v胞外区基因序列,并将其克隆至真核表达载体pCAGGS载体中,获得pC-AGGS-CD2v...     

NF-κB受体激活因子配体的表达及其多克隆抗体的制备

为获取猪源NF-k B受体激活因子配体(RANKL)及其抗体,根据GenBank中猪源RANKL的序列设计引物,将合成的RANKL基因克隆至pMAL-C4x表达载体,转化到大肠杆菌DH5α。经PCR和双酶切鉴定后测序分析,将阳性克隆转化至大肠杆菌BL21后通过IPTG诱导表达。优化表达条件,确定是包涵体表达,蛋白大小为78.1 ku。使用纯化的RANKL为抗原免疫兔制备多克隆抗体。构建重组质粒pCMV-RANKL,表达目的蛋白并使其与多克隆血清反应。经ELISA、Western-blot和IFA鉴定,证实抗RANKL多克隆抗体有良好的抗原特异性,为后续黏膜免疫的研究奠定了基础。     

PRRS抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

以差速离心法结合蔗糖密度梯度离心法提纯的PRRSVSC2株作为包被抗原,建立了检测猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA法。该法的最适抗原包被浓度为5μg/mL,最佳酶标兔抗猪抗体稀释度为1∶5000,对猪抗PRRSV的IgG检测灵敏度达到0.1μg/mL。该法只与PRRS阳性猪血清呈现阳性反应,而与PRRS阴性猪血清和猪伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪瘟、猪细小病毒病阳性血清呈现阴性反应。应用该法检测PRRSVORF5基因疫苗免疫猪后的抗体消长规律表明,疫苗免疫猪后第7d抗体水平迅速上升,第75d达到高峰,然后缓慢下降,至第135d时仍然极显著(P<0.01)高于空载体对照和空白对照。试验结果表明,该法具有良好的特异性和敏感性,可用于PRRS流行病学调查和PRRSV基因疫苗免疫后抗体水平检测。     

含硒型牛副伤寒活疫苗免疫持续期的试验

用 2批含硒型牛副伤寒活疫苗 (2 0 0 10 1,2 0 0 2 0 1)分别免疫牦牛 ,在免疫后第 7、30、6 0和90d采血 ,进行了血硒含量及血清抗体的检测。结果显示 ,这 2批疫苗免疫牦牛后 ,血硒浓度在0 .0 5 μg/mL以上可维持 90d ,第 7d可产生坚强的免疫应答。在免疫后 6个月和 13个月攻毒 ,均产生 10 0 %的保护。试验表明 ,含硒型牛副伤寒活疫苗对牦牛的免疫保护持续期至少为 12个月。     

动物源食品中残留克伦特罗检测抗体的制备与应用

采用重氮化法将盐酸克伦特罗 (CL)与牛血清白蛋白 (BSA)交联 ,用紫外扫描和凝胶电泳对交联物鉴定后免疫新西兰纯毛白兔 ,制备抗血清。经鉴定 ,抗血清中含有针对CL的抗体 ,效价为 3.2× 10 5;以此抗体为基础 ,设计了间接酶联免疫法 ,该法的检出限为 0 .0 96ng/mL ,对加于尿液、血液和组织中CL的回收率为 80 %～ 12 0 % ;通过重复性、灵敏度、准确性等指标对该法进行了评估 ,并与高效液相层析 (HPLC)及国外进口试剂盒进行了比较 ,表明该法的各项参数均能满足实际检测的需要。     

利用放射免疫分析方法检测可疑吸毒者尿样

本文介绍利用放射免疫分析方法,对有吸食和注射吗啡嫌疑人员的尿液进行测定,证实该嫌疑人在某特定时间内,是否有吸食和注射吗啡的行为。     

我科学家找到人类产生抗体的“发动机”

清华大学医学院祁海教授课题组首次揭示了诱发性共刺激分子(ICOS)的免疫新功能——直接控制免疫细胞T细胞在体内迁移运动,为理解免疫器官产生抗体提供了新线索,从而给保护性疫苗的研制指出了新方向。相关论文刊登在近日出版的《自然》杂志上。人类抵抗长期感染类疾病的过     

绵羊肺腺瘤病毒完整囊膜蛋白的多克隆抗体制备与特异性检测

本研究旨在构建绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的囊膜基因(env)原核表达载体,制备多克隆抗体并对其特异性进行鉴定.以笔者所在实验室构建的pEGFP-C1/JSRV-env质粒为模板,PCR扩增env基因全长1 848 bp,构建原核表达质粒并命名为pET-32a/JSRV-env,进行双酶切鉴定和测序分析后,转化到E.co...     

牛结节性皮肤病病毒ORF006蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

为探究牛结节性皮肤病病毒（LSDV）ORF006蛋白的生物学功能,制备了ORF006基因的多克隆抗体,用PCR技术获得LSDV ORF006的基因片段克隆至pET-28a原核表达载体,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)后进行IPTG诱导表达,将纯化后的蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果显示,LSDV ORF006基因全长约696 bp;pET-28a-ORF006重组质粒在大肠杆菌中于37℃经1 mmol/L的IPTG诱导12 h,成功表达约28.0 ku目的蛋白;ELISA结果显示,制备的多克隆抗体效价为1∶102 400;Western-blot结果显示,制备的多克隆抗体能特异性识别ORF006蛋白;间接免疫荧光试验表明,制备的多克隆抗体能够特异性识别LSDV感染MDBK细胞表达的ORF006蛋白。本研究为进一步探究LSDV ORF006蛋白生物学功能奠定了基础。