非洲猪瘟病毒解旋酶Q706L基因的生物信息学分析及原核表达

为了解非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)解旋酶pQ706L的功能,通过生物信息学方法对GenBank中公布的不同基因型的ASFV解旋酶Q706L基因序列进行分析,运用在线软件ExPASy、GOR4、SWISS-MODEL对该蛋白的理化性质及结构进行了预测分析,并进一步构建原核表达载体进行诱导表达及纯化鉴定。结果显示：Q706L基因长度为2 121 bp,在不同毒株和基因型间高度保守;经ExPASy预测,pQ706L蛋白的分子式为C₆₄₄₀H₁₀₇₆₁N₂₁₂₁O₂₆₄₃S₅₀₂,属于疏水性蛋白,稳定性差;GOR4预测的二级结构显示,α螺旋是其主要结构形式,占比为42.07%;三级结构预测报告QMQE值为0.38,覆盖率为66%。以ASFV-CN/SC/2019毒株基因组为模板,成功构建了原核表达质粒pET-30a-Q706L,进行诱导表达及SDS-PAGE分析,得到78.3 ku的蛋白。纯化后经Western-blot鉴定,获得了纯度较...     

非洲猪瘟MGF360-11L蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

本研究根据非洲猪瘟病毒（ASFV）HLJ/2018株（GenBank登录号：MK333180）MGF360-11L核苷酸序列,合成MGF360-11L基因序列,将其克隆至pET-32a（+）载体。测序正确后转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达与纯化,纯化后的重组蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定。以纯化的MGF360-11L重组蛋白作为包被抗原,建立了检测ASFV MGF360-11L抗体的间接ELISA方法。用建立的间接ELISA方法与法国ID-Vet非洲猪瘟抗体检测试剂盒分别对192份临床血清样品进行检测比较,结果显示,该间接ELISA方法的特异性为91.6%,敏感性为92.1%,符合率约为91.7%。表明,该间接ELISA方法敏感性高、重复性好和特异性强,可初步用于临床血清样品非洲猪瘟抗体的检测,该方法的建立为ASFV的快速诊断提供了更多选择,对非洲猪瘟的防控提供了技术支持。     

牛病毒性呼吸道疾病主要病原多重PCR检测方法的建立与应用

为建立对牛呼吸道疾病综合征(BRDC)进行快速而准确的病原学检测方法,基于牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)g B 基因、牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 5′UTR 基因、牛副流感病毒 3 型(BPIV3)HN 基因和牛呼吸道合胞体病毒(BRSV) N 基因设计检测引物,经过条件优化,建立了检测 IBRV、BVDV、BPIV3 和 BRSV的多重 PCR 方法。 该方法具有良好的特异性和灵敏性,可特异性地同时检测 IBRV、BPIV3、BRSV 和 BVDV,灵敏度分别为 5.86×10³、2.42×10³、1.02×10⁴和 5.02×10⁴copies/ μL,且重复性良好。 利用该方法对采集的309 份具有呼吸道症状牛的鼻腔拭子进行检测 ,结果显示 ,IBRV、BVDV、BPIV3 和 BRSV 的阳性率分别为6.15%、28.16%、18.12%和 33.66%,其中 BVDV 与 BRSV 的混合感染率为 5.18%,BVDV 与 BPIV3 的混合感染率为 1.62%,BRSV 与 BPIV...     

乡村全面振兴下我国新型农业经营主体信用体系建设的实施路径

新型农业经营主体信用体系是农业农村现代化的基础保障,对推进共同富裕、促进乡村治理体系创新、支撑数字乡村高质量发展具有重要作用。当前新型农业经营主体信用体系仍然存在政府缺合力、数据归集难、评价不精准、风险防范弱、产品匹配难等问题。建议基于社会各界形成的政府主导型、金融主体主导型和市场机构主导型建设模式,围绕信用建设“常态化”、数据归集“规范化”、主体画像“精准化”、风险防控“高效化”、农村金融“均等化”五大方面,加快构建完善的新型农业经营主体信用体系,为金融活水注入乡村,助力乡村全面振兴提供坚强保障。     

新型传销犯罪案件的侦查难点与侦防对策

随着社会的发展,传销犯罪方式不断升级,呈现出隐蔽化、智能化特点,并衍化出许多新的形式。此类犯罪主要有隐蔽性、虚拟性强,电子数据多,借助互联网和移动终端传播,智能化、组织化明显四个特点。新型传销犯罪对社会经济秩序的影响更大,侦办案件过程中存在案件线索少、犯罪团伙组织化程度高、电子证据难提取、传销人员管控难、侦查协作难五个难点。为更好地打击新型传销犯罪活动,应借助信息化平台,依靠群众积极拓宽案件线索渠道,提高侦查人员办案水平,加强合作,共同维护社会经济秩序。     

新型犯罪结构性变化引发侦查格局变革的思考

当前,犯罪活动出现了"传统犯罪加快向网络滋生蔓延、涉网新型犯罪成为主流"的结构性变化,刑侦工作临前所未有严峻挑战,为了适应现实需要,刑侦工作应当加快构建"机制契合、资源整合、能力聚合"的打击治理新格局.     

当代青年初婚态势的嬗变：风险、成因及治理

当代青年初婚态势发生了嬗变,即初婚人口数在2013年-2020年间持续下降,由此衍生出婚姻文化异化、婚姻价值失衡和人口结构失调的风险。这一嬗变源于多重影响：包括婚恋决策的主体性和自我性、婚姻观的现代性和经济性,高等教育扩张的初婚推迟效应、以及社会压力和婚育成本的负面效应等。因此,需形成以价值引导为先驱、以婚姻家庭制度建设为支撑、以社会保障体系为补充的治理路径。在价值引导层面,家庭、学校和社会应当多维度塑造青年的新型婚育观;在制度支撑层面,应重点治理婚姻缔结前的婚嫁陋俗和天价彩礼问题,以及婚姻存续期间夫妻双方的角色冲突和时间资源压力问题;在社会保障层面,应强化生育抚养保障和就业权益保障。     

用紫外分光光度计检测口蹄疫病毒的研究

用紫外分光光度计测试口蹄疫病毒(FMDV)含量中,比较研究了PBS、Tris、含不同浓度蔗糖液和不同浓度迭氮钠液的差异性、相关性、直线回归方程及不同置信度下的方程误差.结果表明,蔗糖浓度与FMDV的吸光度值之间有显著直线负相关,以PBS和Tris为对照检测FMDV,对检测结果的不利影响甚微;在FMDV中加迭氮钠的最大量不能大于5.4 mg/L,否则无法测定FMDV的吸光度值;检测蔗糖密度梯度离心纯化的FMDV抗原,必须以相应级份的蔗糖液为对照才能准确定量.     

蓝舌病病毒单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定

以纯化的蓝舌病病毒(BTV)11型VP7免疫BALB/c小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术,借助间接ELISA筛选,获得了3株分泌抗BTV11 VP7的群特异性单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,命名为C12D9、B4 F3、E1 A7.这3株杂交瘤细胞株连续传代3个月再经液氮冻存6个月后复苏培养,仍能稳定分泌特异性McAb.3株McAb均具有ELISA特性和免疫沉淀特性,其中C12D9株上清液的ELISA效价为1256,腹水的ELISA效价为10-6.亚类鉴定,C12D9株为小鼠IgG1,B4F3、E1 A7为IgG2a和IgG2b.琼脂免疫扩散试验和间接ELISA试验表明,这3株均与BTV11型VP7发生特异性反应,为BTV群特异性McAb.     

政府与市场：建构新型的伙伴关系——斯蒂格利茨经济学说中的政府理论评析

政府与市场的关系是确定政府职能的理论前提,对政府与市场的关系的不同主张,深刻影响着政府管理经济的模式和方法。约瑟夫·E·斯蒂格利茨作为“新凯恩斯主义”的代表人物,立足于美国的现状,从信息经济学的角度,以不完全信息和不完备市场为分析前提,重新审视了西方经济学中关于“市场失灵”和“政府失灵”的论述,提出政府与市场之间应建立新型伙伴关系的模式。本文试通过分析斯蒂格利茨的政府理论,对我国的经济转型提供一些现实的借鉴。