牛传染性鼻气管炎间接ELISA诊断方法的建立

以牛肾细胞系(MDBK)培养牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)Bartha Nu/67株,经超速离心纯化病毒,再经超声破碎处理后作为诊断抗原,建立了检测牛血清IBRV抗体的间接酶联免疫吸附试验。该ELISA的判定标准为:血清D490 nm值大于0.369的判为阳性,小于0.295的判为阴性,在0.295与0.369之间的为可疑。特异性和重复性试验结果表明,该方法特异性高、重复性好。与法国进口ELISA抗体诊断试剂盒比较,其符合率为96.3%;与中和试验比较,符合率为95.8%,且敏感性更高。应用该诊断方法调查了我国部分地区IBRV的感染情况,结果显示,这些地区的IBRV感染率为67.1%。     

荷斯坦乳牛乳腺和乳腺上皮细胞中Toll样受体及辅助因子编码基因的检测

参照牛TLR4、TLR2、CD14、MD-2基因序列设计了相应基因的引物。采用RT-PCR技术检测了体外培养的荷斯坦乳牛乳腺和乳腺上皮细胞中Toll样受体TLR4、TLR2及辅助因子CD14、MD-2基因。结果显示,乳腺上皮细胞中存在TLR4、TLR2、CD14和MD-2四个基因的表达,而乳腺中除MD-2未检测到外,其余3个基因均扩增成功。说明该受体及辅助因子可能参与了乳腺的先天性免疫防御。该研究为探讨乳腺的先天性免疫及乳腺上皮细胞在乳腺先天性免疫中的作用奠定了基础。     

猪胚胎多能性干细胞的分离培养

收集妊娠 2 6 .0～ 2 9.0d的猪胚胎 ,分离培养原始生殖细胞 (PGCs) ,在STO细胞饲养层上生长 ,形成了多能性干细胞 (EG)。发现其具有干细胞的显著特性 ,并能在体外定向分化为神经细胞、上皮细胞和胚泡细胞。试验使用A、B、C 3种不同的培养基培养PGCs ,结果在形成EG细胞集落的数量和EG细胞分化上有着明显的差距 ,说明血清的质量和浓度以及细胞因子对干细胞的生成和增殖有着重要的影响     

名人私方菜：飘香台塑牛排

台湾人同样很会吃,而且吃得非常精细,曾经风靡上海的高档西餐连锁巨头——王品台塑牛排就是一例,但王品又巧妙的把西餐的饕餮与中餐的细腻结合起来。中国台湾经营之神款待贵宾的名菜王品台塑牛排是中国台湾知名企业台塑集团董事长王永庆先生招待贵宾的名菜,缘由王董事长经常出席各种宴会,却不习惯血淋淋的牛排,于是王太太和主厨精心研制出一道全熟牛排,虽然全熟却鲜嫩多汁,这道牛排马上得到王董事长的喜爱,久而久之也成了台塑集团招待贵宾的一道代表菜品!执着于对美味的严格定义,王品历经数千小时的严格选材,精心研发之后,发现一头牛只有第…     

皮癣双价灭活苗接种牛的免疫监测

用８头健康犊牛每头注射皮癣双价灭活苗２ｍｌ，间隔１４天重复注射１次。在注苗前和泣苗后不同时间采血进行血清抗体检测和以淋巴细胞转化试验检测细胞免疫情况。结果在注苗前以双向免疫扩散试验（ＤＩＤ）法检测８头牛疣状毛癣菌代谢产物抗原（Ｔｖ）抗体和石膏样毛癣菌代谢抗原（Ｔｍ）抗体均为阴性，注苗后１４～１１０天出现Ｔｖ抗体阳性反应，反应高峰在注苗后２１～２８天，最高滴度为１：８。注苗后１４～６３天出现Ｔｍ抗体阳性反应，反应高峰在２１～２８天，最高滴度１：４。注苗前８头牛淋巴细胞转化率均在４％以下，注苗后１４～６３ｋ对特异性抗原Ｔｖ和Ｔｍｌ出现淋巴细胞转化阳性反应，反应高峰均在注苗后２１～２８ｋ，最高转化率为２５％（Ｔｖ）和２９％（Ｔｍ）。通过免疫监测证明接受该疫苗的牛绝大多数都能产生良好的体液免疫和细胞免疫，并对攻击感染具有抵抗力。     

湖南省牛的隐孢子虫病调查及小鼠感染试验

对湖南省８个县（市）的２９６头奶牛、１７７头水牛及１２头黄牛进行了隐孢子虫病的调查。发现６个县（市）的牛有隐孢子虫的感染。奶牛感染率为５．３％～２８．８％，其中某牧场１岁以下犊牛的感染率（４６．７％）高于１岁以上午（２３．９％），３、４月龄犊牛的感染率（分别为１００％和６０％）高于４月龄以上的犊牛；水牛感染率为６．６％～４０％；黄牛中未发现隐孢子虫感染。以牛粪中分离出的隐孢子虫卵囊人工感染小鼠成功，从而证实牛的隐孢子虫在同一宿主纲内不具有宿主特异性。     

牛碱性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的表达及其表达产物的生物学活性

采用巢式PCR方法克隆了牛18ku-bFGF基因完整的编码序列,并构建了原核表达载体pET-28a-bFGF,将其转化大肠杆菌BL21,在25℃低温条件下,用0.5 mmol/L IPTG诱导表达5 h,用Ni-NTA亲和纯化细胞裂解上清液,经Western-blotting检测,结果显示,在特定的诱导条件下,重组牛bFGF基因在大肠杆菌中获得了表达,并且主要以可溶性状态存在于细胞中。经检测,纯化后的重组蛋白能显著促进成纤维细胞的增殖(P<0.05),其活性与商品用重组人18ku-bFGF没有差异(P>0.05)。表明,所获得的可溶性重组牛18ku-bFGF蛋白具有较高的生物学活性,可用于后续研究工作。     

首席科学家牛文元教授谈中国可持续发展战略

牛文元教授告诉我们,1993年3月,中国国务院发表了白皮书:《中国人口、环境与发展》,通常也称为中国21世纪议程.我国是世界上第一个以政府名义制定执行可持续发展行动计划的国家.     

“最牛钉子户”的标本意义

成为钉子户，而且“最牛”，重庆公民吴苹最近因此被媒体“爆炒”。在城市商业开发中，吴女士的一幢二层民宅两年多来未能与开发商达成拆迁协议，已被断水断电，并在深坑包围中成为“孤岛”，近日又被法院下了最后通牒：须在规定之日前搬迁，否则强制拆除。双方在作最后僵持，社会各界纷纷拭目待决。     

牛分枝杆菌Ag85A基因在大肠埃希氏菌中的表达

以BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切已构建的pGEM-T-85A和pET28a( ),并将纯化的Ag85A基因亚克隆至pET28a( )中,构建出原核表达质粒pET28a-85A。将pET28a-85A转化至感受态E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约32 ku的外源蛋白带。Western-blotting分析表明,该蛋白具有牛分枝杆菌的抗原性。