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为构建犬新孢子虫AMA1基因的重组真核表达质粒,了解其在Vero细胞中的表达情况,采用RT-PCR方法扩增牛源犬新孢子虫吉林株AMA1全长基因,构建了重组真核表达质粒pVAX1-NcAMA1;利用脂质体介导转染法将该重组质粒转染至Vero细胞,应用间接免疫荧光方法(IFA)和Western-blot技术检测AMA1基因在Vero细胞中的表达情况。结果显示,扩增的牛源犬新孢子虫吉林株AMA1基因的长度为1 695bp,与GenBank中相应基因序列(AB265823.1)的同源性为99.9%。成功构建了重组真核表达质粒pVAX1-NcAMA1,IFA检测发现AMA1基因在Vero细胞中获得了瞬时表达,表达产物经Western-blot鉴定,其分子质量约为68ku,且具有较好的反应原性。本试验为新孢子虫病核酸疫苗的进一步研究奠定了基础。 相似文献
72.
搜爆犬在搜爆训练中会形成很多不良条件反射。对搜爆犬在识别炸药气味时形成的对炸药包装物气味产生联系的不良条件反射,及影响搜爆犬搜爆作业的重要因素进行了研究。实验结果表明:(1)不改变包装物包装炸药进行训练,搜爆犬对不同的包装物都会产生联系,但对于不同的包装物形成不良条件反射的程度也不同。(2)在搜爆训练过程中用不同材质的包装物包装炸药进行交替训练,对搜爆犬识别炸药气味的不良条件反射影响程度明显降低。 相似文献
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牛新孢子虫病LAMP检测方法的建立 总被引:4,自引:0,他引:4
为建立一种快捷、灵敏的牛新孢子虫病检测方法,根据GenBank上登录的新孢子虫NcSAG1基因(AF132217)序列设计合成了2对环介导等温扩增(LAMP)特异引物,建立了检测牛新孢子虫病的LAMP技术,并优化了LAMP的各反应条件,进行了敏感性和特异性试验.结果显示,LAMP方法扩增牛新孢子虫的电泳产物呈特征性梯状条带,显色反应呈现绿色荧光,酶切鉴定出现目的条带,LAMP方法检测的敏感性为5×10~5 copies/μL;特异性试验显示,新孢子虫检测管显色后呈阳性,而瑟氏泰勒虫、弓形虫和附红细胞体等对照组均呈阴性.表明,本研究建立的LAMP方法具有灵敏、特异、快速等优点,适合于牛新孢子虫病的检测. 相似文献
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《共产党员(沈阳)》2009,(23)
两年前,郑州市通过了《城市养犬条例》,成立了一个规模庞大的临时性机构——养犬办。养犬办规定,每办一个狗证要收600元的费用。养犬办目前已经为近2万只狗办了狗证。据郑州市财政局公布的数据,2007年以来财政局共拨付养犬办资金731.09万元。养犬办承认说,每条狗 相似文献
80.
近年来,随着人们生活水平的提高,家庭饲养宠物犬日益增多。养犬给人们生活带来乐趣的同时,也引发了一些社会问题,比如犬吠扰民、养犬伤人、污染环境等,因养犬引发纠纷导致的治安案件也时有发生。养犬管理工作已成为人大代表、人民群众普遍关注的热点问题。每年人代会上,都有代表提出加强养犬管理工作的建议。 相似文献