猪博卡病毒5型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

根据猪博卡病毒5型NS1基因序列设计引物,建立了基于SYBR GreenⅠ的用以检测猪博卡病毒5型的实时荧光定量PCR。用该方法检测猪博卡病毒5型NS1基因,在3.64×102~3.64×107 copies/μL范围内有很好的线性关系。扩增产物的熔解曲线仅出现单一特异峰,无引物二聚体,Tm值为(83.12±0.12)℃,对猪圆环病毒(PCV1和PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪输血传播病毒(TTV1和TTV2)的核酸均无阳性信号扩增,可重复性好,组内变异系数为0.35%~1.24%,组间变异系数为0.43%~1.46%。此方法的建立为定量分析猪博卡病毒5型感染猪的感染程度和靶器官提供了精确检测手段。     

多头带绦虫黏着蛋白TmAdh1基因的克隆及原核表达

为研究多头带绦虫黏着蛋白TmAdh1的功能,利用PCR分别以多头带绦虫基因组DNA和cDNA为模板扩增TmAdh1的基因组序列和cDNA序列,并利用生物信息学软件对该基因进行预测分析。将TmAdh1基因片段连接至原核表达载体pGEX4T-1进行原核表达,并利用Western-blot分析该蛋白的抗原性。结果显示,TmAdh1的基因组序列长1 848bp,由2个内含子和3个外显子组成,其开放阅读框的长度为402bp,编码133个氨基酸残基。预测分析表明,TmAdh1蛋白含有1个N端信号肽序列、1个纤连蛋白三型(FnⅢ)结构域、1个糖基化位点和8个线性B细胞抗原表位。在原核系统成功表达了约40ku的重组蛋白TmAdh1,用其免疫小鼠制备超免疫血清。Western-blot试验表明,重组蛋白TmAdh1可以与免疫小鼠血清反应。以上研究结果表明,多头带绦虫TmAdh1基因是带科绦虫宿主保护性抗原的同源基因,可作为脑多头蚴病疫苗的候选分子。     

细颈线虫线粒体cox1基因的扩增及遗传进化分析

为分析奥拉奇细颈线虫和扁刺细颈线虫线粒体cox1基因部分序列(pcox1)的遗传变异情况,对采集的22个细颈线虫样品的pcox1序列进行了扩增和序列分析。结果显示,两种细颈线虫pcox1片段的长度均为400bp;奥拉奇细颈线虫和扁刺细颈线虫pcox1序列的种内差异分别为0.25%~4.00%和0~1.50%,种间差异为9.00%~12.75%;通过重构遗传进化关系分析发现,奥拉奇细颈线虫和扁刺细颈线虫位于2个独立的分支上,可有效区分两种细颈线虫。结果表明,pcox1可作为奥拉奇细颈线虫和扁刺细颈线虫遗传进化的理想分子标记。     

微信公众号传播他人作品行为性质辨析

在微信日益成为人们沟通交流的重要方式与媒介,甚至成为一种生活方式的趋势下,微信用户公众平台的打造不仅可以使用户借此进行产品与企业宣传,而且还可以即时交流信息与传播作品.但是,微信作为一种手机应用,通过公众号进行的作品上传或转发毕竟不同于传统的以计算机通信网络为基础而进行的互联网传播.因而,通过微信公众号上传或转发作品的行为是否属于信息网络传播、该未经许可而进行的作品上传或转发是否构成对著作权人信息网络传播权的侵犯,以及微信软件能否因其公众平台的提供或需要具备什么条件构成帮助侵权等都是需要从理论上进行探讨与界定的新问题.而这不得不令我们思考在文化消费日益走向网络,个体如何规范其网络传播行为的问题.     

一平方英寸的寂静

你聆听过黄昏时的寂静吗？或者风雨过后的那种寂静。夜晚的乡村路,聚会时忽然的沉寂,还有关上门独守空屋时的安静。如果你仔细听,这些时刻都非常美,寂静散发出一种魅力,要我们去听。然而,很多时候,我们享受不了寂静,我们要对付各式各样的噪音,早上的车流,喇叭,晨练者身上的巴哈便携式扩音器,城市建设发出的巨大噪音,商场里滥用的音乐,电梯里说话的男人,装修的噪音,练钢琴的邻居,看电视的邻居,喧闹的人群。     

城乡道路无信号交叉口主路车辆对支路车辆感知的研究

城乡道路交叉口由于支路车流量很少,没有交通信号控制,但是支路车辆情况复杂,车辆驾驶人安全意识淡薄,往往随意进入主路,给主路正常行驶的车辆带来很大的安全隐患。通过在支路设置车辆检测器,实时传给主路显示终端,增加主路车辆驾驶人的"视距",能够采取适当措施,提前避让。主路车辆驾驶人对支路路况的可视,可以大大减少道路交叉口交通事故的发生。     

行政许可法亮点以及消防行政许可的改进

备受关注的《中华人民共和国行政许可法》将于今年7月1日起正式施行。行政许可法是一部实施行政许可应当遵守的程序性法律规范。行政许可法充分体现了法治、便民、高效等原则，对行政许可的设定、实施程序、监督等都作了严格的规定，尤其规定了严密的法律责任，对行政许可提     

难忘开国岁月——双清别墅里的毛泽东

为纪念中华人民共和国成立60周年，本刊特别推出纪实连载——难忘开国岁月。记录中华人民共和国筹备成立过程中鲜为人知的历史片段，讲述开国大典背后若干鲜活的故事，再现开国大典的精彩场景，以鼓舞人们发扬优良革命传统，再铸民族辉煌。     

魂断缅甸

2008年4月14日上午，在缅甸首都仰光的一栋租赁别墅里，来自北京的珠宝商阙文杰和妻子刘丹燕横尸别墅!谁在缅甸犯下如此罪行？随着案情的层层挖掘，警方终于获悉，杀害阙文杰夫妇的是缅甸黑社会分子，而幕后的指示人竟是阙文杰的生意合伙人何金良。     

复方丹参注射液对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞分泌IL-1β的影响

目的：研究复方丹参注射液对Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎（Collagen-Ⅱ induced arthritis,CIA)大鼠模型滑膜细胞分泌IL－1β的影响。方法：采用消化分离的方法获得滑膜细胞，放射免疫法检测大鼠滑膜细胞培养上清液中IL－β的水平。结果：复方丹参注射液可以明显下调CIA大鼠滑膜细胞分泌IL－1β的水平。结论：复方丹参注射液治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞分泌IL－1β的水平有关。