牛猝死症病原分离鉴定

１９９６年１０月至１９９７年５月，在陕西合阳、麟游、洛南、汉中、宝鸡、凤县疑似牛猝死症疫区采集到１４份猝死的牛病料。经厌氧培养和细菌学检查，在１２份病料中分离到２１株疑似魏氏梭菌。从每头牛各选择１株形态、培养特性较典型的菌株，经肠毒素、生化试验、动物试验和培养物离心上清液毒素检查及菌型鉴定等，确定其中９株为Ａ型魏氏梭菌（毒素），其它３株因毒力较弱未进行定型。     

含硫氨基酸对黄曲霉毒素B_1的解毒机理

口服黄曲霉毒素Ｂ_１（２ｍｇ／ｋｇ）能引起雏鸡肝细胞明显损伤，表现肝脏谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量降低，肝糖原减少，谷丙转氨酶活性升高。口服蛋氨酸、Ｎ－乙酰半光氨酸能够提高肝脏细胞ＧＳＨ水平。ＧＳＨ能与ＡＦＢ_１结合而解毒。其作用机理是通过谷胱甘肽－硫－转移酶的作用。口服亚硒酸钠能提高谷胱甘肽过氧化物酶的活性，也能对抗ＡＦＢ_１的毒性。     

产毒素多杀巴氏杆菌在猪萎缩性鼻炎病因中的作用研究——给用醋酸处理或不处理的猪接种产毒素多杀巴氏杆菌引起的鼻腔病变比较

用产毒素多杀巴氏杆菌单独接种到未作任何处理的仔猪鼻腔,细菌被迅速清除,鼻甲骨不发生明显萎缩。对仔猪鼻腔用1％醋酸预先处理2天后,再接种产毒素多杀巴氏杆菌,该菌则可在鼻腔长期定居,引起严重的鼻甲骨萎缩;如再混合感染支气管败血波氏杆菌时,猪萎缩性鼻炎的病理变化和临床指征明显加重。试验结果表明,与支气管败血波氏杆菌一样,某些非传染因素也可促进产毒素多杀巴氏杆菌在猪鼻腔定居,从而导致持续性萎缩性鼻炎的发生。     

产志贺毒素Ⅱ型变异体大肠杆菌LAMP检测方法的建立

为建立产志贺毒素Ⅱ型变异体(Stx2e)大肠杆菌的环介导恒温扩增(LAMP)检测方法,参照Gen-Bank中12条Stx2e序列和9条Stx2序列,针对Stx2e基因保守区域设计并合成4条引物,分别进行了反应条件优化、特异性试验、敏感性试验及模拟样品检测。结果显示,用所建立的LAMP方法对阳性样品扩增所得产物电泳后呈特征性梯状条带,阴性样品的扩增产物电泳后均无扩增条带。建立的LAMP方法对Stx2e+大肠杆菌的最低检出量为38CFU/管,敏感性高于PCR方法(3.8×103CFU/管)。LAMP和PCR对模拟样品检测结果的符合率为100%。该研究为仔猪水肿病的诊断和Stx2e+大肠杆菌的快速检测提供了新的方法。     

A型产气荚膜梭菌α毒素His-68基因的定点突变与结构分析

利用定点突变技术,将A型产气荚膜梭菌α毒素(CPA)第68位组氨酸(CAT)定点突变成甘氨酸(GGT),构建了含CPA突变基因表达质粒的重组菌株BL21(DE3)(pMCPA-H68G)。经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pMCPA-H68G含有CPA-His68Gly突变基因,且基因序列和阅读框架正确。重组菌株BL21(DE3)(pMCPA-H68G)表达产物经SDS-PAGE分析,其表达量占菌体总蛋白相对含量的31.65%。应用EXPASY服务器上的SOPMA法对CPA和CPA-His68Gly突变体分子进行二级结构的预测,同时模拟了其三级结构。结果显示,CPA和CPA-His68Gly突变体的二级结构主要是由α螺旋和无规则卷曲组成的,三级结构非常相似。     

UPLC-MS/MS测定生物样本中3种麻痹性贝类毒素

目的 建立全血和尿液中3种麻痹性贝类毒素（石房蛤毒素、脱氨甲酰基石房蛤毒素和新石房蛤毒素的超高效液相色谱—串联质谱检测方法。方法 用乙腈-0.1%乙酸甲醇（1:3,v:v）提取血液样本，用甲醇（含0.5%乙酸）提取尿液样本后过PA固相萃取柱，选用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱。质谱仪采用电喷雾离子源，正离子扫描，多反应监测模式检测，外标法定量。结果 血添加样本中，石房蛤毒素、脱氨甲酰基石房蛤毒素和新石房蛤毒素分别在0.5～100 ng/mL、1～100 ng/mL范围内线性关系良好，相关系数(r)≥0.996，毒素的检出限LOD分别为0.1 ng/mL、0.5 ng/mL、0.5 ng/mL，定量限LOQ分别为0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、1.0 ng/mL。方法的回收率为63.23%～81.77%，日内精密度为3.06%～9.58%，日间精密度为3.87%～9.96%，准确度为91.67%～102.42%。尿添加样本中，3种毒素均在1～100 ng/mL范围内线性关系良好，相关系数(r)≥0.996，毒素的检出限为0.5 ng/mL，定量限为1.0 ng...     

直序商陆炮制品毒性成分测定

目的：探讨炮制对直序商陆毒性成分的影响。方法：采用薄层扫描法测定直序商陆不同炮制饮片中商陆毒素的含量。结果：清蒸品、醋煮品及醋品中商陆毒素的含量仅分别为原药材的１６．；７３％、２１．８８％及４５．８５％。结论：清蒸法和醋煮法为直序商陆炮制的最佳工艺。