大鼠溺死后肺组织与血清IL-1β、IL-13mRNA表达变化

目的检测大鼠肺组织和血清中IL-1β、1L-13mRNA表达变化,探讨IL-1β、IL-13mRNA的变化情况与溺死的关系。方法 12只SD大鼠随机分为对照组、溺死组(实验组)。分别提取各组大鼠右侧肺下叶及右心室血清,应用TaqMan探针法检测肺组织及右心室血清IL-1β、IL-13mRNA的表达情况。结果 (1)溺死组大鼠肉眼观察:体表征象及解剖所见符合生前溺死特征。(2)肺组织中IL-1β、IL-13mRNA表达检测:与对照组比较,实验组IL-1β、IL-13表达呈下降趋势,差异无统计学意义(p0.05)。(3)血清中IL-1β、IL-13mRNA表达检测:与对照组比较,实验组IL-1β表达显著升高(p0.01)、IL-13表达显著升高(p0.01)。结论 (1)IL-1β、IL-13 mRNA在溺死组肺组织中表达呈下降趋势,可能是大鼠溺死出现代偿性抗炎反应综合症导致免疫无能的表现。(2)IL-1β、IL-13 mRNA在血清中表达明显升高,可能与溺水应激及溺死后急性肺损伤创伤应激有关。     

丹皮酚-β-环糊精包合物的制备工艺研究

目的:优选丹皮酚β-环糊精包合物的最佳制备工艺.方法:采用正交试验法,以包合物收率、包合率为评价指标,优选包合时间、包合温度、主客分子投料比,确定最佳包合条件.结果:最佳包合条件为:包合4.5 h,温度为60 ℃,主客投料比为10:1.结论:优选的包合工艺条件可行.     

伊维菌素对内毒血症小鼠生存率和细胞因子分泌的影响

为研究伊维菌素对脂多糖所致内毒血症小鼠的保护率及对小鼠血清中细胞因子的影响,给C57BL/6小鼠灌服伊维菌素(1、2和4mg/kg)或等体积蒸馏水,2h后分别腹腔注射脂多糖32mg/kg或等体积PBS,观察7d内小鼠的死亡情况;采用夹心-ELISA法测定注射脂多糖后不同时间点小鼠血清中的TNF-α、IL-1β和IL-6水平,硝酸还原法测定小鼠血清中NO的水平。结果显示,伊维菌素能显著(P<0.05)提高脂多糖诱导的内毒血症小鼠生存率,降低小鼠血清中的TNF-α、IL-1β、IL-6和NO水平。表明,伊维菌素可通过抑制脂多糖诱导的小鼠体内炎性因子和介质释放提高内毒血症小鼠的生存率。     

新疆部分地区羊源性产气荚膜梭菌的分离及其主要毒力基因的检测

为了解新疆部分地区羊源性产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的毒型分布,对疑似病例所采病料进行了菌株分离,用多重PCR方法对菌株进行了毒素分型,用PCR方法对β2毒素基因(cpb2)和肠毒素基因(cpe)进行了检测。结果,在分离的39株菌中,毒素A型占66.67%(26/39),毒素B型占2.56%(1/39),毒素D型占30.77%(12/39);66.67%(26/39)的菌cpb2基因阳性,A、D型菌cpb2基因阳性率分别为42.31%(11/26)和100%(12/12);cpe阳性率为51.28%(20/39),其中A型菌cpe阳性率为50.00%(13/26),D型菌cpe阳性率为58.33%(7/12);cpb2和cpe双阳性菌株占38.46%(15/39)。上述结果为防治新疆羊源性产气荚膜梭菌感染提供了基础资料。     

颅脑损伤模型中S100β及AQP-4在乙醇影响下的表达

目的通过检测颅脑损伤模型中大鼠脑组织S100β水平及AQP-4在不同浓度乙醇影响下的表达探讨其法医学意义。方法建立大鼠颅脑损伤模型,分为空白组,损伤组,低浓度乙醇组、高浓度乙醇组,(每组包括6h、12h、48h三个时间段),采用气象色谱法于大鼠血液中的乙醇浓度进行检验;采用ELISA法对于大鼠挫伤脑皮质S100β水平进行检验;免疫组化检测大鼠脑组织中AQP-4蛋白表达。结果 1)高浓度乙醇组S100β水平自6h始明显高于其他组;在12h时间段,低乙醇浓度组S100β水平显著低于另外两组。2)镜下及免疫组化研究表明高乙醇组水肿发生早于其他组。对应损伤组及空白组,高浓度乙醇组免疫组化AQP-4阳性率较高。结论颅脑损伤模型中,分析高浓度乙醇通过促进脑水肿引发脑组织中AQP-4、S100β蛋白表达上升,而低浓度乙醇摄入不会引发显著脑水肿,且挫伤脑组织S100β蛋白下调。     

血液和尿液样品中海洛因代谢物稳定性研究

目的对尿液和血液中海洛因代谢物3-β-D-葡萄糖醛酸吗啡（M3G）,吗啡,O6-单乙酰吗啡（O6）在180d内的稳定性进行研究。方法准备空白添加血液、尿液、染毒动物（大白兔）血液、尿液和吸食海洛因者血液、尿液样本,分别置于20℃、4℃、-20℃下,分别于0、1、2、4、7、14、28、56、112、156、180d时间点测定样品中M3G、吗啡,O6相对含量。结果在3种不同温度下,随保存时间的延长,血液、尿液中的O6含量均逐渐下降至零;血液中吗啡含量升高（空白血液添加组）或下降（染毒动物组）,在尿液则均升高;血液样中M3G含量均升高,尿样中则略有下降。下降和升高的幅度均随保存温度的下降而缩小。结论海洛因代谢物在-20℃时保存稳定性最佳。     

口蹄疫病毒受体牛源β1亚基基因的分子特征

从口蹄疫病毒试验感染康复牛肺组织中克隆了β1亚基基因,并对其核苷酸和推导氨基酸序列进行了比较分析。结果显示,牛β1亚基基因的编码区含有2 397个核苷酸,编码798个氨基酸,含有10个潜在的糖基化位点,其中信号肽由20个氨基酸组成,胞外域由708个氨基酸组成,跨膜区由29个氨基酸组成,胞浆域由41个氨基酸组成。与GenBank中的牛β1基因的同源性达99.5%,从起始密码子开始共有12个碱基发生了变化,引起第217、247、268、281、321、691、709位的氨基酸改变,分别由F、S、W、V、H、Y、V变为S、P、R、G、Y、C、G。牛β1基因与猪、猩猩、猫、犬、人、小鼠和鸡的β1基因核苷酸序列同源性分别为93.8%、89.3%、91.6%、90.2%、89.6%、85.4%、75.6%,推导氨基酸序列同源性分别为98.2%、93.7%、97.5%、96.7%、94.2%、93.2%、84.1%。牛与猪β1亚基同源性最高。     

鸡β-防御素13对尼罗罗非鱼生长和疾病抗性的影响

为探讨禽类β-防御素13(gallinaein-13,Gal-13)作为鱼用抗生素替代品的可能性,将150尾同塘同规格尼罗罗非鱼鱼种随机等分为2组:对照组喂商品罗非鱼饵料;Gal-13组在该饵料中添加100 mg/kg的Gal-13.通过观测试验鱼的生长表现及其对凡隆气单胞菌BJCP-9株的抵抗力和黏附能力,并采用cellELISA法体外测试Gal-13对BJCP-9黏附罗非鱼肠上皮的影响.结果显示,罗非鱼饲料中添加100 mg/kgGal-13可显著提高其生长表现和抗BJCP-9感染能力(P＜0.05);100μg/mL的Gal-13并不能抑制BJCP-9生长,但能在体内外抑制BJCP-9时罗非鱼肠道上皮细胞的黏附.离体模拟黏附试验表明,Gal-13在25和2.5/μg/mL的低浓度下有抗黏附作用(P＜0.05),提示Gal-13的抗黏附作用可能是其促进动物生长和提高罗非鱼抗凡隆气单胞菌感染的机制之一,这种抗黏附作用同离子桥和/或配体一受体连接有关,同疏水性无关.     

沙丁胺醇单克隆抗体的制备及其鉴定

将沙丁胺醇 (salbutamol)琥珀酰化后 ,应用混合酸酐法与牛血清白蛋白偶联 ,免疫BALB/c小鼠 ,采用杂交瘤技术获得了 1株能稳定分泌抗沙丁胺醇单克隆抗体的杂交瘤细胞株。该单抗为IgG1亚类。经间接ELISA方法测定 ,其细胞上清抗体效价为 1∶3 .2× 10 6,腹水抗体效价为 1∶6.4× 10 8。该抗体与克仑特罗交叉反应率为 5 0 .0 0 % ,与莱克多巴胺交叉反应率为 0 .3 0 %。体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定。     

两种β_2受体激动剂快速免疫检测方法

分别以偶氮方法和碳化二亚胺（ＥＤＣ）方法将β２受体激动剂克伦特罗（ＣＬ）和塞曼特罗（ＣＩＭ）连接到载体蛋白上，并以连接物免疫家兔，分别制备兔抗ＣＬ和ＣＩＭ抗血清，经间接ＥＬＩＳＡ和间接抑制ＥＬＩＳＡ检测抗血清效价和特异性，并在此基础上建立了ＣＬ和ＣＩＭ快速免疫检测方法。２种抗血清工作浓度分别为１∶１００００和１∶５０００。ＣＬ和ＣＩＭ免疫检测范围分别为１．９ｎｇ～１５．６μｇ和０．４７７ｎｇ～１．８５μｇ。２种β２受体激动剂快速免疫检测方法的建立为监督畜牧生产上滥用ＣＬ和ＣＩＭ，检测肉品ＣＬ和ＣＩＭ残留提供了一种简便、灵敏、特异的手段。