H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶基因的表达及纯化

用RT-PCR方法从H5N1亚型禽流感病毒(AIV)A/Duck/Zhejiang/12/00中获得NA基因,将目的基因定向克隆到原核表达载体pET-32a中,将序列测定和双酶切验证准确的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导,经SDS-PAGE和Western-blot分析,结果显示,重组蛋白得到了可溶性表达,表达的蛋白质分子质量为33 ku;该蛋白可以与禽流感H5N1亚型阳性血清反应,具有良好的免疫原性;ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV神经氨酸酶抗体具有良好的灵敏性。     

广西黄鸡β-防御素Gal-4基因的克隆和体内诱导表达

采用RT-PCR方法从广西黄鸡骨髓中扩增了β-防御素Gal-4基因的cDNA片段。序列分析结果表明,获得的广西黄鸡Gal-4基因大小为321 bp,推导的Gal-4由63个氨基酸组成,其中N端20个氨基酸为信号肽,C端38个氨基酸组成Gal-4的成熟肽。另外,分析了Gal-4基因在正常广西黄鸡(对照组)和H9N2禽流感病毒感染的广西黄鸡(感染组)的肺、肝、腔上囊、十二指肠、肾、气管组织中的表达情况。分析结果表明,在检测的6个组织中,肺、十二指肠、肾组织Gal-4基因的表达在感染组和对照组之间没有明显的差别,而在肝、气管和腔上囊组织中的表达有明显差异,感染组比对照组的Gal-4阳性样品数多。在肝组织中,对照组的30个样品检测到26个阳性样品,而感染组的30个样品全都是阳性；在气管组织中,对照组30个样品检测到19个阳性样品,而感染组的30个样品检测到24个阳性样品；在腔上囊组织中,Gal-4基因的诱导表达情况非常明显,对照组30个样品中仅有9个阳性,而感染组的30个样品中有21个阳性。     

疱疹病毒TK基因的研究进展

简述了疱疹病毒具有表达外源基因的优势,介绍了TK基因作为疱疹病毒化学治疗和构建疱疹病毒基因缺失疫苗的首选靶基因.从TK基因的特点、TK基因的表达调控、TK酶生化特性、TK的功能域等方面做了综合论述,并对其今后的研究和应用前景进行了讨论.     

青海牦牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定

采集青海省泽库县某牧户疑似牦牛病毒性腹泻病牛的样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种MDBK细胞,并盲传至第10代,检测每一代细胞中牛病毒性腹泻病毒的E0基因。通过分离株接种细胞后产生的病变效应观察、免疫荧光试验、电镜观察、RT-PCR扩增以及序列分析鉴定了该病毒。结果表明,盲传的每代细胞中均可检测到E0基因;接毒后的细胞在盲传至第7代时出现明显的细胞病变;免疫荧光试验中能观察到细胞内发出的特异性荧光;经浓缩、纯化的病毒在电镜下呈直径为40～60nm的病毒粒子,将其命名为QHZK株。对克隆的E0基因测序后提交至GenBank(登录号:JF927789),并将获得的序列与其他国内外分离株的E0序列比对,同源性为73.6%～98.2%;系统进化分析表明该分离株属于牛病毒性腹泻病毒1b亚型。     

基于问题驱动的中医基础理论课程线上线下混合式“金课”建设

目的 顺应“以生为本”教学理念,提出问题驱动的中医基础理论线上线下混合式“金课”教学模式。方法 基于问题教学,将线下传统课堂教学与线上、线下自主学习有机结合进行中医基础理论课程“金课”建设,并通过问卷调查以及期末考试考察教学效果。结果 问卷调查表明该教学模式在促进学生发展,提升“金课”的高阶性、创新性、挑战度等方面均有帮助,试验班的期末考试成绩明显高于对照班（P＜0.05）,且高分段（≥80分）人数多于对照班,中、低分段（＜70分）人数少于对照班。结论 基于问题驱动的中医基础理论课程线上线下混合式教学效果明显,“金课”建设取得了阶段性的成果。     

新时代高校思政课引领社会思潮的逻辑理路

增强高校思政课对社会思潮的引领力是高校思政课教学改革的重要任务,可从以下三个方面着力:就基本遵循而言,要坚持问题意识、人民立场、具体问题具体分析的方法、建设性和批判性相统一的原则;就科学研究而言,需精准把握不断涌现的国外思潮的特征和本质、加强对国内重大社会思潮及其发展趋势的研判;就教学实践而言,需明确思政课引领思潮的教学目标、在教学内容中科学合理地融入思潮、充分发挥学生在辨析思潮中的主体性作用、探索引领思潮的教法改革创新。     

关于在国有企业中推进新时代“大思政课”建设的研究

新时代“大思政课”理念的提出体现了党和国家对思政课建设的高度重视。全面推进新时代“大思政课”建设,不仅仅是学校的工作范畴,也是国有企业必不可少且至关重要的一环。在国有企业推进新时代“大思政课”建设,要结合企业思政工作特点,注重把握时代方向,融入大格局;阐释真理逻辑,讲出大学问;开拓教学方式,广求“大先生”;贴合生产经营,推动大发展;践行社会责任,砥砺大担当。     

新时代高校思政课教师队伍能力建设研究——基于贵州省内重点马克思主义学院的实证调研

2019年3月18日,习近平总书记主持召开学校思想政治理论课教师座谈会强调,“思政课是落实立德树人根本任务的关键课程”“办好思想政治理论课关键在教师”,这为加强新时代我国高校思政课教师队伍建设提供了根本遵循.本文以习近平总书记的重要讲话精神为指导,以贵州省5个重点马克思主义学院为调研对象,坚持问题导向,通过现场走访、个...     

大中小学思政课一体化建构的哲学审思

一体化作为一种描述性概念,指向了部分合为整体的状态。大中小学思政课一体化既是目标,也是过程,需要循序渐进、螺旋上升地建构。立足更高维度的哲学立场和思维方法,探寻大中小学思政课一体化建设的内在关联和整合思路,对于深化思政课一体化建设的学理基础、推进新时代思政课内涵式发展具有重要意义。在顺应思想政治教育科学化发展趋势下,大中小学思政课以一体化建构的创造性探索体现出对思政课整体性问题和系统性结构的反思和超越,彰显出历史和逻辑的统一、理论和实践的融贯。大中小学思政课一体化在应然和实然的张力中,对于思想政治教育规律的把握和运演日益明晰,将合规律性与合目的性的统一问题落实到立德树人的具体实践进路中,体现出对思政课建设的规律性认识和自觉性实践。     

基于大鼠心肌组织mRNA表达谱筛选冠状动脉性猝死相关生物标志物

目的 探寻冠状动脉性猝死（sudden coronary death,SCD）大鼠心肌组织信使RNA(messenger RNA,mRNA)的差异表达,为SCD的法医学鉴定提供思路。方法 建立SCD大鼠模型,利用二代测序技术进行转录组测序;用R软件limma包筛选SCD大鼠心肌组织中差异表达基因（differentially expressed gene,DEG）,使用STRING数据库及Cytoscape 3.8.2软件对DEG构建蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction,PPI）网络,并基于cytoHubba插件筛选相关hub基因。用R软件clusterProfiler包对筛选到的DEG进行生物学功能和信号通路富集分析。结果 共有177个DEG与SCD相关,主要参与肾素-血管紧张素系统、PI3K-Akt信号通路等。血管紧张素原（angiotensinogen,AGT）、补体成分4a(C4a)、Fos原癌基因（Fos proto-oncogene,FOS）等基因在SCD的发生发展过程中发挥关键作用。结论 AGT、C4a、FOS等基因有望成为鉴定S...