造福人类的细菌

减缓全球变暖在努力解决全球变暖的课题中,微生物学家发现一种以甲烷为食的深海细菌,可以为此做出贡献。作为一种温室气体,甲烷对气温升高的影响程度是同体积的二氧化碳的21倍。     

产肠毒素性大肠杆菌K88的致病特性及其益生菌的筛选

在获得绿色荧光蛋白(GFP)标记的菌株K88-GFP并证明其与K88具有遗传同质性的基础上,以K88-GFP为致病菌,腹腔注射侵染小鼠,在不同时间进行眼球采血,测定血液生理生化指标,并采取不同器官或组织,培养后利用紫外光激发K88-GFP的绿色荧光,观察计数这种产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)在小鼠体内的分布.同时通过体外抑制和活体饲喂试验,进行了益生菌的筛选.结果证实,ETEC致病菌具有较强的侵袭性,它可以侵袭小鼠肝、肾、心、肺及脑、肌肉等器官和组织,尤其可对肝、肾造成严重的损伤;筛选得到益生菌株PB JK-2,在体内外均对K88具有较好的抑制作用.     

黏杆菌素对两种诱导多重耐药革兰氏阴性杆菌的体外抗菌活性

为评价黏杆菌素对兽医临床常见的多重耐药铜绿假单胞杆菌和大肠杆菌的抗菌作用,以微量肉汤稀释法对2种诱导多重耐药菌株进行最低抑菌浓度和最小杀菌浓度测定;采用菌落计数法绘制黏杆菌素对2种诱导多重耐药菌株的时间-杀菌曲线。结果表明,黏杆菌素对铜绿假单胞杆菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为2和0.25μg/mL,最小杀菌浓度分别为2和0.5μg/mL。黏杆菌素在0.5、2、4、8、16倍最低抑菌浓度下,对多重耐药大肠杆菌不同时间点的杀菌速率差异显著(P<0.05),呈现浓度依赖性;对铜绿假单胞杆菌呈现部分浓度依赖性。黏杆菌素在2倍最低抑菌浓度下,多重耐药大肠杆菌和铜绿假单胞杆菌菌量在2h内显著下降,在4倍最低抑菌浓度下可在8h内将大肠杆菌全部杀死,在4h内将铜绿假单胞杆菌全部杀死。说明黏杆菌素对诱导多重耐药铜绿假单胞杆菌和大肠杆菌具有强效、速效的杀菌作用。     

致病性大肠杆菌O_(157):H_7基因分型的研究进展

就目前的大肠杆菌O157:H7基因分型方法进行了综述,将其归纳为3类:基于DNA的限制性酶切技术、基于特异靶标的PCR扩增技术、基于基因组特定位点的DNA多态性分析技术,阐述和分析了这些技术所涉及的方法和技术特点。认为,大肠杆菌O157:H7具有重要的公共卫生学意义,开展流行病学调查和病原溯源追踪是防控大肠杆菌病的重要手段,而基因分型是大肠杆菌O157:H7鉴定和示踪的重要技术。     

肠毒素性大肠杆菌K99-ST1融合基因的克隆及原核表达

为有效预防肠毒素性大肠杆菌(ETEC)引起的犊牛和羔羊腹泻,将PCR扩增获得的ETEC K99菌毛抗原基因和人工合成的ST1基因片段,借助pUCm-T载体,构建了重组质粒pUCm-K99-ST1,从而获得了融合基因K99-ST1;使用EcoR I Sal I双酶切将该融合基因定向插入表达载体pET-30a中,成功构建了表达载体pET-K99-ST1,将其转入表达茵株BL21(DE3)中,经IPTG诱导,获得31 ku的蛋白;Western-blotring结果显示,该融合蛋白可与K99阳性血清发生特异性反应.     

临床分离动物源性大肠杆菌周浆蛋白AcrA表达水平的测定

为研究大肠杆菌周浆蛋白AcrA表达水平与不同动物源性大肠杆菌多重耐药水平之间的关系,将获得的重组阳性质粒pET28a(+)-acrA转化至大肠杆菌BL21(DE3)细胞中,经IPTG诱导表达,得到约42ku的目的蛋白。AcrA蛋白表达产物经侧带法纯化后免疫獭兔,制备抗AcrA的多克隆抗体,采用间接ELISA法检测临床分离的31株不同动物源性大肠杆菌中acrA基因的表达水平。结果显示,随着多数被检大肠杆菌多重耐药水平的提高,AcrA蛋白的表达量有上调的趋势。表明,动物源性大肠杆菌的多重耐药水平与AcrA蛋白的表达水平可能存在相关性。     

猕猴肠侵袭型大肠杆菌的分离鉴定及其毒力因子基因的检测

2010年5月从四川省某猕猴养殖场急性腹泻猕猴肠道内分离出4株致病性大肠杆菌,并对其进行了16SrDNA扩增、生化反应、血清型鉴定、药敏试验以及毒力因子基因的分子生物学检测。结果显示,该菌株血清型为O28;药敏试验证实该菌对多种抗生素具有抗性,并且呈现多重耐药性;攻毒试验证实该菌能够导致小白鼠大量死亡;多重PCR成功检测出侵袭性大肠杆菌的Einv毒力基因。确定该病原菌为肠侵袭型大肠杆菌,而且毒力很强。     

一株拮抗放线菌发酵液对试验性鸡大肠杆菌病的疗效试验

对一株具有抑菌效果的放线菌发酵液用于治疗鸡大肠杆菌病的疗效进行了研究.采用人工感染诱发鸡大肠杆菌病造模,分别以放线菌发酵液与氟苯尼考进行预防和治疗试验.结果显示,放线菌发酵液治疗组与氟苯尼考低剂量(5 mg/kg)组的大肠杆菌病治疗效果相当,差异不显著;放线菌发酵液预防组与感染对照组在死亡率、治愈率和增重方面差异显著.证实,试验所用的放线菌发酵液可用于治疗和预防人工诱发的O_(89)血清型鸡大肠杆菌病.     

产肠毒素大肠杆菌F41菌毛抗体间接ELISA检测方法的建立

以纯化的重组F41茸毛蛋白作为检测抗原,建立了检测产肠毒素大肠杆菌F41菌毛抗体的间接ELISA方法.经优化筛选的最佳反应条件:包被抗原浓度为0.26μg/孔,血清稀释度为1:800.酶标二抗工作浓度为1:6 000,30 g/L明胶封闭1 h,底物作用时间为10 min.经试验验证,该方法具有特异性好、敏感性高、重复性好、稳定性强等特点.用建立的间接ELISA方法与PCR方法进行符合性试验,总符合率为97.4%.表明,该方法可以用于产肠毒素大肠杆菌F41菌毛抗体的检测.     

原白头翁素衍生物的合成及其抑菌活性

以间硝基苯甲醛、4-甲氧基苯甲醛、3,4,5-三甲氧基苯甲醛和乙酰丙酸乙酯为原料,经过Stobbe缩合、环合两步反应合成了化合物4-(3-硝基苯甲基)-5-亚甲基-2(5H)-呋喃、4-(4-甲氧基苯甲基)-5-亚甲基-2(5H)-呋喃和4-(3,4,5-三甲氧基苯甲基)-5-亚甲基-2(5H)-呋喃.同时观察了合成的这3种化合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑茵活性.结果表明,合成的这3种化合物对2种病原茵具有较好的抑菌效果.