传染性喉气管炎病毒王岗株gB基因gC基因和gD基因的真核表达

将传染性喉气管炎病毒(ILTV)王岗(WG)株的gB、gC、gD基因分别克隆到真核表达载体pCAGGS的EcoRⅠ位点,经过酶切、测序分析,筛选鉴定出含有gB、gC、gD基因的重组质粒,分别命名为pCAGGgB、pCAGGgC、pCAGGgD。用质粒纯化试剂盒对重组质粒进行了纯化,将纯化后的质粒转染293T细胞,用间接免疫荧光技术检测了目的蛋白的表达情况。检测结果表明,目的蛋白得到了真实的表达。     

优化政策过程：构建社会和谐的长效机制

健全和完善公共选择的制度安排,使社会利益冲突能够通过制度化的协商、妥协机制获得解决,是和谐社会建设的核心问题.公共政策作为一种利益调节机制,在和谐社会的建设中发挥特殊的重要作用.在既定的政治框架内,迫切需要通过健全社会各群体的利益表达机制、政策方案的优化机制以及制度化的公众参机制,优化公共政策过程,实现政策收益与成本的均衡化分布,形成维系社会和谐的长效机制.     

动画设计在城市形象设计中的审美作用

本文阐述了动画的功能特征和审美特征,以及动画设计在城市形象设计中的审美作用。     

媒体广场

中国建立药品全过程安全体系；我国年内全面实施最低小时工资制；星火计划二十年培训农民近一亿人次；今年8月底全国2229万人享受低保；我国严禁零售局“欺负”供应商。     

边缘无浆体MSP5蛋白基因的克隆及原核表达

参照已发表的边缘无浆体主要表面蛋白5(MSP5)基因的核苷酸序列,设计了1对特异性引物,以边缘无浆体基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增获得了MSP5蛋白基因。将其克隆到pGEM-T Easy载体,并进行测序分析。结果表明,克隆的MSP5基因与GenBank上登录的Florida株MSP5蛋白基因的序列同源性达98.6%,编码氨基酸的同源性为99.0%,并且该序列包含有完整的开放阅读框,大小为633 bp。将该基因亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建了重组原核表达载体。将其转化到DH5α宿主菌中,用IPTG进行诱导表达,实现了融合表达,表达产物的分子质量为45 ku。Western-blot分析表明,此表达产物能够被抗边缘无浆体阳性血清所识别。     

鸡myostatin基因成熟区段DNA的克隆及其在甲醇酵母中的融合表达

根据GenBank中鸡myostatin(AF019621)成熟区段的cDNA序列设计了1对引物,利用PCR技术扩增了萧山鸡myostatin的成熟区段,构建了重组真核表达载体myostatin-pPIC9K,并在甲醇酵母中融合表达了myostatin蛋白。结果发现,萧山鸡myostatin基因存在2处碱基变异:T204→C204(编码的氨基酸没有变),C205→T205(编码的氨基酸由Pro变成Ser),从而产生了1个EspⅠ或Bpu1102Ⅰ限制性内切酶酶切位点。核苷酸序列同源性分析表明,myostatin基因成熟区段DNA在不同物种间具有高度的保守性。SDS-PAGE鉴定结果表明,表达的目的蛋白(26 ku)具有生物学活性。     

试论新农村建设中的农民利益表达

农民群众是新农村建设的主体力量和直接受益者,只有充分尊重农民意愿,真正树立其主体地位,切实保护和落实其政治权利,新农村建设才会拥有源源不断的力量源泉。要发挥我国农民的主体作用,当务之急是真正落实农民对新农村建设的话语权。本文在分析农民利益表达现状的基础上,提出了新农村建设中农民如何进行利益表达的对策思路。     

试论合理诉求的合法表达

合理诉求合法表达是指公民将具有一定法律根据的利益诉求以法定的形式向有关部门进行反映情况,提出建议、意见或者投诉请求以寻求某种权益保护的过程。合理诉求合法表达是我国民主建设的要求。在民主制度下,公民享有宪法所规定的各项权利,当一些合法权益受到损害、侵犯时,公民有权通过合法的途径和方式来表达利益诉求,维护自身合法权益。这就要求,一方面制度设计中要为公民提供一个合法、便捷、畅通的表达渠道;另一方面公民要以合法的方式表达自己的合理诉求。这样,才能使民主的过程成为良性互动的过程。     

新媒体爆炸引发电视大变身

新媒体拔地而起,唤醒了传统电视媒体的危机感。新者将聚光灯洒向人群中,旧者正在努力学习聆听人群中的智慧;新者将人群划分开来,扎成小堆,旧者仍在冥思如何将触角伸向每一个迥异的小堆。     

口蹄疫病毒3D基因的真核表达及其表达产物的功能分析

利用RT-PCR技术扩增口蹄疫病毒(FMDV)编码RNA依赖的RNA聚合酶的3D基因,经测序确认后将其克隆到真核表达质粒载体pcDNA3.1( )中,重组质粒pcDNA3.1( )-3D经HindⅢ、XbaⅠ双酶切后转染至BHK-21细胞,用纯化的目的蛋白进行Western-blotting鉴定,并预测该3D基因表达产物的三级结构。结果显示,获得分子质量约55 ku的单一3D基因表达产物,其三级结构较为保守。利用RNA细胞内复制体系和荧光定量RT-PCR技术,证明3D基因表达产物在细胞内可促进口蹄疫病毒基因组的复制。