大鼠骨骼肌挫伤后ASCT2 mRNA的表达变化

目的应用实时定量PCR技术检测大鼠骨骼肌挫伤后细胞中性氨基酸载体ASCT2 mRNA表达,分析其与挫伤时间的关系。方法建立大鼠骨骼肌挫伤模型,分别取伤后4、8、12、16、20、24、28、32 h及对照组检材。提取总RNA,逆转录合成第一链的cDNA,以RPL13为内参基因进行荧光定量检测,采用2-△△Ct法比较其与对照组肌肉组织中ASCT2 mRNA的相对表达量。结果损伤组肌肉组织中ASCT2 mRNA在挫伤后12、16h表达量分别为对照组的196.40%和189.15%,损伤后4、8、20、24、28、32h ASCT2 mRNA表达量与对照组相比无统计学差异(P>0.05),说明ASCT2 mRNA在损伤12～16h其表达量较正常组及其他损伤时间组要高,而在损伤20h以后ASCT2 mRNA表达量又降至正常水平。结论大鼠骨骼肌挫伤后32h之内ASCT2 mRNA的表达有一定的时间规律性,可望作为推断骨骼肌损伤时间的指标之一。     

TGF-β1对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞CTGF mRNA表达的影响

为研究外源性TGF-β1对奶牛乳腺上皮细胞表达CTGF mRNA的影响,用组织块法体外培养和纯化出奶牛乳腺上皮细胞,并应用免疫组织化学的方法鉴定细胞的纯度。然后用不同浓度的外源性TGF-β1(0,1,5,10ng/mL)作用乳腺上皮细胞,作用12,24,48,72h后分别提取细胞的总RNA,以β-actin作为内参基因,用实时荧光定量RT-PCR方法测定CTGF mRNA相对表达量的变化,并对CTGF的PCR产物进行测序分析。结果显示,TGF-β1处理组(1,5,10ng/mL)较对照组(0ng/mL)差异显著(P<0.05);处理组CTGF mRNA的相对表达量显著升高,并呈正量效关系:随着TGF-β1浓度的升高,CTGF mRNA的相对表达量基本呈逐渐升高的趋势。测序分析结果证明扩增产物为牛的CTGF基因序列,表明外源性TGF-β1可显著促进奶牛乳腺上皮细胞CTGF mRNA的表达,进而在奶牛乳腺纤维化过程中发挥作用。     

牛病毒性腹泻病毒三种核酸检测方法的比较

利用针对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的常规RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR(real-time RT-PCR)和RT-环介导等温扩增技术(RT-LAMP)3种核酸检测方法对不同质粒浓度的样品和417份临床疑似样品进行了检测,以比较3种核酸检测方法的优越性。结果显示,3种核酸检测方法中,real-time RT-PCR和RT-LAMP一样敏感,均能检测到10拷贝/μL,常规RT-PCR只能检测到1×104拷贝/μL,但临床样品检测表明,常规RT-PCR方法敏感度低,会造成一部分漏检,RT-LAMP灵敏度高又会造成错检。综合比较3种方法后,推荐用RT-LAMP结合real-time RT-PCR,不仅节约成本,且结果更为准确可靠,可提高牛病毒性腹泻的检出率。     

大鼠死后管家基因mRNA稳定性及其时序性降解与PMI相关性研究

目的研究脑组织及骨骼肌内β-actin、GAPDH、RPL32、PKG1、SDHA、RPL13、HPRT、TBP、YWHAZ死后稳定性及其相对表达量与死亡时间(PMI)的相关性。方法取健康成年SD大鼠33只,依据据死亡时间不同随机分为11组(0h、1h、3h、6h、12h、24h、2d、4d、8d、16d、24d),分别在各时间点取大鼠胫骨前肌及脑组织约50mg,提取各组织总RNA,利用RT-q PCR技术检测9种管家基因的m RNA相对表达量。运用ge Norm、Norm Finder和Best Keeper软件对基因稳定性进行评价,利用spss软件对内参标准化的m RNA指标进行回归分析。结果脑组织及骨骼肌中均为HPRT稳定性最高,适合用于本研究的内参基因。脑组织中SDHA、RPL32及TBP 3种指标的相对表达量变化与PMI有一定的线性关系。骨骼肌中m RNA指标相对表达量与PMI之间没有显著的相关性。结论脑组织及骨骼肌是较适宜推断晚期死亡时间的检材。脑组织中SDHA、RPL32及TBP 3种m RNA的相对表达量变化与PMI有一定的线性关系,有望成为推断PMI的辅助指标。     

流程工业CIMS中的实时数据库技术

开放结构的分布式实时数据库系统能够提供高速的实时数据服务 ,能够有效地集成异构控制系统 ,它和关系数据库一起构成了流程企业的数据平台 ,对流程工业的生产信息集成起着极其重要的作用。本文介绍了在流程工业CIMS中实时数据库的功能、系统结构及其采用的关键技术     

士气实时信息系统建设探略

进入新世纪,围绕战场全维空间认知优势的战略竞争趋向深化。有效获取战场士气态势实时信息,以便在第一时间有效实施士气调控,正在成为一体化联合作战指挥系统的重要认知需求。面对新军事变革的这一挑战,我军政治工作应以科学发展观的眼界和智慧,洞察时机,适时启动有中国特色的士气实时信息系统研发工程,积极打造能够满足未来一体化联合作战需要的“军情认知利器”。     

由“数据警规”驱动的新型联勤指挥体系建设

为响应公安部数据警务、智慧公安建设要求,武汉市公安局依托警务大数据,通过画像技术和业务建模技术开发了"数据警规"系统。建立了由"数据警规"驱动的新型联勤指挥体系,在实战过程中发挥了重要作用,极大提高了公安部门的警务决策指挥的能力和效率。同时,由"数据警规"驱动的新型联勤指挥体系建设也对公安部门的联勤指挥机制和队伍建设提出了更高的要求。     

建设一个集成多业务系统的实时综合布控信息系统

本文介绍了一个实时综合布控系统,该系统充分利用了公安信息网,采用触发器和MQ技术,将原先分散型的各系统多头布控集成为一个集中式和分布式相结合的系统,有效解决了原先存在的一些问题,提高了工作效率。     

移动医疗来了

移动互联网医疗是指利用移动终端和以互联网为载体，开展健康咨询、疾病评估、挂号缴费等医疗健康服务的新兴行业，因其成本低廉，使用便利，加之可穿戴设备的逐步普及，移动互联网医疗实现了健康数据实时监测“进入寻常百姓家”，受到各方关注。     

DART-MS/MS快速检测人血中的3种合成大麻素

目的使用实时直接分析-串联质谱,建立快速检测人血中的JWH-018、JWH-250和AM-2201的方法。方法用乙腈-甲醇(4:1)沉淀蛋白的方法对血样进行简单前处理,采用DART 12Dip-it自动进样系统,以正离子、MRM模式进行分析。结果血液中JWH-018、JWH-250、AM-2201可以得到有效检测,在0.02-5.00μg/m L线性关系良好,相关系数均大于0.99,检出限分别为0.016μg/m L,0.003μg/m L和0.017μg/m L,日内、日间RSD均小于15%。结论本文所建方法灵敏度高,准确性较好,方法省时省力,可用于实际案例血液中合成大麻素JWH-018、JWH-250、AM-2201的分析。