贵州省传染性法氏囊病病毒野毒株核酸及结构蛋白比较研究

采用氯仿抽提、聚乙二醇沉淀，再经差速离心和蔗糖密度梯度离心，从病变法氏囊组织中提取出较纯的传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）。病毒核酸电泳分析表明，４株ＩＢＤＶ分离株均由双节段ＲＮＡ组成，大小基因片段的电泳迁移率毒株间无差异。ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析表明，ＩＢＤＶ分离株均由４条主要的结构蛋白带组成。近年从免疫鸡群中分离的地方强毒ＪＨ株及引自中监所的血清Ⅰ型强毒Ｊ＿１Ｃ＿７株，其主要结构蛋白带与早年分离的ＩＢＤＶ野毒株相似，电泳迁移率也基本一致。同时观察到毒株间各蛋白带相对百分含量的变化。     

猪瘟病毒E2重组蛋白纯化和复性条件的研究

对猪瘟病毒(CSFV) C株、LT株E2基因主要抗原区在pGEX系列表达载体中原核表达的融合蛋白进行了变性、复性和纯化回收试验。用建立的变性、复性和纯化方法,获得了可溶性的纯化蛋白E2,其纯度达70%,回收率为10%。对复性纯化的E2蛋白进行了免疫活性检测,结果表明,其比未纯化蛋白的免疫活性高20倍左右。     

根据损伤组织中C─反应蛋白的含量及分布推断损伤时间

作者应用酶联免疫吸附分析和免疫组织化学方法，检测大鼠切创创缘C-反应蛋白含量及分布的变化，探讨它们与损伤时间的关系及其来源。结果表明通过检测损伤组织中C-反应蛋白的含量及分布可推断伤后30分钟至5小时内的损伤时间，并证明C-反应蛋白可由肝细胞合成，组织损伤可诱发肝细胞合成C-反应蛋白。     

弥漫性轴索损伤最新研究进展

弥漫性轴索损伤(D iffuse axonal injury,D A l)是指头部遭受钝性外力作用后所引起的以脑白质轴索弥漫性损伤为主要特征的一种脑损伤。损伤后果严重,有学者认为在重型颅脑损伤中D A I占28%～42%,死亡率达42%～62%。A dam s等观察到外伤性重症颅脑损伤患者中有13%～28%为闭合性D A I且并不伴有脑挫伤及明显的脑出血。C ordobes等对78例D A I病人的观察发现,患者死亡率为49%,植物生存状态为15%,重残率为14%,轻残为17%,痊愈仅为5%。D A I不但是临床上诊治的难点,也是法医学鉴定中难以解决的难点。[1]一、D A I动物模型1928年R om on利…     

植物叶蛋白对抗脂质过氧化作用酶系统的影响

选择 4 0只生长后期的Wistar大鼠 ,随机分为 4组 ,分别用含植物叶蛋白 2 0、5 0、10 0、15 0 g/kg的饲料饲喂 ,在第 10、2 0、30、4 0d采心血 ,测定谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、超氧化物歧化酶 (SOD)的活力及丙二醛 (MDA)的浓度。结果表明 ,植物叶蛋白可提高GSH Px、SOD的活力 ,降低过氧化产物MDA的浓度 ,增加机体抗氧化酶系统的功能。     

大鼠支气管哮喘模型的心肌HSP70表达研究

目的探讨支气管哮喘心肌组织的损害机制,为支气管哮喘诱发的猝死的法医学诊断提供形态学依据。方法应用HE和免疫组化技术,对大鼠支气管哮喘模型的心肌HSP70的表达规律进行研究。结果实验组的心肌HSP70阳性表达明显高于对照组(P<0.01),随着哮喘时间的延续,心肌HSP70的阳性表达逐渐增强(P<0.05),在第8周表达最强。结论实验组支气管哮喘早期心肌有损害,且随时间延续,损害增强。HSP70对支气管哮喘诱发的猝死的法医学诊断有一定的帮助。     

SARS冠状病毒纤突蛋白的分子生物学研究进展

从纤突蛋白的结构分析、受体及其表位分析三方面论述了SARS冠状病毒纤突蛋白的研究进展,并与部分其他动物冠状病毒进行了比较,从分子水平上阐述了纤突蛋白的结构、受体和表位研究概况,旨在为SARS冠状病毒的诊断、疫苗设计及基础研究提供理论依据。     

用重组腺病毒免疫方法制备伪狂犬病病毒gC蛋白单克隆抗体

将表达伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gC基因的重组腺病毒经肌肉免疫BALB/c小鼠,测试了重组腺病毒免疫小鼠制备抗目的蛋白单克隆抗体的效果。ELISA分析表明,BALB/c小鼠接种重组腺病毒后能产生针对gC蛋白的特异性抗体。给BALB/c小鼠用大肠杆菌表达的gC融合蛋白MBP-gC-NC加强免疫后第3 d,取小鼠脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞在PEG4000作用下进行杂交融合,经筛选、克隆,获得了3株稳定分泌抗PRV gC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1B4、1H4和2C8。单抗特性分析结果表明,1B4、2C8属IgG2a亚类,1H4属IgG1亚类;腹水抗体的ELISA效价为1∶2×105~1∶2×106;3株单抗都具有间接免疫荧光试验(IFA)和免疫印迹试验(Western-blotting)反应特性,能够特异地识别PRV gC蛋白。证实重组腺病毒免疫可用于制备目的蛋白单克隆抗体,为制备单抗提供了一种新的方法。     

鹅副黏病毒NP蛋白间接ELISA检测方法的建立及免疫鹅抗体水平的检测

以纯化的鹅副黏病毒NP蛋白为包被抗原,建立了检测鹅副黏病毒NP蛋白抗体的间接ELISA方法,并确定了间接ELISA的最适反应条件:抗原包被浓度为1.0μg/mL,血清稀释度为1∶200,兔抗鹅IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1∶2 000,抗原和血清、血清和二抗均于37℃反应1 h,底物于37℃显色15 min。此间接ELISA方法的特异性强、重复性好。应用该方法对试验鹅血清进行检测,以HI试验为参照。经统计学处理后,比较了两方法测得的抗体效价,分别建立了各组鹅群的回归方程。显著性检验证明,这两种方法检测的抗体效价呈显著相关关系。     

甘草甜素与蛋白结合的研究

本文采用超滤法研究了甘草甜素与蛋白的结合。结果表明,当甘草甜素的浓度不高于2mM时,98%的甘草甜素皆可与蛋白结合。Scatchard图指出,甘草甜素的蛋白结合具有两种类型的结合点。用MULTI程序对结合的详细情况进行了分析,结果表明,在两类结合点中,第一类结合点具有很高的结合常数。