全文获取类型
收费全文 | 620篇 |
免费 | 50篇 |
专业分类
各国政治 | 4篇 |
工人农民 | 1篇 |
世界政治 | 2篇 |
外交国际关系 | 393篇 |
法律 | 148篇 |
中国共产党 | 7篇 |
中国政治 | 31篇 |
政治理论 | 5篇 |
综合类 | 79篇 |
出版年
2024年 | 7篇 |
2023年 | 19篇 |
2022年 | 23篇 |
2021年 | 33篇 |
2020年 | 10篇 |
2019年 | 7篇 |
2018年 | 2篇 |
2017年 | 11篇 |
2016年 | 8篇 |
2015年 | 20篇 |
2014年 | 62篇 |
2013年 | 32篇 |
2012年 | 44篇 |
2011年 | 32篇 |
2010年 | 39篇 |
2009年 | 35篇 |
2008年 | 63篇 |
2007年 | 30篇 |
2006年 | 37篇 |
2005年 | 25篇 |
2004年 | 30篇 |
2003年 | 12篇 |
2002年 | 11篇 |
2001年 | 8篇 |
2000年 | 13篇 |
1999年 | 10篇 |
1998年 | 10篇 |
1997年 | 4篇 |
1996年 | 3篇 |
1995年 | 4篇 |
1994年 | 8篇 |
1993年 | 4篇 |
1992年 | 6篇 |
1991年 | 3篇 |
1990年 | 1篇 |
1989年 | 3篇 |
1987年 | 1篇 |
排序方式: 共有670条查询结果,搜索用时 109 毫秒
551.
目的:探讨艾灸预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制.方法:利用大鼠心肌缺血再灌注模型,观察艾灸预处理组(分为艾灸每日1次组和艾灸每日2次组)、缺血预处理组、单纯模型组、假手术组和正常对照组大鼠细胞凋亡及热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)mRNA表达的情况.结果:艾灸预处理组细胞凋亡降低,HSP70 mRNA表达增加,且与艾灸预处理的次数有相关性.艾灸预处理每日1次与缺血预处理预防心肌缺血再灌注损伤的效应无显著性差异,艾灸预处理每日2次组优于缺血预处理组.结论:艾灸预处理对心肌细胞缺血再灌注具有保护作用,其效应与每日艾灸次数有关. 相似文献
552.
以在大肠埃希氏菌中表达的微小隐孢子虫 (Cryptosporidum parvum )子孢子表面抗原CP15为抗原 ,以辣根过氧化物酶 (HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗 ,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA。试验筛选出的最佳反应条件为 :大肠埃希氏菌CP15抗原包被量为 1μg/孔 ,用10 0mL/L的兔血清进行封闭 ,以正常大肠埃希氏菌裂解上清液稀释待检血清。试验结果表明 ,应用CP15重组蛋白作为诊断微小隐孢子虫抗体的抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点 相似文献
553.
554.
犬瘟热病毒R/20-8株核衣壳蛋白基因的克隆和表达 总被引:3,自引:0,他引:3
应用RT-PCR技术扩增出犬瘟热病毒(CDV)核衣壳(N)蛋白基因的高度保守序列,将其克隆至质粒pMD18-T中,获得了重组质粒pMD18-T-N。将N基因的目的片段克隆到表达载体pGEX-4T-1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,并将该重组质粒转化大肠杆菌BL21株,经IPTG诱导,N基因融合蛋白获得了高效表达。SDS-PAGE电泳和Western-blot分析结果显示,表达产物的分子质量为55 ku,与CDV标准阳性血清呈阳性反应。表明,大肠杆菌表达的CDV N蛋白在免疫原性上与天然N蛋白具有一定的相似性,可作为诊断用抗原。 相似文献
555.
一、水通道蛋白的发现水是生物机体细胞的主要成分 ,每时每刻有大量的水分子通过细胞膜进出细胞。在 90年代以前 ,对于水分子的转运机制 ,主要有两种理论解释 ,一种是水分子的简单扩散学说 ,认为细胞内外渗透压差是其动力源 ,需要较高的阿里纽斯活动能(Arrheniusactivationenergy ,以下简称Ea) ,一般Ea >10kcal/mol,达到平衡时渗透率 (Coefficientofosmoticpermeability ,简称Pf)与扩散率 (Coefficientofdiffusionalpermeability ,简称Pd)趋于相等 ,不能被汞等通道蛋白阻断剂所抑制。但水分子简单扩散理论不能解释一些生理现象 ,如尿的浓… 相似文献
556.
用设计合成的1对跨越禽呼肠孤病毒(ARV)P17非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物,对ARV S1133株进行了RT-PCR扩增。扩增产物与pGEX-4T-1原核表达载体连接后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。经0.2 mmol/LIPTG诱导,表达的融合蛋白分子质量为42.4 ku,占菌体总蛋白的34%。表达产物P17蛋白经不同浓度尿素纯化后,纯度达到85%。Western-blotting显示,纯化的P17蛋白能与感染ARV的阳性血清反应,说明其具有抗原性。以此重组蛋白为包被抗原初步建立了用于鉴别检测ARV活病毒感染与灭活疫苗免疫的SPF鸡血清的ELISA。 相似文献
557.
558.
采用差速离心和蔗糖递度超速离心法提纯了鸡病毒性关节炎病毒(AVAV)H_(9307)株,并用SDS-PAG电泳技术分析其结构蛋白,该病毒主要由8条多肽组成(VP_1~VP_8),它们的分子量分别是145、130、115、72、70、65、42、39KD。用Westernhlotting免疫印迹技术分析这些多肽的免疫活性,与同源病毒株抗血清出现5条可见的反应带,分别是VP_1、VP_2、VP_4、VP_5和VP_7;与异源病毒抗血清反应只出现两条可见的阳性反应带,分别是VP_1和VP_2。 相似文献
559.
560.
猪脑心肌炎病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 总被引:7,自引:2,他引:5
利用纯化的猪脑心肌炎病毒(EMCV)VP1重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,获得了2株稳定分泌抗EMCV VP1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为10B和11D。经ELISA测定,2株杂交瘤细胞培养上清效价分别为1∶1 600和1∶800,接种小鼠的腹水效价分别为1∶2.56×106和1∶1.28×106。2株单抗的亚类均为IgG2a,均能特异性识别重组VP1蛋白,但它们识别VP1蛋白的不同表位。间接免疫荧光和免疫组织化学试验证实,2株单抗具有良好的特异性,均能够识别EMCV。 相似文献