步步惊魂——雅鲁藏布大峡谷穿越纪实之三

1全天行程约14公里挺进西隆4月4日(周三,多云转阴,夜间转雨,进入无人区第三天)早晨醒来,胃痛强烈地提醒我,这辈子我是吃不惯糌粑了。除了想喝水之外,没有想吃东西的欲望。无奈中,泡了两块压缩饼干,再打开一包榨菜,早饭算是打发了。强忍着隐隐的胃痛,开始了当天的穿越。从昨晚的营地出发,前行几百米就到了江边。然后,在河床上踩着河边的石头前进。在河床上跳了近一个小时的石     

波尔山羊卵母细胞和早期胚胎的端粒酶活性

利用端粒重复序列扩增(TRAP)法进行了山羊卵母细胞和附植前胚胎的端粒酶活性的测定;结果表明,山羊卵母细胞和早期胚胎的端粒酶活性都为阳性。TPG定量比较发现,卵母细胞的TPG最低,为25.348U;4-细胞的TPG为273.832U,至8-细胞时,TPG又降低到56.117U,随后快速升高,桑椹胚的TPG为251.111U;囊胚的端粒酶活性最高,TPG为519.46U。     

丝状霉形体山羊亚种巢式PCR检测方法的建立

根据已发表的丝状霉形体簇各成员核苷酸序列,设计合成了2对引物McF、McR和MmcF、MmcR,建立了可以鉴别丝状霉形体山羊亚种(Mycoplasma mycoidessubsp.capri,Mmc)的巢式PCR方法。特异性和敏感性试验结果显示,该方法只能对Mmc扩增出195 bp的片段,而对其他病原菌不能扩增出任何条带,它最低能够检测出10 pg的Mmc DNA,说明该方法具有良好的特异性和很高的敏感性。田间试验结果显示,对4株霉形体分离株及其病料均可扩增出Mmc特异性片段,表明,该巢式PCR方法可用于Mmc快速鉴定和流行病学调查。     

山羊关节炎-脑炎的研究——琼扩抗原的制备与应用

以山羊关节滑膜细胞增殖CAEV75-G63,用PEG沉淀浓缩及乙醚处理制成琼扩抗原,其与美国CAE标准阳性血清、参考阳性血清均呈阳性反应;而与马传贫、白血病、蓝舌病和布病阳性血清均无交叉反应。经SDS-PAGE和PAS糖蛋白染色分析,与美国CAE标准抗原的蛋白带相同,其主要分子量为90kd的糖蛋白。抗原制备方法简单,效价稳定,重复性好。经过136份奶山羊血清的检测,两种抗原的符合率为97.8％。     

影响胚胎移植受体羊同期发情效果的因素

用进口阴道海绵栓、进口孕酮阴道栓、国产前列腺素 氯前列烯醇对受体山羊进行同期发情处理。结果 ,3种药物的处理效果都比较好 ,差异不显著。选择不同营养状况的受体羊 ,用同一种药物处理 ,结果 ,营养状况良好的受体羊同期发情效果最好 ,同期发情率、移植率、妊娠率分别达到 10 0 %、86 .7%、75 .0 %。选择西农萨能奶山羊、唐山奶山羊、苏北白山羊用同一种药物处理 ,结果表明 ,品种对受体羊同期发情效果影响不大。在不同季节用同一种药物处理受体羊 ,4、6月份同期发情效果明显比 11月份差 ,11月份处理的受体羊同期发情率、移植率、妊娠率分别达 93.5 %、70 .9%、5 8.0 %。     

山羊鼻内肿瘤病毒RT-PCR检测方法的建立

根据GenBank中登录的山羊鼻内肿瘤病毒(ENTV)SC株的基因序列,设计合成了1对特异性引物,通过对反应条件进行优化,建立了一种快速检测ENTV的RT-PCR方法。结果显示,以该引物进行RTPCR扩增,能得到与理论设计值大小相符的323bp的特异性条带;与ENTV-SC株相应序列的同源性达98%;该方法最低可检测出6pg的ENTV;用此方法对健康山羊鼻黏膜上皮、健康牛鼻黏膜上皮、绵羊肺腺瘤病毒、肺炎球菌和大肠杆菌的扩增结果均为阴性,重复性和稳定性好;对随机收集的100份山羊样品进行检测,并与临床诊断结果进行比较,符合率为100%。结果表明,此方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性均好,可用于山羊鼻内肿瘤病毒的临床检测和试验研究。     

氟苯哒唑控释药丸对山羊线虫的驱除效果

通过给山羊投服氟苯哒唑控释药丸 ,观察药丸对山羊寄生线虫的驱除效果。Ⅰ组为投服氟苯哒唑控释药丸组 ,投药后第 5～ 10 5d线虫虫卵减少率为 10 0 % ;Ⅱ组为胃管一次给药组 ,给药后第 5d线虫虫卵减少率为 96.9% ,3 0d后虫卵数回升。试验结束时 ,Ⅰ组山羊平均增重比Ⅱ组和不给药对照组 (Ⅲ组 )的平均增重分别多 2 .1kg和 4.1kg。结果表明 ,控释药丸不仅比胃管一次给药的驱虫效果好 ,且药效时间明显延长。     

类山羊传染性胸膜肺炎诊断和防治的研究——病原诊断

于1987年从甘肃省陇东类山羊传染性胸膜肺炎流行区采取临床可疑的山羊、绵羊病料,进行了一系列病原诊断研究,结果:排除了相关致病因素,如梅迪,维士那,山羊关节炎脑炎(CAE),衣原体及相关致病菌感染和寄生虫侵袭;最终从21例山羊6/6例绵羊病变肺组织中培养分离出支原体13株/4株,分菌率均在60％以上,分离株经初步鉴定后,经英国国际支原体鉴定中心(NCTC)最终鉴定均为绵羊肺炎支原体(M.ovipneumonia);以分离株人工感染健康山羊7只,绵羊3只,结果6/7的山羊,2/3的绵羊于接种后第14天始形成与自然病例相似的病变,并以7/7山羊,2/3绵羊病变肺组织中收回原接种物;以琼脂双扩散,试管凝集反应及间接血球凝集试验进行抗原性研究结果证明,分离株与绵羊肺炎支原体标准株(y—98)具有共同抗原性。从而不仅首次确证了该地本病是由绵羊肺炎支原体所致,且对山羊和绵羊都具有很高的感染率和较强的致病性。     

山羊背根神经节神经细胞的原代培养及鉴定

从胎龄3个月左右的山羊胚胎中分离出背根神经节,采用组织块培养法,利用血清培养和无血清培养,并在非神经细胞抑制剂作用的条件下,观察了山羊背根神经节神经细胞在体外的生长状况,采用免疫荧光和RT-PCR技术对神经细胞表面标志神经元特异性磷酸化酶(NSE)进行了鉴定。结果显示,接种48h后的细胞从组织中迁出,并长出突起,经阿糖胞苷作用后,神经细胞与非神经细胞分层;经免疫荧光鉴定,上层细胞为神经细胞。随着时间的增加,神经细胞突起延长并交错成网状,至第6～10天神经细胞形态最为成熟饱满,随后逐渐出现细胞老化,神经细胞最长可生存32d。表明本试验成功分离培养得到了山羊背根神经节神经细胞。     

山羊关节炎-脑炎病毒陕西分离株全基因组的克隆和序列分析

为了解山羊关节炎-脑炎病毒(CAEV)陕西分离株全基因组的特点及基因演化变化,根据Gen-Bank中登录的CAEV CO株的全基因组序列,设计合成了5对引物,对CAEV陕西株的全基因组进行了PCR扩增,并对扩增产物进行了克隆和测序。结果显示,CAEV陕西株的基因组全长为9 065nt,获得的GenBank登录号为GU120138,包括两端的长末端重复序列,结构蛋白编码基因gag、pol、env和调节蛋白编码基因tat和rev,以及辅助蛋白编码基因vif。核苷酸序列比对表明,CAEV陕西株和CAEV甘肃株的同源性为99.6%,与CAEV CO株的同源性为92.4%,根据全基因组序列和gag基因序列构建的遗传进化分析结果显示,CAEV陕西分离株属于SRLV B2亚型。