猪囊尾蚴cDNA表达文库的免疫筛选

用质粒表达载体pSPORT 1构建了猪囊尾蚴cDNA文库。将已构建好的cDNA表达文库用SOC按一定比例稀释后 ,均匀涂布于LB板 (Amp )上 ,37℃培养箱中倒置培养过夜。将生长良好的菌落转印于NC膜 ,并将此膜置于加有IPTG的LB板上 ,37℃诱导培养 4h。取下NC膜 ,在氯仿蒸气中熏蒸 15min后 ,在裂解液中过夜裂解。经洗膜、封闭 ,加人囊尾蚴阳性血清 ;再洗膜、封闭 ,加羊抗人IgG HRP ,与底物作用后 ,初步筛选得到了阳性克隆。对可疑阳性克隆 ,用同样方法反复筛选 ,直到完全确定为止     

新兴猪IL-18成熟蛋白基因的克隆与序列分析

根据GenBank上登录的猪白细胞介素18(pIL 18)基因序列,设计了1对特异引物。利用RT PCR对从3周龄新兴仔猪脾细胞中提取的总RNA进行了扩增,获得了约500bp的片段。将该片段克隆、鉴定、测序,证实已获得了新兴猪IL 18成熟蛋白基因片段,其大小为474bp,编码157个氨基酸,与GenBank上登录的猪IL 18成熟蛋白基因序列完全一致。     

猪生长激素基因的原核表达及其抗体制备

通过构建pGH基因的原核表达质粒,转化大肠埃希氏菌TOP10,经IPTG诱导,成功表达了重组猪生长激素的融合蛋白。经SDS PAGE分析,在分子质量50.4ku处有1条新的特异蛋白质条带。对以包涵体形式表达的融合蛋白进行SDS PAGE分离,并经透析得到了重组融合蛋白,以此融合蛋白免疫家兔,制备并纯化了抗pGH多克隆抗体,经酶联免疫吸附测定、蛋白质印迹分析和免疫组织化学方法检测,此抗体具有较高效价和特异性。成功地表达了pGH基因并获得了多克隆抗体。     

Prohibitin 2基因参与猪圆环病毒2型PK-15细胞感染的研究

为探究Prohibitin2(PHB2)在PCV2感染细胞过程中发挥的作用,首先通过间接免疫荧光试验检测PCV2在PK-15细胞中的增殖变化,同时建立PHB2荧光定量PCR检测体系,然后以PCV2已知的宿主细胞互作蛋白gC1qR为对照,检测PCV2感染PK-15细胞后PHB2 mRNA的动态变化,最后鉴定PHB2 siRNA转染PK-15细胞中PCV2 Cap的表达。结果表明,PHB2在正常及PCV2感染的PK-15细胞中均有效表达。随着PCV2感染PK-15细胞,gC1qR转录水平在病毒感染3 h显著降低,感染6 h时升高,随后(12~48 hpi)转录水平下降;而PHB2转录水平在PCV2感染6 h内显著升高,随后(12~48 hpi)mRNA水平有所下降;RNA干扰PHB2对PCV2在PK-15细胞中复制起到显著的抑制作用。上述研究结果表明,PCV2可显著影响PK-15细胞中PHB2转录,而且PHB2对PCV2病毒复制具有调节作用。     

高福利、高逃税吃垮“欧猪五国”

去年年底爆发的希腊主权债务危机，如今颇有在欧洲其他国家蔓延的趋势。希腊加上西班牙、葡萄牙、爱尔兰、意大利等被称为“欧猪五国”（PIIGS），接连传出财政状况恶化的消息，甚至连身处欧元区之外的英国都被警告有发生债务危机的风险。     

猪行天下

今年，我市启动了“两翼”农户万元增收工程，期待到2012年“两翼”300万农户纯收入在2009年的基础上户均增加一万元。农民致富需要牵引。目前，一大批农村致富带头人活跃在乡间，在调结构、促进产业化经营、搞活农产品流通、引导农民走上市场、推动农业科技进步等方面发挥着重要作用。我们精心选编了这一组农村致富带头人的典型故事，希望能对“两翼”农户实现万元增收，有所启迪和帮助。     

“农家周末”乐农家

凉风习习，秋高气爽。“大姐，你这一大早匆匆地是要干啥去？”周六一大早，钦州市钦北区长滩镇古勉村村民李大姐刚吃过早饭就m门了，“赶去过周末，‘抓山猪’去!”李大姐笑吟吟地边走边说。过周末？抓山猪？带着满心的好奇，笔者跟上李大姐的步伐去一探究竟。     

平凡农妇不平凡的爱

面对瘫痪14年的丈夫,不离不弃;面对生活压力,自强不息,用真挚的爱、炽热的情谱写了一曲催人泪下的真情之歌——"我有什么好采访的,我只不过是一个普普通通的农民。"3月初的早晨,天空下着毛毛细雨,笔者来到荔浦县大塘镇庆华村石秀媛的养猪场。她刚给猪场的500多头幼猪喂完食,丈夫曾强发坐在轮椅上,翻看着一本养猪技术书。     

五种金霉素预混剂的体外溶出度及其在猪体内的释药特征

为考察五种金霉素预混剂的体外溶出度及在健康猪体内的释药特性,采用高效液相色谱法测定五种金霉素预混剂的体外溶出度;选用体重约16kg的大×长二元健康断奶仔猪48头,随机分成6组,通过在饲料中添加金霉素给药(500mg/kg),进行其在健康猪体内的释药特性研究,采用高效液相色谱法测定血浆及肺组织中金霉素的浓度。体外溶出度结果表明,五种金霉素预混剂在120min内累积溶出度依次为制剂C>制剂A>制剂E>制剂B>制剂D,在12min内溶出度较快,12min以后溶出度接近第120分钟的水平;体内释药试验结果表明,五种金霉素预混剂按500mg/kg(以金霉素计)连续饲喂7d,血药浓度均上升较慢,达峰时间较长,第1次给药后第6～8小时达到峰浓度,制剂A、B、C、E组在第1次给药后第3小时至试验结束,血药浓度均超过0.5μg/mL,而制剂D在第3、4、5天的血药浓度均小于0.5μg/mL。结合临床上金霉素对病原菌的抑菌活性,五种金霉素制剂预防疾病的效果依次为制剂C>制剂A>制剂E>制剂B>制剂D,与体外溶出度的结果相一致。     

“笨猪四国”拖累欧洲

南欧的葡萄牙（Portugal）、意大利（Italy）、希腊（Greece）和西班牙（Spain），一直是国际旅游者的心仪之地。虽然四国风景如画，气候宜人，但近年来经济发展却较为赢弱，增长缓慢，失业率居高不下，财政赤字高企。鉴于情况近似，有财经人士取四国英文首字母形成一个词“pigs”，并比照金砖四国“Brics”的叫法，贬称这四国为“笨猪四国”。