猪传染性胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白基因的克隆和表达

以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清7型25-4株基因组DNA为模板,用PCR扩增外膜蛋白(OMP)基因特异片段,并克隆于pMD 18-T中,经酶切及核苷酸序列分析鉴定后,亚克隆于原核表达载体pGEX-6P-1,成功构建了重组表达载体pGEX-omp;以此转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),经SDS-PAGE鉴定,表达的可溶性融合蛋白分子质量约为61 ku,命名为GST-OMP。以GST亲和层析柱纯化并利用Xa因子酶解,获得切掉标签的OMP。经ELISA检测,该OMP蛋白能够与兔抗APP的阳性血清反应,具有很好的免疫活性。GST-OMP蛋白的成功表达为APPOMP相关分子生物学功能的研制奠定了基础。     

卡氏肺囊虫肺炎致死1例

1 案例 某男，48岁。某年6月9日，因病到一个体诊所就诊治疗，静脉点滴青霉素及激素类药物20d，于7月5日死亡。 尸体检验：成年男性，尸长179cm，消瘦。肺：左肺与前胸壁广泛性粘连，两肺饱满，呈暗红色，双肺下叶均可见暗红色实变区。切面呈暗红色，有大量暗红色血性泡沫液体溢出。     

新时代中国“抗疫”的内在逻辑及其当代意义

习近平总书记对新冠肺炎疫情的防控作了重要指示批示和系列阐述,凸显了新时代“抗疫”的深刻内在逻辑。本文通过对作为认知基础的生态系统敏锐性、制度导向的国家治理现代化以及精神支撑的思想文化厚重性的生成逻辑;以坚持党的领导为政治保证、以坚持人民为中心为根本立场以及以坚持全国一盘棋为显著优势的深刻意蕴的理论逻辑;联合共同抗疫、多管齐下抗疫、协同推进抗疫以及思维综合运用抗疫的实践逻辑等内在逻辑的深入分析,进一步肯定新时代中国“抗疫”助推国家治理体系与治理能力现代化,增强中华民族凝聚力和向心力以及提升中国的国家形象和国际地位具有的重要意义。     

猪胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖基因的原核表达及其产物的细胞毒性

参考GenBank中猪胸膜肺炎放线杆菌(App)血清2型荚膜多糖基因的序列分别设计了3对特异性引物,通过PCR分别扩增了CpsA、CpsB、CpsC 3个基因,获得长约1 137、429、1 146 bp的片段,将其分别克隆到pMD 18-T中,经酶切鉴定和序列分析获得了阳性克隆子;再将CpsA、CpsB、CpsC分别插入原核表达载体pGEX-KG后,转化BL21,在IPTG诱导下获得高效表达,经Western-blotting检测证实,表达产物CpsC有生物学活性,CpsA、CpsB无活性;将3种表达产物等量混合,做10倍递进稀释后,与分离出的猪嗜中性粒细胞作用,37℃5、0 mL/L CO2培养箱中温育4 h后加入底物液,测定D492 nm值。结果表明,App荚膜多糖对猪嗜中性粒细胞无毒性作用。     

猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗的研究--菌种选择、疫苗制备及安全性试验

以国内多发的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 (APP) 1、3、7血清型强毒株作为制苗菌株 ,制成油佐剂三价灭活苗。经效力试验 ,对上述 3种血清型强毒攻击的保护率分别为 88.8%、88.8%和 10 0 % ;试验动物安全性检验及田间安全检验 ,除个别猪出现轻微体温反应及暂时减食外 ,无其他异常反应。表明该苗对猪的保护性及安全性良好     

大熊猫嗜水气单胞菌和克雷白氏菌的分离鉴定

从腹泻的大熊猫粪便中分离到 2株细菌 ,用BiologMicroStation细菌自动生化鉴定工作系统鉴定为嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)DNA 1群和肺炎克雷白氏菌肺炎亚种 (KlebsiellapneumoniaeSSpneumoniae)。试验表明 ,2菌对小白鼠有极强的致病性 ,对菌必治和百菌除敏感。     

猪肺炎霉形体单克隆抗体的制备与鉴定

用KM 2培养基 (含马血清 )培养猪肺炎霉形体 (Mhp)ZCF2 3株 ,对培养物高速离心 ,用PBS悬浮 ,反复冻融裂解后作为免疫原 ,腹腔注射免疫BALB/c小鼠。利用淋巴细胞杂交瘤技术获得了 5株分泌特异性抗体的单克隆抗体细胞株 ,分别命名为 11C6、14C11、11B6 1、10C11 2和12E7 1。生物学特性鉴定结果表明 ,5株腹水单克隆抗体的间接ELISA效价均在 1∶10 0 0 0左右 ;免疫球蛋白亚类均为IgG3;免疫印迹结果显示 ,5株单克隆抗体所针对的抗原表位在 90、4 0、70和6 0ku左右的蛋白分子上 ,均不与马血清蛋白反应 ,说明这些单克隆抗体均是针对Mhp蛋白的特异性单克隆抗体。     

猪喘气病病原的研究

四川省乐山市某猪场的猪发生以咳嗽、气喘为主要症状的呼吸道疾病,取病猪新鲜肺组织进行分离培养检出了猪肺炎霉形体(Mycoplasma hyopneunloniae)XY-1株及支气管败血波氏杆菌(Boidatella bronchisepticai)JYZ3株;利用分离的2株病原菌制成灭活苗,对猪进行免疫,预防效果达80%以上.     

由“广东肺炎事件”引发的思考

“广东肺炎事件”的妥善化解提示我们,政府今后为从容应对突发事件,一是应建立健全一整套完备的、可以迅速启动的危机处理机制;二是充分发挥媒体宣传与监督的功能,着眼于提升政府的凝聚力和公信力;三是强化公共服务职能,加大非常时期的执法力度;四是加强对公众危机意识的教育,提高其危机心理承受能力。     

从“抗疫”看经济治理的方法论

在新冠肺炎疫情对经济产生巨大冲击的背景下,研究经济治理的方法论有着重大意义:坚持经济治理质的规定性,把握经济制度的本质要求;学会用辩证思维分析经济治理中的各种关系,形成对复杂形势的科学判断;明晰经济政策、经济结构、治理方法等具体路径,切实将制度优势转化为治理效能。