猪德尔塔冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

针对猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的N基因建立检测PDCoV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,并验证了其特异性、敏感性和重复性等。结果显示,本方法特异性高,与猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪肠病毒、伪狂犬病病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪星状病毒等病原无交叉反应。本方法C_t值与标准模板浓度在10^8.5～10^3.5PFU/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数(R²)为0.994 9,直线方程为y=-3.594 9x+41.006,最低检测限为10^2.50PFU/mL。运用该方法检测PDCoV感染不同来源细胞系的病毒载量,发现的PDCoV感染宿主谱广,能感染不同来源的细胞,且在LLC-PK细胞上的复制能力最强。本研究建立的方法为PDCoV的防控提供了技术支持。     

抑制Caspase-1活化能减弱玉米赤霉烯酮诱导的猪小肠上皮细胞凋亡

为探究玉米赤霉烯酮（ZEA）对猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）毒性机制中细胞焦亡与凋亡间的关系,用不同质量浓度的ZEA(0、5、10、15μg/m L)处理细胞24 h以及ZEA(15μg/m L)与乙酰半胱氨酸（NAC,1 mmol/L）或Z-YVAD-FMK(10μmol/L)联合作用24 h。采用CCK-8法检测存活率;微板法测定细胞上清中乳酸脱氢酶（LDH）含量水平;免疫印迹检测剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Cleaved Caspase-1)蛋白水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和ELISA测定白细胞介素（IL）-18和IL-1β水平;流式细胞术检测活性氧（ROS）水平和细胞凋亡率;免疫荧光检测Caspase-3表达水平。结果显示,ZEA引起IPEC-J2细胞存活率降低和LDH含量升高,呈剂量依赖性（P<0.05,P<0.01）。与0μg/m L组比较,ZEA处理后细胞中剪切的Caspase-1、IL-18和IL-1β水平均明显升高（P<0.05,P<0.01）。NAC孵育显著降低了ZEA处理细胞的ROS水平、剪切的Caspase-1蛋白表达以...     

晨起后的第一杯水怎么喝?

早晨起床后,空腹喝一杯水是许多养生专家都很推崇的健康生活方式。晨起后的第一杯水因此也被称为"健康水"、"排毒水"、"美容水"。不过,这第一杯水怎么喝,不同的人会给出迥异的答案,仅喝什么水这个问题,白开水、蜂蜜水、淡盐水就都有各自的说法。至于其他有关第一杯水的说法更是五花八门。下面就为大家详细说说正确的喝法:有人主张早晨起来喝一杯淡盐水,实际上没多大意义现代人本身摄取的钠就过多,在身体不缺少盐的情况下再喝淡盐水,会增加无价值盐的摄入。研究表明,白开水中含有的钙、镁等矿物质对预防心     

猪γδ T淋巴细胞亚群的研究进展

在概述猪γδ T淋巴细胞亚群的发现、组织分布及其细胞所占比例的基础上,重点介绍了其基因结构与多样性以及细胞的功能和抗原识别的机制,以加深对猪天然免疫应答独特性的理解。     

探索中国特色社会主义政治经济学的理论起点

构建中国特色社会主义政治经济学理论体系面临的首要问题是合理确定理论阐释的起点。要解决这个问题，必须坚持马克思主义政治经济学中国化方向，从借鉴马克思确立《资本论》的理论起点，到分析当代马克思主义经济学家探索社会主义政治经济学的理论起点，最后以马克思主义政治经济学最新理论成果，即习近平新时代中国特色社会主义经济思想为引领。一方面，马克思的政治经济学是以资本主义的“经济细胞”作为理论阐释起点的，它蕴含着社会生产的各种规定，由此引发了马克思主义经济学者对社会主义“经济细胞”的探讨；另一方面，习近平新时代中国特色社会主义经济思想则确立了“人—物—人”的“人民逻辑”理论主线。借鉴马克思主义经济细胞学说，遵循习近平新时代中国特色社会主义经济思想的“人民立场”，可以发现，“为人民的劳动”是中国特色社会主义政治经济学的理论起点。     

大鼠皮肤切创愈合过程中Cygb及HIF-1α mRNA的表达

目的探讨皮肤切创愈合过程中Cygb及HIF-1αmRNA表达的相关性及时间变化规律。方法 60只健康雄性SD大鼠随机分为9个实验组和1个正常对照组,建立大鼠皮肤全层切创模型,实验组分别于术后0、1、3、6、12、24、48、72、96h脱颈处死大鼠,提取创周皮肤总RNA,采用实时荧光定量PCR技术检测Cygb及HIF-1αmRNA的表达,实验组与对照组及各组间进行比较分析。结果 Cygb与HIF-1αmRNA创伤后表达的总体变化趋势基本一致,均于伤后12h首次达峰,分别为对照组的1.6倍和5.4倍(P<0.05);随后下降,并分别于伤后48h、72h再次升高,至96h达对照组的2.8倍和5.6倍(P<0.05)。结论大鼠皮肤切创愈合过程中Cygb与HIF-1 mRNA的表达呈现时序性变化且有一定的相关性,可作为皮肤损伤时间推断的指标。     

牛轮状病毒VP7基因在昆虫细胞中的表达

利用PCR方法扩增出牛轮状病毒外衣壳蛋白VP7基因,经BamHⅠ+PstⅠ特异性酶切后,连接于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTA中,成功构建了重组质粒pFastBacHTA-VP7。该重组质粒转化含有杆状病毒穿梭载体的DH10BAC感受态细胞,经抗生素筛选和PCR筛选,获得转座的杆粒Bacmid-VP7。在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒,再感染细胞,收获目的蛋白,对表达的蛋白进行SDS-PAGE分析和Western-blot分析。结果显示,成功扩增了VP7基因,大小为981bp,所表达的重组蛋白大小为40.4ku,与预期值相符,该蛋白能与牛轮状病毒阳性血清发生特异性反应,具有较好的反应原性。此研究结果为进一步研发牛轮状病毒ELISA检测试剂盒奠定了物质基础。     

大鼠骨骼肌损伤后PMN、MNC及FBC百分率与损伤时间关系

目的：研究大鼠骨骼肌机械性损伤后不同时间点多形核白细胞（polymorphonuclear leucocytes , PMN）、单个核细胞（mononuclear cells,MNC）及成纤维样细胞（fibroblastic cells,FBC）百分率的变化。方法建立大鼠骨骼肌机械性损伤动物模型,随机分为伤后6h、12h、1d、3d、7d、10d、14d及正常对照组。应用HE染色法和图像分析检测大鼠骨骼肌损伤后不同时间点PMN、MNC及FBC百分率。结果伤后6~12 h,损伤区内可见PMN和MNC浸润,PMN百分率达到峰值;伤后1 d,损伤区内主要以MNC浸润为主,MNC百分率达到峰值,而PMN百分率开始下降;伤后3~7 d,FBC百分率开始逐渐增加,PMN和MNC百分率则逐渐下降;伤后10~14 d,FBC百分率达到峰值。结论大鼠骨骼肌损伤区内PMN、MNC及FBC百分率呈时间规律性变化,有望成为骨骼肌损伤时间推断的参考指标。     

培育好社区这个社会“小细胞”——访民政部部长李立国

料峭春寒中,民政部部长李立国挟一路风尘,结束了在云南的考察调研,赶回北京列席全国＂两会＂。今年春节过后,李立国部长参加了中央举办的＂省部级主要领导社会管理及其创新专题研讨班＂。开班式上,胡锦涛总书记在讲话中专门谈到了进一步加强和完善社会管理和服务体系问题,要求强化城乡社区自治和服务功能,健全新型社区管理和服务体制。在研讨班学习一结束,李立国部长就马上前往云南,考察调研城乡社区建设等民政工作。在全国＂两会＂现场,李立国部长同记者愉快地谈到了这次在云南昭通考察调研的印象。     

益气养阴法对中晚期非小细胞肺癌患者生活质量影响研究进展

中医学认为，中晚期肺癌的主要病机为气阴两虚，益气养阴法是治疗中晚期肺癌的主要方法。该法能够提高中晚期非小细胞肺癌患者的生活质量，如提高临床疗效，延长生存期，改善卡氏功能状态评分，降低中医证候评分，改善肺功能，增加体质量，改善食欲，提高免疫力及减轻化学治疗的不良反应。