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1.
口蹄疫病毒3D基因的真核表达及其表达产物的功能分析 总被引:5,自引:1,他引:4
利用RT-PCR技术扩增口蹄疫病毒(FMDV)编码RNA依赖的RNA聚合酶的3D基因,经测序确认后将其克隆到真核表达质粒载体pcDNA3.1( )中,重组质粒pcDNA3.1( )-3D经HindⅢ、XbaⅠ双酶切后转染至BHK-21细胞,用纯化的目的蛋白进行Western-blotting鉴定,并预测该3D基因表达产物的三级结构。结果显示,获得分子质量约55 ku的单一3D基因表达产物,其三级结构较为保守。利用RNA细胞内复制体系和荧光定量RT-PCR技术,证明3D基因表达产物在细胞内可促进口蹄疫病毒基因组的复制。 相似文献
2.
3.
4.
PRRSV和PCV2共感染对猪肺泡巨噬细胞CD80-CD86 mRNA转录的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
用猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与猪圆环病毒2型(PCV2)共感染40日龄健康大白仔猪,利用实时荧光定量PCR技术对共感染仔猪肺泡巨噬细胞(PAM)共刺激分子CD80-CD86的mRNA转录水平进行了定量分析。结果表明,在感染后第3 d和第7 d CD80与CD86 mRNA转录显著下调(P<0.05),感染后第14 d CD86 mRNA转录水平仍低于未感染对照组。尽管CD80 mRNA转录水平在第14 d和第28 d高于对照组,CD86 mRNA转录水平在第28 d高于对照组,两者在第42 d均高于对照组,但无显著差异。证实,PRRSV和PCV2共感染可导致猪肺泡巨噬细胞的共刺激分子CD80-CD86基因转录在感染早期明显受到抑制,PAM的抗原呈递能力受到影响。 相似文献
5.
沙门菌实时荧光定量PCR检测试剂盒的研制与应用 总被引:1,自引:0,他引:1
根据沙门菌保守的fimY基因序列设计合成了引物和TaqMan探针,建立了快速检测沙门茵的实时荧光定量方法,并对反应条件进行了优化,组装成快速检测试剂盒。通过对临床样品的检测,该试剂盒的检测灵敏度达4.5 CFU(25μL反应体系),比常规PCR高100倍,而且稳定性良好,至少可以冷冻保存9个月。结果表明,所建立的沙门菌实时荧光定量PCR检测试剂盒具有操作简便、快速、特异性强、灵敏度高、重复性好、稳定性强等优点,适于大量样品的检测。 相似文献
6.
紫外-可见及荧光光谱法鉴别印泥 总被引:3,自引:0,他引:3
鉴别印章真伪或印泥、印油材料是否相同,是侦破和证实经济犯罪的重要技术手段。鉴别印章所用印泥或印油材料是否相同的方法很多,但多为有损检验。本文采用紫外-可见反射光谱及荧光光谱分析法,利用导数光谱,对10个不同品牌的印泥所形成的12个印章样品进行了直接测试,根据被测样品的峰位和半峰宽度,区分鉴别不同牌号的印泥,取得了较好的结果。 相似文献
7.
打印机打印法变造文件在检验中按照确定变造事实、分析变造方法、确认被变造原文字三个步骤,综合运用透射光或侧光观察、荧光检验、综合评断等方法进行分析检验。现代化办公用品、设备在侦破犯罪案件上的运用,使得实际工作中文件检验的工作对象不断发展、变化,这对文检人员提出了新的要求,即要具备坚实的理论基础,又要在工作中不断积累、不断学习、不断总结,从理论和实践上寻找解决新问题的新方法、新手段,为侦破刑事案件、澄清法律事实,发挥更大作用。 相似文献
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9.
10.