6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析体系的构建

目的为在310基因分析仪上进行6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光STR复合扩增分型建立基础条件。方法以pGEM载体作为靶DNA,设计引物扩增获得500~80bp的13个长度不等DNA片段,以这些片段纯化物作为模板DNA,分别扩增获得6FAM、HEX、TMR和ROX标记的M atrix标准物,用4种M atrix标准物在310基因分析仪上构建可用于6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析的M atrix文件。结果扩增所得的13个非标记片段,长度分别为80、100、120、140、160、180、200、220、260、300、340、400、500bp,在非变性聚丙烯酰胺凝胶连续电泳-银染凝胶上均表现为单条带,6FAM、HEX、TMR、ROX分别标记的片段通过310基因分析仪检测均为单峰。混合ROX标记的80、120、180、220、260、300bp的6个片段获得的内标,显示出良好的线性关系。结论建立了有效的6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析M atrix,为进行多个STR基因座荧光标记复合扩增检测奠定了基础。     

绵羊骡马肿瘤间质构造的比较组织学观察

采集绵羊、骡、马肿瘤组织,通过石蜡切片的常规染色(HE染色)、胶原纤维染色(Masson三色染色法)和网状纤维染色(Gomori银染色法)技术,对腺瘤、腺癌、纤维瘤、纤维肉瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤和鳞状细胞癌的间质构造进行比较观察。结果显示,胶原纤维的走向和分布具有一定的特异性;网状纤维在鳞状细胞癌的癌巢周边较多,瘤细胞之间未见分布,但在纤维瘤、纤维肉瘤、平滑肌瘤和平滑肌肉瘤的瘤细胞之间均有分布;间质内毛细血管极少分化成熟。上述结果进一步明确了上述动物常见肿瘤间质的构成及其纤维和血管在分布、数量、染色特性和结构等方面的特点。     

FN-EIIIA肽段表达与皮肤损伤时间推断研究

目的 在mRNA研究的基础上,研究大鼠皮肤挫伤后含EIIIA□段的Fn蛋白水平表达与损伤时间关系。方法片段特异性单克隆抗体免疫组织化学染色。结果伤后6h表皮细胞、毛囊上皮细胞等出现棕黄色阳性染色颗粒,并随损伤时间延长染色加深。结论Fn-EIIIA片段检测可用于法医学生前伤确认和损伤时间推断。     

心肌及传导组织内3种蛋白的变化与SMDS的相关性

目的 观察心肌及传导组织内肌动蛋白、血浆白蛋白及纤维连接蛋白的染色变化，探讨青壮年猝死综合征(SMDS)死后诊断的新方法。方法 应用免疫组化S-P法，对SMDS及冠心病猝死者心肌及传导系统内肌动蛋白、血浆白蛋白和纤维连接蛋白的进行染色观察。结果 22例SMDS例猝死者心肌及传导系统内的肌动蛋白缺染17例；血浆白蛋白染色阳性18例；纤维连接蛋白染色阳性15例。并发现在SMDS中，8例有CCS严重病变。结论 心肌及传导系统内血浆蛋白、肌动蛋白改变与SMDS密切相关，部分SMDS病例死前存在早期心肌缺血或梗死的改变。     

波长色散X射线荧光光谱法检验纸张中的常量和微量元素

目的研究X射线荧光光谱元素分析法对常见纸张的鉴别能力。方法应用波长色散X射线荧光光谱仪对29个纸张样品中常量和微量元素进行了定性和定量分析。结果在样品量为mg级时,不但检出填料中常见的Si、Ca、Mg、Cl等主体元素,还能检出Al、S、P、K、Fe、Sr等10多种微量元素。结论用该方法既可对纸张的种类进行鉴别,对不同品牌的打印纸也有较好的区分。     

应用自制荧光抗体检测仔猪副伤寒

用兔抗猪伤寒沙门菌抗体自制荧光抗体对仔猪副伤寒进行了实验室诊断。结果表明 ,用自制荧光抗体在 2～ 3h内即可对仔猪副伤寒做出诊断 ,比直接镜检的特异性和敏感性均强。     

JX-2荧光显现法在血足迹显现中的应用

JX-2荧光显现法是针对各种血手印的一项显现技术，2003年公安部对该成果进行了推广。笔者在使用过程中，根据实际办案需要，对该方法进行改进，将试剂制作成试剂盒，即开即用，还可以长期保存，该方法在显现现场血手印方面已经取得了良好的效果和积累了一定的经验。     

大鼠实验性脑梗死早期CT值和GFAP表达变化的研究

目的探讨大鼠24h内实验性脑梗死CT值及脑内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化,以间接推测脑梗死的发生时间。方法参照Longa线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞脑梗死模型,在不同时相点进行头颅CT扫描,测量右侧脑梗死和左侧未梗死区脑组织的CT值并求出两侧的差值。同时用免疫组化检测脑内GFAP的表达变化。结果6h组大鼠CT平扫均有明确的脑梗死灶,梗死与非梗死两侧脑组织CT值的差值与梗死时间呈直线正相关,GFAP表达与梗死时间也有一定的相关性。结论血管栓塞引起的脑梗死最早于梗死发生后6h可以诊断,并可通过脑梗死与非梗死两侧CT值的差值计算及GFAP表达变化来推测脑梗死发生的时间。     

重庆市山羊博尔纳病病毒P24基因的检测

为了解重庆市山羊博尔纳病隐性带毒情况,分析博尔纳病病毒(BDV)的种系来源。采用巢式逆转录酶PCR结合荧光定量PCR(FQ-nRT-PCR)技术对重庆市60只山羊外周血单核细胞 (PBMCs)及脑组织中的BDV P24基因片段进行了检测,将阳性产物测序,并与国外BDV毒株进行了比较。结果,山羊外周血检测阳性率为8．3％(5／60),脑组织检测阳性率为10％(6／60)。该 BDV P24片段核苷酸序列与马源BDV H1766株同源性最高,达96．51％,与标准株Strain V和 He／80同源性为95．35％,并且编码的氨基酸序列也相同。表明,重庆市山羊中存在动物源性博尔纳病隐性带毒。该BDV P24核苷酸序列与Strain V和He／80株具有高度同源性。     

增强“502”显现潜手印的紫外荧光技术

本文对常规的“502”显出手印的荧光染色方法进行了改进,提出以1/10000罗丹明6G为染色主剂,以30％的三氯甲烷、乙醇混合剂为溶剂,以短波紫外线为激发源的紫外荧光技术。