福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的克隆及其原核表达

根据福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的序列,设计并合成了1对特异性引物,在引物的5'和3'端分别加入含有BamHⅠ和SalⅠ限制性酶切位点的序列,以福氏志贺菌2a菌株基因组DNA为模板扩增了marA基因序列.将PCR产物与pMD18-T载体连接,转化到大肠杆菌DH5α.鉴定成功获得目的片段后,经BamHⅠ+ SalⅠ双酶切并与载体pET-30a连接,构建原核表达质粒pET-30a-marA,并将其转化宿主菌BL21(DE3)pLys,用IPTG诱导其表达.SDS-PAGE分析表明,重组载体pET-30a-marA可成功地在大肠杆菌中表达MarA蛋白.Western-blotting检测证明,该蛋白能与志贺菌阳性血清发生特异性反应.     

王朝葡萄酒 健康 时尚 引领消费新潮流

近年来，随着人们饮食消费水平的日益提高，营养保健意识也不断增强，要求饮食能够促进身体健康，注重选择低脂肪、低糖、低热量、高蛋白的食品；注重选择具有低酒精度、低糖度，含丰富的氨基酸、维生素、无机盐的酒种。而王朝干红葡萄酒就属于这种类型。王朝干红葡萄酒采用世界名种解百纳红葡萄品种，以法国波尔多传统红葡萄酒工艺酿制而成。口味醇厚、绵长，柔顺适口；在食用烧烤煎炸肉类时，配以此酒最为适宜。     

法国农业如何实现跨越式发展

第二次世界大战后，法国农业飞速发展。目前法国农产品在国际市场上占据11％的份额，不仅牛肉、小麦、甜菜产量名列世界前茅，而且葡萄种植、酿酒和奶制品均享誉全球：法国农产品外贸盈余曾被法国人称为“绿色石油”。法国曾用农产品外贸盈余进口了其所需的石油；法国早在1979年便跃居欧洲第一、世界第二农业生产国和全球头号食品加工出口国。     

以菌攻菌：一种生物疗法

几个月持续的腹泻，使美国纽约的奥格登女士的身心痛苦不堪。她甚至对治愈腹泻有些失望了。最初，奥格登女士患结肠炎时，在医院接受了好几次抗生素静脉注射，她的结肠炎被治愈后，腹泻这一疾患又缠上了她，而且非常棘手，十分难治。她多方求医，无论是普通的抗生素还是贵重的抗生素都已使用了，数千美元已花掉，可是腹泻就是没有好转的迹象。     

伪狂犬病病毒闽A株糖蛋白gD基因去信号肽片段在大肠埃希氏菌中的表达

应用PCR方法从包含伪狂犬病病毒(PRV)Fa株糖蛋白gD基因的重组质粒pB13中扩增出糖蛋白gD基因去信号肽片段,将其克隆到大肠埃希氏菌表达载体pThiohisA中。测序结果表明,糖蛋白gD基因去信号肽片段长1 155 bp,与PRV Fa株糖蛋白gD基因完全一致。经1mmol/L IPTG诱导后,重组质粒pThiohisA-gD在大肠埃希氏菌XL1-blue、Top10、DE3和DH5α中均得到表达,其中在宿主菌XL1-blue中表达量最高。Western-blotting结果显示,大肠埃希氏菌XL1-blue表达的糖蛋白gD具有免疫原性。     

肉用畜禽最佳出栏期

一、先看看自己能种好什么。结构调整要在认识上走出“种什么好”的误区，首先必须解决我能“种好什么”的问题。同样是栽葱，口本农民从品种选育到不同时期都有一套严格规范的工艺，使得每棵小葱长短、粗细如同克隆一般；同样种葡萄他们不求多多益善，只求精益求精，一平方米，只允许长4串，每串400克，每颗粒重12克；同样产黄瓜，日本人要求瓜直，长度一致，颜色基本相同。     

金黄色葡萄球菌疫苗候选分子StbA主要抗原表位区的表达及重组蛋白抗血清的制备

通过生物信息学软件分析金黄色葡萄球菌转铁蛋白结合蛋白(StbA)的主要抗原表位区,PCR扩增StbA主要抗原表位区的编码序列;将该序列插入表达载体pGEX-4T-1中,测序验证后转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌能表达出分子质量约为54 000u的重组融合蛋白。表达产物经亲和层析纯化后可获得较高纯度的目的蛋白。Western-blot检测证实该重组蛋白能与乳腺炎患病奶牛恢复期血清发生阳性反应。ELISA结果显示,重组蛋白免疫新西兰大白兔能产生高效价的抗血清,提示StbA主要抗原表位区能刺激机体产生强大的免疫应答,StbA是一个有潜力的保护性抗原候选分子。     

检测987p+肠毒素性大肠埃希氏菌PCR方法的建立

以 98 7p菌毛结构基因保守序列为靶序列 ,设计合成了 1对可扩增 45 9bp目的片段的引物 ,建立了检测肠毒素性大肠埃希氏菌 987p菌毛基因的PCR方法。该方法对K 88 ( 为菌毛阳性 )、K 99 、F 41 参考菌株和链球菌、葡萄球菌、巴氏杆菌的检测结果均为阴性 ;该方法的敏感度可达 10 2 CFU ,对 2 0株腹泻仔猪粪便分离物进行检测 ,有 1株为阳性 ,与血清学检测的结果一致。结果表明 ,此方法特异性和敏感性都很高 ,可用于临床 987p肠毒素性大肠埃希氏菌病的快速诊断和流行病学调查     

鸭沙门菌的随机扩增多态性DNA分析

以5株同一血清型的鸭沙门菌为研究对象,分别提取基因组DNA后,用20条随机引物对其进行RAPD分析。结果,20条随机引物中不能扩出任何条带的引物有2条,能扩出条带但扩增图谱中没有特异性条带出现的引物有10条,能扩出条带且扩增图谱具有多态性的引物有8条。对筛选到的具有多态性的8条引物进行分析,共扩增出46个DNA片段,片段大小为0.2～3.2kb,其中5个菌株共有的片段有13条,显示多态性的片段有33条。     

菌威克对鸡大肠杆菌病的预防和治疗试验

用硫酸庆大霉素和硫酸黏杆菌素混合制剂菌威克对试验性鸡大肠杆菌病进行了预防与治疗试验。硫酸庆大霉素和硫酸黏杆菌素对鸡大肠埃希氏菌的最小抑菌浓度分别为 7.5× 10 - 4mg/L和 5 .9× 10 - 5mg/L ,最小杀菌浓度分别为 1.5× 10 - 3mg/L和 1.2× 10 - 4mg/L。在成本相近的情况下 ,以杀菌效果最佳比例配制的菌威克制剂的疗效要高于单独使用任何一种药物。预防与治疗试验结果表明 ,大剂量与中剂量菌威克对鸡大肠杆菌病的预防与治疗效果高于低剂量菌威克与单独应用硫酸庆大霉素和硫酸黏杆菌素的效果 (P <0 .0 5 )。