金黄色葡萄球菌黏附素FnBPB-ClFA共表达质粒的构建与原核表达

采用PCR方法对编码金黄色葡萄球菌纤黏蛋白B的D区和纤黏蛋白原凝集素A的A区基因片段进行了特异性扩增,并通过重叠延伸PCR扩增了FnBPB-ClFA串联基因,构建了克隆质粒pMD19-FnB-PB-ClFA。将该基因片段定向插入到原核表达载体pET-32a(+)中,构建了表达质粒pET-FnBPB-ClFA,并将其转入宿主菌BL21(DE3)。SDS-PAGE分析表明,在1mmol/L IPTG诱导下,在51ku处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带。Western-blot分析表明,所表达的蛋白与目的蛋白一致。上述结果表明,该融合基因在原核细胞中成功表达。     

金黄色葡萄球菌5型荚膜多糖偶联抗原的制备及免疫原性分析

为建立金黄色葡萄球菌5型荚膜多糖(CP5)纯化与偶联技术方法,获得具有免疫原性的CP5偶联抗原,采用高压破碎菌体的方法释放荚膜多糖,酶处理去除核酸和蛋白质,通过离子交换层析进一步纯化,得到纯化的CP5,并对其纯度和反应原性进行检测;采用己二酸二酰肼(ADH)间桥法制备CP5-牛血清白蛋白(CP5-BSA)偶联抗原,加佐剂免疫小鼠,进行抗体水平测定。结果表明,纯化的CP5纯度为675.1g/kg,经用免疫琼脂双扩散试验检测,纯化多糖仅与同型菌株抗血清发生沉淀反应,偶联抗原CP5-BSA可以刺激小鼠产生CP5免疫应答。此研究结果为奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌亚单位疫苗的研制提供了试验依据。     

桃柁酚对金黄色葡萄球菌生物膜及icaA表达的抑制作用

为研究桃柁酚对金黄色葡萄球菌生物膜及icaA表达的抑制作用,用微量肉汤稀释法测定桃柁酚对10株金黄色葡萄球菌浮游菌和生物膜的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度,并利用激光共聚焦显微镜观察桃柁酚抑制生物膜的情况;通过实时荧光定量RT-PCR技术检测桃柁酚对细菌生物膜形成过程中相关基因的水平变化;采用斑点免疫印迹法检测细胞间多糖黏附素在生物膜形成过程中的作用。结果显示,桃柁酚对金黄色葡萄球菌浮游菌和生物膜的最小抑菌浓度值范围分别为1～2μg/mL和4～16μg/mL;能杀灭和清除已形成的生物膜;桃柁酚可通过影响agr和sar调控系统,抑制细胞间多糖黏附素合成基因icaA的表达进而抑制细胞间多糖黏附素的合成。表明桃柁酚能有效抑制金黄色葡萄球菌浮游菌和生物膜,是一种抑制金黄色葡萄球菌生物膜的有效药物。     

减毒沙门菌递呈的猪传染性胃肠炎病毒S基因与猪IL-6基因双启动子DNA疫苗的构建

从猪传染性胃肠炎病毒克隆质粒pMD19T-S中扩增了2.1kb的S基因片段(含完整的A、B、C、D 4个抗原位点序列),以RT-PCR从猪外周血淋巴细胞中扩增了猪白细胞介素6(IL-6)(658bp),插入同一双启动子真核表达载体pVAXD的2个多克隆位点,构建了共表达S与IL-6基因的双启动子表达质粒pVAXD-S-IL-6,转染COS7细胞进行转录和表达鉴定。将质粒pVAXD-S-IL-6电转化减毒鼠伤寒沙门菌SL7207,筛选获得重组菌株SL7207(pVAXD-S-IL-6),并对重组菌株SL7207(pVAXD-S-IL-6)的体外稳定性和口服小鼠的安全性进行了鉴定。结果表明该双启动子真核表达质粒pVAXD-S-IL-6构建成功,RT-PCR检测到转染的COS-7细胞中2个目的基因的转录,间接免疫荧光试验结果显示表达产物可与猪抗猪传染性胃肠炎病毒血清发生特异性反应。重组菌株SL7207(pVAXD-S-IL-6)在含卡那霉素的抗性培养基中稳定性好,以1×109 CFU灌胃接种小鼠具有良好的安全性。本研究构建了猪传染性胃肠炎病毒的新型口服疫苗株SL7207(pVAXD-S-IL-6),为开展其免疫原性评价奠定了基础。     

化学杀菌剂处理气田回注水的应用研究

回注水管道中含有大量硫酸盐还原菌(SRB)、腐生菌(TGB)和铁细菌(FB)等,其生长、代谢和繁殖易引起金属管道腐蚀,影响正常生产.本文选取1号回注水,用化学杀菌剂进行处理.结果表明化学杀菌剂处理油田回注水的合适应用条件是:pH值为6.0-9.0;采用均匀式加药方式,投加量为30mg/L.     

柑桔守护人 葡萄开拓者——记广西农科院院长白先进研究员

正人物简介:白先进,男,回族,1956年4月出生,广西桂林人,无党派人士,长期从事柑桔无病良种繁育体系工作和南方葡萄栽培研究,2004年12月获研究员职称。2001年任广西农科院副院长,2005年任广西农业厅总农艺师。2012年11月至今任广西农科院院长,兼任第十二届全国政协委员、广西区十一届政协常委、广西统一战线专家百人团团长、国家葡萄     

产业拓宽致富路——双柏县大麦地镇热作产业开发的探索与实践

正热作产业是我省高原特色农业的重要组成部分。近年来,双柏县委、县政府紧紧围绕省委、省政府提出大力发展高原特色农业的部署,坚持"富民强县,关键在产业"的发展理念,打生态牌,走绿色路,发挥资原优势,集中力量在绿汁江流域大麦地镇进行热作开发,大力发展以葡萄产业为主的热带作物种植,有力地促进了农业增效、农民增收和农村经济持续健康协调发展。一、大麦地镇发展产业的基础条件大麦地镇位于双柏县东南部,绿汁江北岸,全镇辖区面积522.8平方公里。东与双柏县安龙堡乡毗邻,西与双柏县爱尼山乡接壤,北与双柏县妥     

张雪:谁说男儿不绣花?

正时光拉回十五年前的秋天,依然葱绿的苏州镇湖中心小学,弥漫着朗朗读书声。四年级童稚的声音正集体朗诵着边塞诗人王翰的《凉州词》。"葡萄美酒夜光杯,欲饮琵琶马上催。醉卧沙场君莫笑,古来征战几人回。"在很多人小男孩的观念中,男儿就该上战场浴血杀敌,建功立业,成为保家卫国的大英雄。孩子们努力着扬起头,提高嗓门,想要把这首诗读得更有感情、更有气势。角落里有一个不起眼的瘦小男孩儿也皱着眉头和大家一起     

张弼士创办张裕酿酒公司

来自南洋的企业家张弼士(1840—1916),名振勋,号肇燮,广东省大埔县西河镇黄堂村人。张弼士出生在一个贫穷家庭,小时候在父亲的私塾里读过三年书,后来当过放牛娃,干过竹工活。清代咸丰八年(1858年),张弼士背井离乡,奔赴南洋谋生,先后从事过     

趵突泉边品名吃

有着"天下第一泉"美誉的趵突泉是济南的象征。坐在趵突泉边品尝济南的名吃是人生不可多得的享受。多次出游到济南,在惊叹趵突泉壮观清洌的同时,也对济南的名吃回味无穷。济南名吃众多,"油旋"当居榜首。油旋是一种旋涡状的葱油小饼,外皮酥脆,内瓤柔嫩,葱香透鼻,因其形似螺旋,表面油润呈金黄色,故名"油旋"。吃油旋最好趁热,刚刚出炉的味