长白山中国林蛙基地探秘

在物产丰富的长白山国家级自然保护区的森林山泉之中,生存着一种稀有珍贵的野生药用动物,目前尚不为多数人所知,它就是“中国林蛙”。在人类进入新世纪的２００１年,中国政府为了推动中药现代化进程,决定在吉林省设立了国家重要现代科技产业基地亦称“国家北药基地”,并选址舒兰市首先建立了“中国林蛙无公害规范化养殖示范基地”。中国林蛙油,俗称哈士蟆,主要产于长白山区域ＲａｎａｔｅｍｐｏｒａｒｉａｃｈｅｎｓｉｎｅｎｓｉｓＤａｖｉｄ是我国一种重要的野生药用动物,名贵的山珍。中国林蛙油,民间亦称哈蟆油或田鸡油,为中国…     

鸡白喉型鸡痘的诊断与防制

西宁市某鸡场发生一种以喉头及气管前部被黄色干酪样物阻塞为主要特征的疫病,其症状及剖解病变极相似于传染性喉气管炎,1995-1997年年平均死亡率达21.24%.取自然病死鸡喉气管组织,用鸡胚、鸡胚成纤维细胞交替传代后,分离到1株病毒,经鉴定为鸡痘病毒;通过人工感染、疫苗筛选及现场应用,确诊为白喉型鸡痘.经用鸡痘疫苗控制了此病的流行.     

鸡马立克氏病肿瘤组织端粒酶活性的测定

用鸡马立克氏病病毒( MDV) 京1 株血毒对2 日龄SPF 鸡攻毒,40 d 后剖杀取部分内脏组织,一部分做病理切片,发现有肿瘤细胞浸润者判定为阳性;另一部分组织利用TRAP ( Telom eric repeat am plification protocol) 法进行端粒酶活性测定。结果发现有肿瘤细胞浸润的肾、肝、脾、神经、卵巢、精巢等组织细胞端粒酶活性非常高,且其阳性率与肿瘤细胞浸润的阳性率吻合。     

鸡有丝分裂染色体形态变化规律的研究

以鸡骨髓细胞为材料,获得了有丝分裂间期、早前期、前期、中期、后期和末期染色体不同形态的标本,展示了鸡染色体的形态变化规律,表明在有丝分裂前期染色体上做基因定位工作比中期染色体更为有利。同时观察了遗传物质随2 条染色单体分开而平均分配到新细胞中的情况。     

鸡淋巴细胞性白血病的病理学观察

应用尸体解剖和组织病理学切片观察的方法,对7例鸡淋巴细胞性白血病相关器官的病理变化进行了观察。结果显示,所检病例的多数组织为结节型变化,色灰白,无明显包膜,切面油脂状;但同一病例的不同器官变化类型并不一致,肿瘤结节大小不等。组织瘤细胞均由大小与形状相似的成淋巴细胞构成,多呈结节状膨胀性生长,偶见弥漫性浸润性生长;胶原纤维在肿瘤结节外围和内部均有分布,而网状纤维分布在结节周边;腔上囊肿瘤细胞仅局限于淋巴滤泡内增殖。上述研究结果为鉴别本病与马立克病提供了组织学依据。     

改善环境质量推动绿色发展旬阳县环保局“十二五”重点工作盘点

“十二五期间”,旬阳县环保局在上级党政部门的正确领导下,锐意进取,扎实工作,严格执法,各项重点工作都取得很好成绩,给党和人民交出了一份满意答卷.农村环境保护成效显著.围绕农村生活垃圾、生活污水和畜禽养殖污染治理等重点,在抓好示范、总结经验的同时,先后印发了相关文件,进一步加大投入力度、夯实措施、落实责任开展农村环境综合治理工作.     

鸡传染性支气管炎病毒陕西分离株M蛋白基因的变异及其B细胞表位稳定性

以陕西8株鸡传染性支气管炎病毒(AIBV)分离株M蛋白的基因序列为基础,应用DNAStar软件中的MegAlign模块对其进行了同源性分析;用Kyte-Doolittle方法、Jameson-Wolf方法、Karplus-Schulz方法、Plot-Emini方法和Garnier-Robson方法综合预测了其中4株代表毒株的M蛋白B细胞抗原表位和二级结构。结果,8株AIBV的M蛋白主要在10~40 aa和90~175 aa处存在无规律的点突变,与参考毒株H52、M41、SAIB20、LX和Gray的M蛋白的核苷酸序列和预测的氨基酸序列的同源性分别介于87.4%~99.5%和96.3%~99.5%;分离株间的核苷酸序列和预测的氨基酸序列同源性分别介于91.8%~99.8%和95.4%~100%。4株代表株的M蛋白B细胞优势抗原表位都在159~164 aa和181~193 aa肽段区(这2个区域都包含了无规则卷曲和β-转角结构)或其附近。结果表明,AIBV分离株的M蛋白基因相对保守,只存在无规律的点突变,该变异对AIBV M蛋白B细胞表位的稳定性无影响。     

鸡myostatin基因成熟区段DNA的克隆及其在甲醇酵母中的融合表达

根据GenBank中鸡myostatin(AF019621)成熟区段的cDNA序列设计了1对引物,利用PCR技术扩增了萧山鸡myostatin的成熟区段,构建了重组真核表达载体myostatin-pPIC9K,并在甲醇酵母中融合表达了myostatin蛋白。结果发现,萧山鸡myostatin基因存在2处碱基变异:T204→C204(编码的氨基酸没有变),C205→T205(编码的氨基酸由Pro变成Ser),从而产生了1个EspⅠ或Bpu1102Ⅰ限制性内切酶酶切位点。核苷酸序列同源性分析表明,myostatin基因成熟区段DNA在不同物种间具有高度的保守性。SDS-PAGE鉴定结果表明,表达的目的蛋白(26 ku)具有生物学活性。     

表达新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

采用荧光染料SYBR Green渗入法,通过对real-time PCR反应条件进行优化,建立了real-timePCR检测方法,用该方法定量分析新城疫病毒(NDV)F基因在重组鸡痘病毒(rFPV-F-VP0)第1、5、10、15、20代次中的表达整合情况。结果表明,建立的标准曲线呈现良好的重复性和特异性,与模板浓度呈现良好的线性关系。在线性浓度范围内,随着模板量的减少,其对应的Ct值相应增大,0.99<相关系数(r2)<1,0.8<扩增效率(E)<1.2,熔解曲线为单一特征峰型。本试验精确定量了外源基因在重组鸡痘病毒中的表达水平,为阐明重组鸡痘病毒的表达机理提供了理论基础。     

鸡传染性喉气管炎病毒中国王岗株糖蛋白gB基因克隆及鉴定

以ＰＵＣ１９质粒为载体构建了鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）ＥｃｏＲＩＤＮＡ文库。根据已经发表的澳大利亚ＩＬＴＶ－ＳＡ２株和英国ＩＬＴＶ－Ｖ８２２株的糖蛋白ｇＢ基因的核苷酸序列，设计并合成了一对引物，以ＩＬＴＶ中国王岗株ＤＮＡ为模板，扩增出１．３３８ｋｂ的糖蛋白ｇＢ基因片段，用ＤＩＧ标记制备成核酸探针，从ＩＬＴＶＥｃｏＲＩＤＮＡ文库中筛选出阳性重组子，得到一个ＥｃｏＲＩ３．０ｋｂ的ＩＬＴＶＤＮＡ片段。经酶切分析表明，该３．０ｋｂＩＬＴＶＤＮＡＥｃｏＲＩ片段含有完整的糖蛋白ｇＢ基因，经ＰＣＲ和核酸杂交表明所克隆的糖蛋白ｇＢ基因是特异的。