五色荧光标记20个基因座复合扩增体系及法医学应用

目的建立20个基因座五色荧光标记复合扩增检测体系,并评价其法医学应用价值。方法收集368份无关人血样及55份实际案例样本(包括血斑、体液斑、组织及毛发),采用五色荧光素标记技术,对Amelogenin和19个STR基因座(D19S433、D5S818、D21S11、D18S51、D6S1043、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、vWA、D8S1179、TPOX、Penta E、TH01、D12S391、D2S1338和FGA)进行基因型检测,并考察方法的一致性、灵敏度、种属特异性及检材适用性。结果本文五色荧光标记复合扩增检测体系可对所选20个基因座分型,结果稳定准确,且均衡性良好、无杂峰;群体调查显示累积个人识别率和累积非父排除率分别是0.999 999 999 999 999 999 999和0.999 999 99;灵敏度达125pg,种属特异性高,实际案例检材分型成功率高。结论本文五色荧光标记复合扩增检测体系各项指标可达到当前商品化试剂盒的检测水平,具有重要的法医学应用价值。     

精子细胞定向捕获与分离技术初步研究

目的探索并研究精子细胞定向捕获与分离技术,初步建立精子细胞特异性分离与DNA提取的方法与试剂体系。方法通过特异性定向捕获复合体（精子特异性抗体一磁性纳米微球）的制备,在一定的试剂体系环境下,实现精子细胞的定向捕获与分离。结果能够实现精子细胞的定向富集与分离,通过后续的提取过程,获得了高质量的DNA,并获得了相应的完整STR分型结果。     

联苯胺预试验处理血痕后样本DNA定量的研究

目的探讨联苯胺血痕预试验处理后样本DNA含量的变化及对STR分型检测的影响。方法选取10名无关个体EDTA抗凝血液制成滤纸血痕,保存干燥时间分0．5h、1h、3h、6h、12h、24h六个实验组,并采用磁珠提取法、QIAcubeDNA提取纯化法、chelex-100提取法提取样本DNA,应用RT-PCR定量技术检测样本DNA含量,同时应用PCR-STR技术和Idfiler-plus试剂盒检测相应样本STR分型。结果联苯胺血痕预试验后处理样本,随保存时间的延长,其样本DNA含量显示逐渐降低的趋势。回归线性对数分析显示,磁珠提取法：Y=-0．40871n（x）＋0．7044R0—0．7633;QIAcubeDNA提取纯化法：Y=-0．23931n（x）＋0．4764R0—0．8715;chelex-100提取法：Y=-0．11781n（x）＋0．2302R2=0．9571。不同DNA提取方法对同一保存时间的联苯胺血痕预试验试剂处理样本DNA含量间差异有极显著性,P〈O．01。结论联苯胺血痕预试验后对后续STR分型影响较大,联苯胺血痕预实验后的血痕不能继续进行STR分型检测。     

吸附性载体上微量血痕的DNA分型

目的研究吸附性载体上微量血痕的DNA提取及其检验。方法用Chelex-100法、QIAamp MiniKit、及QIAamp Mini Kit改良法提取吸附性载体上微量血痕中的DNA,进行PCR扩增及STR检验。结果采用Chelex-100法及QIAamp Mini Kit的分型成功率很低;采用QIAamp Mini Kit的改良法能较好的得到分型图谱。结论采用QIAamp Mini Kit的改良法能较好的提取吸附性载体上微量血痕的模板DNA。     

通过枣核上唾液斑的DNA检验侦破盗窃案1例

1案情简介 2011年11月25日,某区某局三楼办公室发生盗窃案,侦查人员在现场发现吃剩的枣核数枚,分别包装、送检。 2检验过程及结果使用＂双棉签技术＂[1]提取枣核表面的唾液斑,放入1.5 mL Eppendorf管,用QIAamp DNA Investigator试剂盒（德国Qiagen公司）抽提DNA：加入ATL缓冲液180μL、PK 20μL,振荡混匀,56℃保温2h以上;加入AL缓冲液200μL、载体RNA（Carrier-RNA）2μL,70℃保温10min，     

瓜子壳上人体脱落细胞DNA检验

<正>1案例资料1.1简要案情2012年12月13日,某镇一村民家被盗,经调查和现场勘验确认遗留在现场的大板瓜子壳为嫌疑人所留,提取该检材要求进行DNA检验。1.2 DNA检验送检瓜子壳多呈两瓣前端张开状态,分析应为进食者以手卡住大板瓜子用门牙所嗑。挑选状态基本一致的瓜子壳数个,剪取尖端,加入5%Chelex-100 120μL及蛋白酶K(20mg/m L)10μL;振荡后56℃孵育1h,     

葡萄皮DNA检验

葡萄皮作为较少见生物物证的一种,在犯罪现场时有发现并提取,由于葡萄皮上附有的人口腔脱落细胞DNA含量较低并存在多种PCR扩增抑制因素,荧光STR检测成功率较低。对在入室盗窃案现场发现的葡萄皮用骨骼裂解液裂解提取,并用QIAquickRPCR Purification Kit硅胶膜过柱法富集纯化DNA,获得理想STR分型结果并通过DNA数据库比中嫌疑人,从而通过对葡萄皮DNA的成功检验在案件侦破、诉讼中发挥重要作用。     

湖北土家族人群4个X-STR基因座遗传多态性

法医物证学；X-STR；遗传多态性；土家族；中国湖北     

Y染色体法医DNA检验策略

法医DNA检验在实际工作中发挥了重要作用,其中针对Y染色体进行的DNA检验,可以开展家系排查和辅助父系亲缘鉴定,为案件侦查提供重要线索。本文针对Y染色体DNA检验,讨论完整利用染色体具有的信息,制定整体检验策略,以期为相关研究和试剂盒开发研制提供参考。     

新疆和田地区维吾尔族人群18个STR基因座遗传多态性

本文使用DNATyperTM15 Plus试剂盒,对中国新疆和田地区维吾尔族300个健康无关个体进行18个常染色体STR基因座遗传多态性调查。结果 18个基因座共检出206个等位基因,其分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05)。基因频率分布在0.002~0.343之间,H值在0.68~0.91之间,DP值在0.812~0.986之间,PIC值在0.59~0.92之间。该系统在所调查的人群中具有较好识别能力。