单核增生李斯特菌的随机扩增多态DNA分型研究

通过优化反应条件和筛选随机引物，建立了单核增生李斯特菌的随机扩增的多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析方法。在１０条长为１０ｂｐ的随机组合引物介导下，经过低温（３５℃）扩增收集到的８株不同血清型的单核增生李斯特菌可产生稳定、复杂的ＰＣＲ指纹图。图谱经过ＰＨＹＬＩＰＳ软件分析，绘制出菌株的遗传聚类树图。８株单核增生李斯特菌可分成３个聚类群，其中两株血清型相同但遗传距离较远。试验结果表明，ＲＡＰＤ可作为微生物的基因分型方法。     

猪生殖与呼吸综合征病毒N基因的扩增与克隆

应用RT PCR方法扩增出猪生殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)的核衣壳蛋白基因 (N基因 ) ,并将其克隆到 pET 32a载体 ,构建了高效原核表达载体pETN。将 pETN重组质粒转化BL2 1(DE3)宿主菌后 ,对插入片段进行了序列测定及同源性分析。结果表明 ,插入片段序列与PRRSV美洲型ATCCVR2 332株的ORF7核苷酸序列同源性达 99.9% ,与分离毒株的同源性达 99.0 %。     

禽流感病毒GD/1/96株M基因在sf9昆虫细胞中的表达

从pUCM 1质粒中亚克隆禽流感病毒M基因至转移载体 pFastBac1质粒 ,PCR鉴定后 ,转化DH10 BAC感受态细胞。提取重组杆粒rBacM ,以M 13为通用引物作PCR分析 ,证明M基因已转入其中。用CellFectin试剂包裹rBacM杆粒转染sf9细胞 ,96h收取感染细胞。细胞表达产物裂解后作SDS PAGE蛋白电泳和Westernblot分析 ,证明M基因在昆虫细胞中成功表达且具有与天然M 1蛋白相似的活性。琼脂扩散试验结果进一步证明 ,重组M 1蛋白可作为诊断抗原。     

人类基因原材料提供者的权利定性及利益分享

人类已经进入基因时代,基因尤其是人类基因已经成为一项蕴涵极大财富的特殊资源。基因专利一方面给专利权人带来了巨大的经济利益,另一方面却又将基因原材料提供者置于不利地位。本文重点分析了基因原材料提供者应享有权利的种类,认为其应区别基因原材料的存在状态分别享有人格权和所有权,并应基于其提供给基因研究者的特殊物质参与基因专利的利益分享。本文还构建了基因原材料提供者处于国家统一保护之下,同时自己享有相应权利的参与利益分享的模式。     

基因资源知识产权保护中的权利滥用限制问题

一、问题的提出基因技术研究的快速发展及其初步显现出来的广阔应用前景,使得大多数科学家都认为21世纪将是以基因技术为基础的生物经济时代。随着人类基因组计划的巨大进展,生物基因工程已成为世人所关注的焦点,而从法律的角度来看,如何科学、合理地     

论人类基因提供者基因专利利益分享的法律基础模式

由于经济技术发展水平的限制，我国作为一个发展中国家，尽管已经成功地完成了人类基因组计划1％基因测序任务，但与其他5个参与国(美、英、德、日、法)相比较，我国的基因研究和开发利用还有一定差距。因此，在很多情况下，所谓的利益分享指向的往往是这些工业发达国家的研究机构或跨国公司，因而难以避免地带有某种程度的感情色彩。但是，感情固然表达了强烈的人文关怀，     

鸡传染性支气管炎病毒SC株S1基因的序列分析

用RT PCR扩增了鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)SC株S1基因 ,连接到 pMD 18 T载体上 ,克隆后进行了核酸序列分析 ,证实SC株S1基因与基因库中收录的国外毒株H12 0和M 4 1的同源性较低 ,分别为 81.1%和 80 .0 % ,而与国内JX990 1株的同源性达到 91.3% ,初步证实国内存在IBV新毒株。     

美日欧基因专利保护相关政策及其借鉴意义

专利有地域性的特点 ,但专利保护在各个国家却有着相似之处。各国的基因专利保护自然也是共性与个性兼具。他们的立法与实务、申请与审查制度等以及专利保护现状 ,对我国基因专利保护体系的建立和完善有一定的借鉴作用。     

西安汉人D1S80位点基因频率调查

利用PCR技术、小型聚丙烯酰胶凝胶电泳及银染法，检测D1S80位点的VNTR扩增片段长度多态性（Amp－FLP）。在175名无关的西安地区汉族人群中发现了22个等位基因，片段大小分布于320～750bp之间，频率分布为0．0057～03314，杂合度为82．3％，个人识别率（DP）为0.9588，非父排除率（EPP）为0．6704。对7个家系23名相关个体分析，证实DIS80位点的遗传符合孟德尔方式。已发现的64种基因型分布符合Hardg－Weinberg定律。     

禽多杀性巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H基因真核表达载体的构建

应用限制性内切酶BamHⅠ将片段ompH从重组质粒pMDT-omp H切下,非定向插入真核表达质粒pcDNA3中,经酶切分析、PCR鉴定及序列测定,证实成功构建了禽多杀性巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H基因的重组真核表达质粒pcDNA3-ompH。将重组表达质粒转染至 COS7 细胞,经RT-PCR、SDS-PAGE及Western-blotting检测,证明了外膜蛋白H基因获得了瞬时表达。