猪ERK6基因编码区的克隆及组织表达谱分析

利用RT-PCR方法扩增了猪ERK6基因编码区的序列,将扩增产物与pMD18-T载体连接,构建了重组质粒;重组质粒经PCR、酶切鉴定后进行测序;采用Northern杂交和半定量RT-PCR方法在猪不同部位骨骼肌中分析了ERK6基因转录本的个数、大小及组织表达谱。结果显示,所克隆的猪ERK6基因片段长1 113 bp,含有1个1 104 bp的开放阅读框(ORF),该ORF编码367个氨基酸;该基因与已报道的人ERK6基因核苷酸序列相似性为90%;猪ERK6基因在肌肉组织中只有一个转录本,大小约1.5 kb。此基因在骨骼肌中的表达量最高,心、子宫次之,卵巢最低;而在脂肪、胃、肝、脾、肺、肾、十二指肠和胰腺中未见表达。结果表明,猪ERK6基因与已报道的小鼠和人ERK6基因一样,主要在骨骼中特异表达。     

人大助推法治重庆

民众并不是法治的旁观者,而是法治的直接参与者。在法治建设的每一个进步之中,民众都以可贵的耐力与决心,维护自身权益,不懈追求正义,承担了法治所带来的所有阵痛。但是,民众是分散的个体,他需要一个民意表达的渠道,在中国,人民代表大会是国家的权力机关,人大代表是人民利益的代言人,人大及其常委会在制定立法计划、通过法律法规和法制宣传教育等方面,所做出的巨大贡献是有目共睹的。     

浅谈刑事影像数字化的重要性

1 刑事影像数字化的必要性 刑事影像,包括刑事照相、刑事录相和刑事图像处理,是刑事技术的重要组成部分,在揭露、证实和打击犯罪斗争中起着非常重要的作用。但是长期以来刑事影像工作一直沿用着古老、传统的方式、方法进行     

猪胸膜肺炎放线杆菌apxⅠA基因的克隆及其原核表达

参照GenBank上登录的猪胸膜肺炎放线杆菌血清5 型菌株(AF363361)的apxⅠA基因序列设计了1对特异性引物,用PCR法扩增apxⅠA基因,获得了3 069 bp的片段,将其克隆到pMD 18 T载体,经酶切、PCR鉴定和序列分析,表明克隆是成功的。再将长为1 149 bp的apxⅠA基因的部分片段(编码ApxⅠ的N 端的片段)插入到原核表达载体pET 28(a)中,构建了重组表达质粒pET apxⅠA,转化大肠埃希氏菌JM109(DE3),在IPTG 诱导下获得了高效表达,经SDS PAGE检测,证实表达产物大小约为41 ku。     

比例照相中成像大小的控制

为了测量、计算成像倍率及实物大小，在照相机上安装实时监测影像比例窗，可简便、快速地显示出被拍物成像的比例，并可及时进行调整以保证成像倍率的要求。     

健全和完善公民表达权的法律保障机制

党的十七大报告把"表达权"列为公民四权之一,并强调要依法保障,这对我国推进社会主义民主法治、构建和谐社会以及大力发展文化创新都具有非常重要的意义。然而,现行法律、法规以及司法资源对"表达权"的保护相对不足,因此,需要进一步健全和完善公民表达权的法律保障机制。     

完善利益表达机制 实现政民关系和谐

作为美好的生活理想和价值目标,和谐社会历来是人们追求的美好目标。“民康物阜”、“国泰民安”、“和为贵”、“政通人和”,是千百年来中国人对生存环境的追求和向往。但和谐社会不可能是无差别的、没有任何矛盾和问题的社会,而是一个有能力化解利益冲突,并由此实现利益大体均衡的社会。随着我国改革开放的强力推进和利益格局的调整,各种利益冲突层出不穷。因此,必须要有融洽和谐的利益表达机制作为沟通的桥梁,营造出和谐社会的宽松氛围。     

试论农民利益表达困境的成因

社会主义新农村的建设需要发挥广大农民群众的积极性,调动他们积极性的前提在于妥善处理好他们的利益关系。这就需要农民的利益表达的顺畅。目前他们的利益表达渠道单一、不畅,导致这一困境的成因,可概括为五点。即农民的个体因素、人代会利益表达功能的堵塞、村民自治存在的弊端、信访体制的局限性、农民利益表达的组织化程度低。     

柔嫩艾美球虫杨凌株表面抗原SAG10基因的克隆与原核表达

从柔嫩艾美球虫第二代裂殖子总RNA中扩增EtSAG10基因,与pGEM-T Easy载体连接后转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,扩增不含N端信号肽的编码序列,分别插入表达载体pET-32a( )和pMAL-c2X,转化至E.coliRosetta,以IPTG诱导表达。结果表明,pET-32a( )-EtSAG10在E.coliRosetta中的表达产物约占菌体总蛋白的43%,融合蛋白分子质量约为47 ku,以包涵体形式存在;而pMAL-c2X-EtSAG10在E.coliRosetta中表达的重组蛋白为可溶性,表达产物约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白分子质量约为69 ku。以表达的可溶性EtSAG10重组蛋白100μg/只肌肉注射免疫雏鸡,攻虫后以盲肠病变计分、盲肠卵囊数(OPG)、相对增重率和抗球虫指数(ACI)评价,免疫组相对盲肠卵囊产量为47.7%,抗球虫指数由86.79提高至152.13。提示,重组表达的EtSAG10可诱导雏鸡产生一定的抗球虫免疫保护。     

传染性支气管炎病毒TY1株结构蛋白基因部分片段的表达

根据已报道的传染性支气管炎病毒S基因序列设计了1对引物,利用从传染性支气管炎病毒TY1株中提取的RNA,经PCR扩增获得了300 bp的产物;序列测定与分析表明,所扩增产物是传染性支气管炎病毒结构蛋白基因的部分片段。将扩增片段插入pET32a构建表达载体,并于大肠埃希氏菌BL21中进行表达;结果表明,该片段在大肠埃希氏菌中成功表达,产物为30 ku、以可溶性形式存在的蛋白。Western-blotting分析表明,该蛋白可与传染性支气管炎病毒TY1株阳性血清发生反应。