微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP15/60基因的克隆与原核表达

提取微小隐孢子虫鼠基因型卵囊总RNA,用RT-PCR扩增微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP15/60基因并克隆到pMD18-T载体中.将鉴定正确的序列亚克隆于原核表达载体pET-28b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析,同时将重组蛋白免疫动物后检测血清抗体.结果显示,克隆的目的基因核苷酸序列与GenBank登录的序列的同源性为98.66%.目的基因在大肠杆菌中以可溶形式高效表达.表达的重组蛋白占菌体可溶性总蛋白的57.5%,纯化的重组蛋白纯度达95.2%.重组蛋白可被兔抗微小隐孢子虫血清特异性识别,用重组蛋白免疫3次后,兔血清特异性抗体达到较高水平.表明,该重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性.     

藏界新贵：影像收藏

1839年8月19日,法国画家达盖尔公布了他发明的“达盖尔银版摄影术”,世界上诞生了第一台可携式木箱照相机。之后的100多年,摄影技术对西方的艺术史产生了深远影响。一方面它成为绘画的辅助工具;另一方面,其表现形式为印象派、抽象派、立体派画家所借鉴,促进了绘画表现的多变。     

政工干部应具备的能力

良好的思维能力。新的历史条件下，要求政工干部思维敏捷而富有逻辑性。要具备良好的思维能力，首先．要具备独立思考能力。思想政治工作主要是做人的工作．政工干部常常要对一个人或一件事作出评价．或对一种行为作出选择。这就要求政工干部既要善于听取多方面的意见、集思广益，又不能犹豫不决、优柔寡断，应独立思考、多谋善断，拿出自己的主见。其次．要有逻辑思维能力。有的政工干部口头表达差，讲话哕嗦，费了半天劲，仍说不到点子上，讲不清问题，其关键原因就是缺乏思维的逻辑性。语言是思维的表达方式，有的人是心里有数不善于语言表达，有的人则是由于思维混乱而导致词不达意。     

太阳照常升起

姜文的新电影<太阳照常升起>媒体上评论很多了,多是批评的,这倒惹起我的兴趣去看看. 我看整部影片倒是很成功的表达了一个主题:爱,就是疯狂,就是病态.     

网络高清监控市场趋势渐猛 索尼机芯高层提前布局中国

网络高清是今后视频监控发展的一大趋势。如何实现从标清到高清的转变呢?索尼利用自身技术优势,做好了监控摄像机机芯从标清到高清产品的技术储备,并制订了2009年以标清为主导,高清为目标和为中国市场定制产品的营销策略,确保索尼机芯在中国市场保持两位数以上的年增长率。这是索尼日本影像传感器事业部总监井上良博、索尼中国专业系统集团副总裁裴健近日在海南省三亚市召开的索尼影像传感器经销商/客户会议上接受本刊记者采访时作上述表示的。     

猪瘟病毒E2基因主要抗原区原核表达载体的构建及表达

用RT PCR技术对猪瘟兔化弱毒C株、石门强毒株 (Shimen)、近期地方流行的属于第 1群毒株的新疆毒株 (XJ)和第 2群代表毒株甘肃临洮 (LT)株E2基因的主要抗原区进行扩增 ,均得到约 5 6 1bp的基因片段 ;经克隆测序及序列分析 ,该基因编码 187个氨基酸残基 ,预计蛋白分子质量为 2 1.7ku。将这 4个基因分别克隆到原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,经酶切、PCR扩增和测序分析确证其正确插入到表达载体中 ,阅读框是正确的 ,从而构建成重组表达载体。重组质粒转化至宿主菌BL2 1(DE3)中 ,用异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG )进行诱导表达 ,对表达的蛋白用SDS PAGE电泳、免疫印迹和薄层凝胶扫描分析。结果表明 ,E2基因的主要抗原区可以在大肠埃希氏菌中表达 ,表达的蛋白多以包涵体形式存在 ,表达产物的分子质量约为 5 0 .0ku ,与理论推测的分子质量一致 ;薄层凝胶扫描分析表明 ,表达蛋白约占菌体蛋白总量的 2 0 .1% ;免疫印迹结果证明 ,表达的E2蛋白可被猪瘟阳性血清所识别。     

利益表达：政党文化构建的价值解读

利益表达是政党的基本功能，也是解读政党文化建设价值的一个新视角。现代民主政治条件下，政党的和谐发展、政党意识的扩展以及政党的制度规范建设都是政党文化构建的基本内容，它们以利益表达为价值评判，阐释了政党文化建设的基本内涵。必须从政党意识社会化、制度规范创新和提高政党成员素质等方面入手，不断改善政党的利益表达功能，使社会主体利益通过政党得到全面而有效的表达。     

论和谐社会视域下利益表达机制的建构与完善

当前我国社会利益表达机制存在的缺陷主要表现为:利益群体力量不均衡,利益表达机会不均等,利益表达的影响力不平衡。完善利益表达机制是要使其达到利益表达主体地位平等化、利益表达渠道畅通无阻、利益表达方式理性化和法治化。而要达到这一目标,途径是加快利益集团的相对均衡发展,理性应对利益集团的政治影响以及提高政府的自主性和整合能力。     

构建和谐社会的公共利益表达机制

随着我国社会阶层的分化和利益格局的多元化,社会利益结构间的不同步性和不均衡性日益明显,利益矛盾日趋复杂;转型过程中公共利益表达机制的不足与缺失已成为制约建设和谐社会的瓶颈。构建畅通有序的公共利益表达机制,使各阶层之间的利益关系得到协调和规范,避免具有破坏性的利益表达方式,是党和政府代表人民根本利益,构建社会主义和谐社会的迫切需要。     

猪2型圆环病毒ORF1基因的克隆及表达

根据GenBank中猪圆环病毒 2型 (PCV 2 )的ORF1基因序列 ,设计合成了 1对引物 ,对PCV 2广东株 (GD)ORF1基因进行PCR扩增 ,将扩增的ORF1基因克隆入 pMD 18 T载体 ,获得的重组质粒命名为 pMD ORF1。将ORF1的KpnⅠ和XbaⅠ双酶切产物插入原核表达载体pBAD/ gⅢC得到重组子 ,命名为 pBAD/ gⅢ ORF1。序列分析表明 ,克隆的ORF1与德国分离株AF2 0 1897核苷酸序列的同源性高达 99.5 % ;与其他PCV 2株的核苷酸序列同源性为 92 .1%～99.9% ,推导的氨基酸序列同源性为 90 .2 %～ 99.5 %。同时 ,测序结果表明 ,克隆的ORF1准确插入了 pBAD/ gⅢC的多克隆位点 ,未改变读码框。用L 阿拉伯糖诱导表达 ,收集菌液进行SDS PAGE和Western blotting分析 ,结果表明PCV 2ORF1在pBAD/ gⅢC中获得了高效融合表达 ,其表达蛋白的分子质量约为 4 1ku。