堆型艾美球虫表面抗原基因cSZ1在大肠埃希氏菌中的表达

根据已克隆的堆型艾美球虫 (Eimeriaacervulina)广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的cDNA序列设计了特异性引物 ,用PCR方法扩增cSZ1的开放阅读框架 (ORF)后克隆至表达载体pET 32a( ) ,构建了重组表达质粒 pET 32a( ) cSZ1,并将其转化至大肠埃希氏菌BL2 1(DE3)。经IPTG诱导 ,获得了cSZ1重组抗原在大肠埃希氏菌中的高效表达 ,表达产物量可达菌体总蛋白的 9.3% ,融合蛋白的分子质量约为 4 0ku。重组菌诱导表达的产物经SDS PAGE后 ,用堆形艾美球虫感染鸡的超免疫血清进行免疫印迹分析 ,结果为阴性 ,提示cSZ1所编码的抗原可能主要是T细胞抗原表位     

政策顾问

培训费不从职工工资里扣针对目前有媒体报道的"我国拟提取职工工资1.5%-2.5%作为培训经费"的说法,人力资源和社会保障部有关负责人澄清,这是一种误读。国务院法制办发布的《职业技能培训和鉴定条例(征求意见稿)》的准确表达是,"用人单位应当按照职工工资总额的1.5%-2.5%提取职工教育培训经费,列入成本费用,依法在税前扣除",是指从用人单位生产经营过程中发生的经济利益中提取资金用于培训,不是从职工个人工资里扣钱。     

试论表达自由与政治转型的基本逻辑关系

学术界对民主政治与表达自由的关系研究已经颇为成熟,但对于政治转型与表达自由的基本逻辑关系研究却鲜有论及.文章认为政治转型是表达自由发生飞跃性发展的关键性因素;而表达自由对于养成公民精神和民主素养,避免转型成本破坏性浪费,促成民主制度萌芽发展方面作用极为明显.     

民意广场——说说你心中的“被时代”

"关注民生,传达民意"是人民论坛一以贯之的行为准则。互联网时代如何使民意诉求以更快捷的方式顺畅表达,是我们一直关注并致力于解决的重要问题。现《人民论坛》杂志民生民意栏目与人民论坛网独家合     

猪传染性胃肠炎病毒S基因A抗原位点序列的克隆与原核表达

将RT-PCR扩增的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因A抗原位点目的片段克隆、双酶切后连接于表达载体,经酶切、PCR和测序鉴定的阳性重组质粒转化BL21(DE3),用IPTG诱导,进行SDS-PAGE和Western-blotting分析,确定目的蛋白的原核表达情况和免疫特异性。结果显示,目的片段的大小为534bp,序列分析表明,该基因与其他TGEV相应基因具有很高的同源性;Western-blotting检测可见分子质量约43 ku的融合蛋白条带,表明,该蛋白具有良好的反应原性。     

光谱成像在物证检验中的初步实验研究

目的研究运用光谱成像技术进行物证形态检验的可能性和方法。方法比较相同条件下使用普通照相方法与光谱成像方法拍摄多种痕迹物证的效果。结果光谱成像检验的能力和效果都具有明显优势。结论光谱成像检验技术的出现使物证形态检验学的发展进入了一个崭新的阶段。     

茨城病毒VP7蛋白基因的克隆表达及间接ELISA方法的建立

采用RT-PCR方法扩增出了茨城病毒(IBAV)No.2株编码VP7蛋白的S7全长基因,并克隆入原核表达载体pET-28a( )中,在E.coliBL21中表达。经Western-blot检测,表达的重组VP7蛋白具有良好的反应原性。以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了检测IBAV血清抗体的间接ELISA方法。     

日语基础词汇的学习与场景教学

引入场景教学, 利用日语来表述词汇的使用场景和使用对象, 通过对话片断来展现 词汇在不同场景中的运用, 能够将词汇学习与日常表达紧密结合, 帮助学生在全面认知和理解词汇 意义的同时, 从容应对多种场景, 运用词汇进行准确表述。     

椎骨血管沟影误诊为外伤性椎体骨折1例

1案例资料陈某,男,15岁,学生。1998年12月8日与同学发生纠纷后,被同学父亲在后腰部踢了一脚,陈当即支撑不住,扶在铁门上。当天在当地医院检查诊断为“头部、腹部、腰部软组织挫伤”。由于腰部疼痛加剧,伤后第4d行CT检查示:“L1椎体Y字型骨裂骨折”(照片1),医院诊断为“第一腰椎压缩性骨折”,中国法医学杂志CH IN J FO R EN S IC M ED 2006年第21卷增刊法医以此鉴定为轻伤。后经调阅该CT片,伤后3个月复查CT,并咨询多位CT专家,确认“Y”形改变为椎体自身的血管沟影,排除骨折。2讨论椎体为圆柱形结构,主要由松质骨构成。垂直部分表…     

藏绵羊朊蛋白基因的原核表达

从藏绵羊全血中提取基因组总DNA,用所设计的引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白(PrPc)基因。测序分析表明,所克隆的羊PrPc基因片段大小为771 bp,包含了羊朊蛋白基因的完整编码区序列,其与国内外报道的序列基本相同。将目的基因与经EcoRⅠ和XhoⅠ酶切的载体pGEX-4T-1连接后转化宿主菌BL21(DE3),挑选重组阳性菌用IPTG诱导表达,收集不同培养时间的菌液进行SDS-PAGE和Western-blotting。结果表明,PrP基因在大肠杆菌中成功表达,并能被抗牛PrPc单抗4C11识别。凝胶薄层扫描结果显示,表达蛋白约占菌体总蛋白的30%~45%,目的蛋白以包涵体的形式存在,包涵体经变性裂解、纯化和复性后得到具有一定生物学活性的目的蛋白。