康复新液保留灌肠预防宫颈癌放疗后放射性肠炎临床研究

目的 观察康复新液保留灌肠预防宫颈癌放射治疗后放射性肠炎的临床疗效。方法 将110例宫颈癌患者按随机数字表法分为对照组和治疗组,每组55例。对照组进行单纯放射治疗,治疗组在放射治疗的同时予康复新液保留灌肠治疗,随访1年,观察和比较两组患者放射性肠炎的发生时间、放射性肠炎分级、严重程度、药物毒性和不良反应。结果 两组放射性肠炎发生时间比较,差异有统计学意义（P<0.05）;两组放射性肠炎分级比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,治疗组放射性肠炎严重程度明显轻于对照组;治疗组毒性及不良反应无明显增加。结论 康复新液保留灌肠能明显推迟宫颈癌放疗后放射性肠炎的发生时间,降低其发生率及严重程度,不增加毒性及不良反应。     

鸭肠炎病毒感染鸭肝酵母双杂交cDNA文库的构建

为构建应用于酵母双杂交系统的鸭肠炎病毒(DEV)感染鸭肝cDNA文库,利用Trizol法提取接种DEV GZ株病毒液5 d的鸭肝总RNA,利用cDNA合成试剂盒反转录合成双链cDNA,与pGADT7酵母表达载体连接,转化酵母受体菌Y187,以未经稀释、1∶10和1∶100比例稀释的菌液无菌接种于SD/-Leu缺陷型固体培养基,置于30℃培养3 d,随机挑取生长良好的酵母菌落进行菌落PCR,检测插入片段的大小。结果显示,获得的原始文库克隆总数为1.0×106CFU,随机选取23个克隆进行PCR检测,插入片段长度集中在0.5～1 kb之间。结果表明,构建的cDNA文库有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段。     

鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备

采用差速离心和蔗糖密度梯度离心法提纯鸭肠炎病毒 (DEV)鸭胚成纤维细胞适应毒 ,免疫BALB/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,经间接ELISA筛选 ,有限稀释法 3次克隆 ,获得了 2株稳定分泌DEV单克隆抗体的杂交瘤细胞株 1B6和 2G8。经鉴定 ,2株单克隆抗体分别为IgM和IgG1 亚类 ,腹水ELISA效价均达到 1∶1 0 7以上。以 2G8单抗腹水为材料 ,采用间接免疫荧光抗体技术对DEV标准毒感染的鸭胚成纤维细胞进行检测 ,结果表明 ,用该抗体可特异性检出接毒后 6h感染细胞中的DEV ,且感染后 4 8h免疫荧光强度最高 ,该单抗与细胞成分和鸭肝炎病毒无交叉反应。将杂交瘤细胞冻存 3和 6个月 ,复苏后仍能稳定分泌单克隆抗体     

犬冠状病毒压力灭活苗的制备与应用研究

使用静水压高压灭活的方法制备犬冠状病毒(CCV)蜂胶佐剂灭活苗,将此灭活苗免疫接种易感犬,同时以CCV甲醛灭活苗作对比试验.结果表明,CCV压力灭活苗安全可靠,其诱导试验犬产生中和抗体的能力明显高于该病毒的甲醛灭活苗,临床应用证明该灭活苗可以控制犬冠状病毒性肠炎的发生与流行.     

胞内劳森菌与猪增生性肠炎的研究进展

概述了致猪增生性肠炎的胞内劳森菌的病原特征,阐述了该病原在分离培养、诊断方法、防控措施以及我国的流行现状等方面的研究进展,包括组织学、免疫学、分子生物学等方面所取得的进展.     

水貂肠炎病毒疫苗株和野毒株PCR-RFLP鉴别方法的建立

为了建立水貂肠炎病毒(MEV)疫苗株与野毒株的鉴别检测方法,根据GenBank中的水貂肠炎病毒序列设计了1对引物,用来扩增包含水貂肠炎病毒NS1基因在内的2 013bp大小的片段。通过对国内疫苗毒MEVB株及其他细小病毒参考株的NS1基因序列比较发现,疫苗毒MEVB株NS1基因核苷酸1401位的碱基由T变为C,致使1399位～1404位的核苷酸构成由ATTGAT变异为ATCGAT,多了1个限制性内切酶ClaⅠ酶切位点,其他MEV分离毒株中均未出现此酶切位点。用特异性引物扩增出2 013bp的目的片段后,再用限制性内切酶ClaⅠ进行酶切分析,疫苗毒MEVB株被切割成1 404bp和609bp的2个片段,国内其他分离株均未出现上述片段。结果表明,所建立的PCR-RFLP方法可以区分疫苗毒MEVB株和野毒株。     

雏鹅新型病毒性肠炎病毒弱毒株的培育及其特性研究

应用在鸭胚成纤维细胞上连续传代的方法 ,获得了由雏鹅新型病毒性肠炎病毒强毒株(NGVEV CN株 )致弱的弱毒株 (CN4 0 株 )。该弱毒株TCID50 为 10 - 8.0 83,具有良好的安全性和稳定性 ,在易感 1日龄雏鹅连传 8代不返强。该弱毒具有良好的免疫原性 ,最小免疫剂量为 10 0 0 0TCID50 ,免疫后 3d产生部分免疫力 ,5d产生坚强免疫力。口服免疫效果最好 ,对雏鹅免疫期在30d以上。该弱毒株能够干扰强毒在雏鹅体内繁殖 ,进入鹅体后能够进行一定程度繁殖并排泄出体外 ,使同居雏鹅感染并获得一定程度免疫力。临床使用后可极显著降低雏鹅的死亡率。     

水貂肠炎病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

以抗水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)单克隆抗体为捕获抗体、兔抗MEV多克隆抗体为检测抗体,建立了MEV双抗体夹心ELISA检测方法。该方法用于MEV抗原的检测。经过试验,单克隆抗体的最适稀释度为1∶20,兔抗MEV多克隆抗体的最适稀释度为1∶3 200。用该ELISA方法分别检测MEV、水貂阿留申病病毒、犬瘟热病毒样品。结果表明,ELISA方法具有良好的特异性。用该ELISA和PCR同时检测158份临床样品,其中ELISA检测40份为阳性,PCR检测44份为阳性,该ELISA的特异性和敏感性分别为95.6%和79.5%,这2种方法的符合率为91.1%。该方法的建立为MEV的检测及水貂病毒性肠炎的流行病学调查提供了工具。     

DHV-Ⅰ和DEV双重荧光定量PCR方法的建立

为建立快速特异的能够鉴别诊断DHV-Ⅰ和DEV的荧光定量PCR方法,根据NCBI中Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭肠炎病毒的保守序列,采用Beacon Designer 7.5软件,设计了2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针.接着,对反应条件进行优化,验证其特异性及敏感性.结果,该方法特异性好,对鹅细小病毒、番鸭...     

肠炎清Ⅰ号合锡类散保留灌肠治疗湿热内蕴型溃疡性结肠炎15例

目的 观察肠炎清Ⅰ号保留灌肠治疗湿热内蕴型溃疡性结肠炎（ulcerative colitis, UC）的临床疗效及其对血清IL-8和IL-4影响。方法 将30例湿热内蕴型UC患者，随机分为治疗组与对照组，每组各15例，治疗组用肠炎清Ⅰ号加锡类散0.75 g，常规保留灌肠。对照组用锡类散0.75 g，保留灌肠。两组患者均每日口服奥沙拉秦3 g。临床观察两组治疗前后疾病活动指数（disease activity index, DAI）、电子结肠镜下黏膜病理变化、血清白介素8（interleukin8, IL8）和白介素4（interleukin4, IL4）含量变化。结果 治疗后治疗组DAI显著低于对照组（P<0.01）；电子结肠镜显示治疗组黏膜炎症的改善程度显著优于对照组（P<0.05）；治疗组血清IL-8水平的下降和IL-4水平的升高显著优于对照组（P<0.05，或P<0.01）。结论 肠炎清Ⅰ号合锡类散灌肠治疗UC疗效显著，下调IL-8水平和升高IL-4水平可能是其治疗UC的作用机制之一。