热休克蛋白70对大鼠脑干损伤诊断的免疫组织化学研究

为了解脑干在受到创伤后作为降解异常蛋白的分子伴侣（molecularchaperones）之一的热休克蛋白70（heatshockprotein70HSP70）在中枢神经系统的表达情况，用免疫组化法对Wistar大鼠脑干针刺损伤模型的HSP70在损伤前及损伤后1、3、6、12、24小时的中枢神经各区的表达数量、分布变化进行检测。在针刺后1小时脑组织HE染色尚无明显特异性改变的情况下，大脑及小脑内HSP7免疫活性阳性的血管内皮细胞、神经胶质细胞显著增加，在损伤灶局部周围出现HSP7I免疫活性阳性神经元细胞增多，伤后3小时该处HSP7阳性神经元数量显著多于伤前及同一时间点的其它处脑组织，伤后24小时HSP7阳性细胞依然广泛存在。脑干的外伤性损伤可导致脑组织的蛋白质结构发生改变，脑干局部HSP70阳性神经元数量增多可作为脑干损伤定位诊断的依据。     

实验性早期心肌缺血结蛋白的免疫组织化学研究

目的 探讨急性心肌缺血早期不同缺血时间心肌细胞内结蛋白的变化，为早期心肌梗死死后诊断提供新的方法。方法 建立大鼠急性心肌缺血模型，用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法研究心肌细胞内结蛋白的缺失情况。结果 正常心肌细胞结蛋白呈棕褐色阳性反应。急性心肌缺血１５ｍｉｎ，结蛋白即可在缺血区心肌呈小灶性缺染，随缺血时间延长，其缺染范围逐步扩大。结论 心肌细胞结蛋白在缺失是早期心肌缺血的极为敏感的指标，免疫组织化学染色法检     

高度特异的李斯特菌单抗试剂的研制及鉴定

以单核细胞增生李斯特菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ，ＬＭ）制备免疫原，应用淋巴细胞杂交瘤技术，建立了３株能稳定分泌抗单核细胞增生李斯特菌、无害李斯特菌和格氏李斯特菌的单克隆抗体的细胞系，分别是ＬＪ１０Ａ，ＬＭ１１和ＬＢ５，而与其余种的李斯特菌和属外细菌不发生交叉反应。３株单抗均为ＩｇＭ，所识别的抗原为菌体表面蛋白     

钱永健:我注定了继承家族血统

1952年生于纽约的钱永健是中国著名科学家钱学森的堂侄,现为美国科学院院士、医学院院士,美国加州大学圣迭戈分校化学及药理学两系教授.2008年诺贝尔化学奖于北京时间10月8日下午6时左右揭晓,瑞典皇家科学院宣布,美籍华裔科学家钱永健与日本科学家下村修、美国科学家马丁·沙尔菲分享2008年诺贝尔化学奖.……     

扬子鳄α型干扰素蛋白的原核表达和纯化及其多克隆抗体的制备

为了进一步研究扬子鳄IFN-α,构建原核表达载体pET32a-IFN,导入大肠杆菌表达系统后诱导表达,并纯化靶蛋白.使用纯化重组蛋白作为抗原,加入佐剂乳化后免疫3只雌性的6周龄BALB/c小鼠,免疫后第35天对小鼠采血分离血清并测定效价.结果显示,成功构建原核表达载体pET32a-IFN,Western-blot鉴定显...     

尸僵的法医学研究综述

尸僵(rigor mortis,cadaveric rigidity)是指人死后,各肌群发生僵硬并将关节固定而使尸体呈僵硬状态的现象,其发生主要是骨骼肌、心肌和不随意肌的肌动蛋白和肌凝蛋白的不可逆结合。尸僵作为重要的尸体现象之一,不仅是推断早期死亡时间的一个重要指标,而且还可以反映死亡发生时尸体的位置和姿势,对某些刑事案件的侦破有着举足轻重、不可替代的作用,故国内外学者对尸僵现象进行了大量的研究,本文主要对尸僵的发生机制、影响因素及法医学检测方法做一综述。     

脑络欣通对脑缺血再灌大鼠神经细胞凋亡率及NMDAR蛋白表达的影响

目的:研究脑络欣通对气虚血瘀脑缺血再灌注模型鼠神经细胞凋亡率及N 甲基 D 天冬氨酸受体(NMDAR)蛋白表达的影响.方法:采用饥饿、劳累、高脂饮食等多因素复制大鼠气虚血瘀模型,然后用线栓法阻断大鼠左侧大脑中动脉2 h再灌注6,24,72 h,复制局灶性脑缺血再灌注模型,用流式细胞仪和免疫组化法分别检测缺血半暗带神经细胞凋亡率和NMDAR蛋白表达.结果:与模型组比较,脑络欣通组神经细胞凋亡率和NMDAR蛋白表达显著减少(P＜0.01).结论:脑络欣通抑制NMDAR蛋白表达,是其抗脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的机制之一.     

肉鸡线粒体型硫氧还蛋白的原核表达及抗氧化特性评价

为了研究肉鸡线粒体型硫氧还蛋白(GgTrx2)的功能,提取肉鸡肝总RNA,经RT-PCR扩增去除信号肽序列的GgTrx2基因,构建原核表达载体pET-28a(+)-GgTrx2,转化入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;以Ni-NTA纯化重组蛋白并评价其活性;分析GgTrx2对脂多糖(LPS)诱导的鸡肝细胞氧化应激的影响。结果显示,构建的原核表达载体pET-28a(+)-GgTrx2在37℃经1.0mmol/L IPTG诱导4h蛋白表达效果最好,经Ni-NTA柱纯化后纯度达90%以上,质量浓度为5.0mg/mL。该重组蛋白具有较高的还原胰岛素二硫键的能力,并呈现浓度效应。抗氧化功能分析表明,GgTrx2预处理能显著降低LPS诱导的鸡肝细胞膜脂过氧化和保护抗氧化酶SOD和CAT的活性。结果表明,本研究原核表达的GgTrx2蛋白具有良好的生物学活性和抗氧化应激特性,为进一步阐明其生物学功能和用于治疗氧化应激性疾病奠定了基础。     

加味桑白皮汤对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者HMGB1、FIB的影响研究

目的加味桑白皮汤用药治疗对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、纤维蛋白原(FIB)的改善效果。方法选取COPD急性加重期组患者54例与健康对照组患者54例,给予COPD急性加重期组患者加味桑白皮汤用药治疗,抽取患者用药前后与健康对照组空腹肘静脉血,测定HMGB1、FIB,对比COPD急性加重期组治疗前后HMGB1、FIB变化,以及对比COPD急性加重期组治疗前后与健康对照组HMGB1、FIB测定结果。结果治疗前,COPD急性加重期组与健康对照组HMGB1、FIB测定结果对比(7.75±0.79 VS 5.52±0.65)ng/ml、(4.43±1.31 VS3.03±0.43)g/L,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗后,COPD急性加重期组与健康对照组HMGB1、FIB测定结果对比(5.60±0.15 VS 5.52±0.65)ng/ml、(3.11±0.67 VS 3.03±0.43)g/L,差异无统计学意义(P>0.05)。COPD急性加重期组治疗前后,HMGB1、FIB测定结果对比(7.75±0.79 VS 5.60±0.15)ng/ml、(4.43±1.31 VS 3.11±0.67)g/L,差异有统计学意义(P<0.01)。结论对比COPD急性加重期患者治疗前后与健康对照组患者HMGB1、FIB测定结果,加味桑白皮汤可使HMGB1、FIB水平下降,并趋近正常健康值。     

大鼠原发性脑干损伤后S100B和GFAP的表达变化

目的观察大鼠原发性脑干损伤后脑干组织中S100B、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillory acidic protein,GFAP)的表达变化,探讨其与脑干损伤时间的变化规律及在损伤中的作用机制。方法建立机械性打击脑干损伤动物模型,利用HE染色、Gless嗜银染色和SP免疫组织化学法观察脑干组织中S100B、GFAP在损伤后不同时间的表达,并应用图像分析技术对其进行统计学分析。结果 S100B阳性表达于伤后30 min开始增多,随时间延长逐渐升高,于24 h达到高峰后开始下降,并于72 h基本降至正常水平;GFAP阳性表达于伤后30 min开始升高,48 h达到高峰后开始下降,但仍高于对照组。结论原发性脑干损伤后S100B、GFAP的表达具有时间规律性,在原发性脑干损伤时间的推断及神经修复过程中具有一定的作用。