旋毛虫谷氨酸脱羧酶基因的原核表达及其活性研究

采用RT-PCR从旋毛虫中扩增出谷氨酸脱羧酶(TsGAD)基因全长,将其克隆到表达载体pET-30a(+)后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,应用比色法鉴定表达产物(rTsGAD)的酶活性,并用纯化的GAD蛋白制备多克隆抗体。结果显示,成功构建了重组质粒pET-30a(+)-TsGAD,经SDS-PAGE分析,rTsGAD蛋白的分子质量约为57ku。利用比色法测得粗提的rTsGAD具有酶活性,酶活力为1.5U。制备的多克隆抗体效价较高,可达1∶65 536。Western-blot分析结果显示,该多克隆抗体与TsGAD具有较强的反应性。结果表明,本试验成功原核表达了rTsGAD,并制备了多克隆抗体,为TsGAD定位以及进一步研究旋毛虫谷氨酸依赖型抗酸机制奠定了基础。     

不得不防的民间借贷风险

随着互联网金融的发展,民间借贷衍生出新的发展特点,出现P2P、以房养老、职业放贷等形态。从表面上看,合同双方并非民间借贷关系,但从本质上看,这些合同体现的是民间借贷关系。鉴于很多人分不清借贷关系与其他法律关系的异同之处,北京市海淀区人民法院的法官总结以往案件,揭开民间借贷的重重“面纱”,引导公众走出复杂合同中的法律关系误区。     

中国特色创新发展道路:从1.0版到4.0版

创新发展是决定"新常态"下中国经济发展速度、效能、可持续性的第一动力,又是"十三五"期间牵动经济社会发展全局的核心。如何推动实现创新发展?怎样如期实现建成创新型国家的战略目标?从创新发展规律的视角出发,提出跨越式发展的"5T+1"理论框架,并在此基础上,历史地梳理了新中国成立以来我国创新发展从1.0到4.0版的演变过程,以此分析它是如何使中国实现"技术追赶"、"信息追赶"、"知识追赶"、"经济追赶"的。文章前瞻地分析了"十三五"时期创新发展战略4.0版的目标、任务和重大工程,这将成为实现科技引领、推动全面创新的最大抓手,使中国科技实力、科技水平和创新能力再上新台阶。     

"互联网+教育"背景下翻转课堂教学模式探索

随着"互联网+"概念的提出,慕课、微课、翻转课堂等教育技术的应用将"互联网+教育"的融合推向纵深.作者在文中通过高职软件开发专业翻转课堂教学的实践,结合网络平台--世界大学城空间平台的应用,设计出了翻转课堂教学模式、翻转课堂教学组织流程,分析了实施翻转课堂教学模式的诸多因素.     

实验大鼠胃Kappa-阿片受体与死亡时间的相关性

目的研究实验大鼠餐后死亡不同时间段的胃主细胞Kappa-阿片受体(KOR)的表达变化。探讨其变化、表达规律与死亡时间(PMI)的相关性。方法实验雄性大鼠,随机分为对照组和实验组,进食后断颈处死后于不同时间提取组织检材,对组织进行免疫组织化学染色,采用图像分析软件测定阳性面积、积分光密度、平均光密度、平均灰度等参数,用SPSS统计软件对各参数与死亡时间的关系进行相关性分析。结果死后9d内的胃主细胞上Kappa-阿片受体随着死亡时间(PMI)的延长,其积分光密度和阳性面积与死亡时间(PMI)存在一定的相关回归关系。结论实验大鼠死后胃主细胞上Kappa-阿片受体的变化规律与死亡时间有相关性。     

大鼠脑损伤后EPO及其受体表达与损伤时间的关系

目的研究大鼠脑损伤后脑组织中促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)及其受体(erythropoietin receptor,EPOR)的表达与损伤时间的关系。方法 72只SD大鼠随机分为对照组(36只)、脑损伤组(36只),在建模后1、2、4、8、12、24 h每组各取6只大鼠处死,取挫伤部位脑组织,应用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测不同时间点EPO以及EPOR的mRNA表达和蛋白表达情况。结果伤后24h内,EPO及EPOR的表达随损伤时间的增加而呈上升趋势。EPO的mRNA及蛋白表达与损伤时间之间存在相关性,其相关系数分别为0.875、0.911(P0.05);EPOR的mRNA及蛋白表达与损伤时间之间存在相关性,其相关系数分别为0.936、0.905(P0.05)。结论大鼠颅脑损伤早期EPO及EPOR的表达呈逐步上升趋势,与损伤时间具有相关性,可以作为脑损伤时间推断的参考。     

完善我国行政损害赔偿范围的若干思考

我国行政损害的赔偿范围主要体现在国家赔偿法第2条至第5条。笔者试就我国行政损害赔偿范围中的几个主要问题进行剖析。     

基于J2EE的刑侦综合信息系统设计

公安刑侦信息化是公安“金盾工程”的重要环节,而刑侦综合信息系统是公安信息化建设的核心内容。基于J2EE架构的B/S模式的刑侦综合信息系统的开发应用能够充分发挥公安信息网络的效用,积极推动公安“科技强警”、“技术强侦”战略的实施,为公安机关海量数据采集、存储和利用提供分布式的、分级跨区域的解决方案。     

D4R在METH诱导小鼠成瘾中的调控作用研究

目的 探讨脑内多巴胺D4受体（dopamine D4 receptor, D4R）对小鼠甲基苯丙胺（methamphetaine,METH）成瘾行为学和分子生物学的影响,综合分析D4R在小鼠METH成瘾过程中的调控作用。方法 首先将C57BL/6小鼠随机分为生理盐水组（S组）、METH对照组（M组）和D4R配体干预组进行条件性位置偏爱（conditioned place preference, CPP）实验,分析D4R配体对METH成瘾小鼠CPP表达的影响;CPP测试结束后立即剥离所有小鼠的脑核团组织（前额叶皮质、伏隔核、海马和中脑腹侧被盖区）,提取RNA进行实时荧光定量PCR检测,分析METH成瘾小鼠各脑区D4R基因表达的差异性。结果 D4R配体对小鼠测试期总活动量无影响,但可以显著促进实验小鼠CPP的表达;METH成瘾小鼠各脑区内D4R mRNA表达水平与S组相比显著增加,D4R配体干预组实验小鼠各脑区D4R mRNA表达水平与M组相比显著降低。结论 本研究发现METH可导致成瘾小鼠相关脑区核团内D4R表达水平代偿性升高,D4R在METH成瘾过程中发挥重要作用。D4R激动剂和拮抗剂...