猪圆环病毒2型ORF2基因插入猪细小病毒VP2基因3'端对病毒样颗粒形成的影响

以猪细小病毒(PPV)四川分离株SC-1的VP2基因3'端为靶点,在第1215和1216位之间插入长约700 bp的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因片段,将重组后的PPV VP2-PCV2 ORF2克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,构建了重组质粒pEGFP.VO;经酶切和PCR鉴定后,采用脂质体介导法将重组质粒pEGFP.VO转染COS-7细胞,应用倒置荧光显微镜、电镜、免疫荧光以及生物信息学技术对表达产物进行观察分析.结果显示,重组质粒pEGFP.VO在COS-7细胞中得到表达,但在电镜下没有观察到病毒样颗粒.通过对PPV衣壳蛋白的三维结构分析及免疫荧光检测发现,PCV2 ORF2基因的插入位点位于PPVVP2基因的3'端,相应表达产物则位于VP2蛋白多肽的C端,且被其包裹在内,这可能影响了病毒样颗粒的形成,表明,PPV VP2基因3'端不适合外源基因插入构建重组病毒样颗粒.     

蛛网膜颗粒压迹误诊致医疗纠纷1例

1案例 1.1简要案情 胡某,男,10岁,某年3月20日,因自觉左额顶部包块就诊于某医学院附属医院。同年3月28日行＂左顶骨病变切除术＂,术后病理检验结果示未见明显异常。     

稳心颗粒对冠心病QT间期离散度影响的Meta分析

目的 运用Meta分析系统性评价稳心颗粒对冠心病QT间期离散度的影响。方法 通过计算机检索中国知网、万方数据库、维普数据库及PubMed自建库至2015年6月公开发表的关于稳心颗粒对冠心病QT间期离散度影响的临床随机对照试验,运用RevMan5.3.3软件进行Meta分析。结果 共纳入12个随机对照试验,共892例,其Jadad评分均为1～2分。Meta分析结果显示,稳心颗粒可显著降低QT间期离散度（WMD=-9.77,95% CI为-11.70～-7.85, P<0.000 01） 及校正后QT间期离散度（WMD=-7.79,95% CI为-9.98～-5.60, P<0.000 01）。 结论 稳心颗粒可显著降低QT间期离散度及校正后QT间期离散度,尚需大样本、高质量、双盲的随机对照研究加以验证。     

活血通脉颗粒对真性红细胞增多症患者血栓弹力图K值的影响

目的 观察活血通脉颗粒治疗真性红细胞增多症（polycythemia vera,PV）的临床疗效,及其对血栓弹力图K值的影响。方法 随机将60例PV患者分为试验组、对照组各30例。对照组给予西药羟基脲治疗;试验组在对照组的基础上加用活血通脉颗粒。治疗6个月后,观察和比较两组PV患者临床疗效、中医证候评分、外周血象及血栓弹力图K值。结果 两组患者临床疗效分布比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;两组患者治疗后证候评分均较治疗前显著降低（P＜0.05）,试验组治疗前后中医证候评分差值显著大于对照组（P＜0.05）;两组治疗后血常规各项指标均较治疗前显著降低（P＜0.05）,试验组治疗前后血小板计数差值显著大于对照组（P＜0.05）;两组患者治疗后血栓弹力图K值均较治疗前显著升高（P＜0.05）,试验组升高至正常值范围,其升高值显著大于对照组（P＜0.05）。结论 活血通脉颗粒可明显改善PV患者中医证候及外周血象,并通过诱导血小板表面受体表达,改善PV患者凝血功能。     

超高液相色谱法测定桔梗饮片和桔梗配方颗粒中桔梗皂苷D含量

目的 采用超高效液相色谱法建立桔梗饮片及桔梗配方颗粒中桔梗皂苷D的含量测量方法,为桔梗配方颗粒的质量控制提供实验依据。 方法 采用Waters Acquity UPLC HSS T3柱（2.1 mm×50 mm,μm）,以乙腈和水为流动相,梯度洗脱,流速 0.25 mL/min,检测波长210 nm,柱温29 ℃。 结果 桔梗皂苷D进样量在0.504~2.520 μg范围内与峰面积的线性关系良好,平均加样回收率为99.89%,RSD为1.64%;桔梗饮片和桔梗配方颗粒中桔梗皂苷D的含量具有差异。 结论 本实验所建立的测定方法简便、准确、可靠,可用于桔梗饮片和桔梗配方颗粒中桔梗皂苷D含量的检测。     

针刀骨减压合消痹颗粒治疗膝关节骨性关节炎46例

目的 观察针刀骨减压联合中药内服治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法 将92例膝关节骨性关节炎患者随机分为治疗组和对照组,每组各46例,治疗组予以骨减压联合消痹颗粒内服,对照组予以关节腔注射玻璃酸钠注射液。治疗5周后,观察并比较两组的临床疗效,并采用膝关节骨性关节炎症状分级量化评分、西安大略和麦克马斯特大学骨性关节炎指数（Western Ontario and McMaster Universities osteoarthritis index,WOMAC）和简式McGill疼痛问卷（short-form McGill pain questionnaire, SF-MPQ）评价两组的疗效。结果 治疗组总体临床疗效显著优于对照组(P＜0.05),治疗组在降低膝关节骨性关节炎症状评分、WOMAC评分和SF-MPQ各维度评分方面显著优于对照组(P＜0.05,或P＜0.01)。结论 针刀骨减压联合中药内服治疗膝关节骨性关节炎疗效显著,可改善症状、减轻疼痛、提高患者生活质量。     

生血宝颗粒中何首乌苷的含量测定

目的 测定生血宝颗粒中何首乌苷（2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷）的含量。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent HC-C18(4.6 mm×250 mm×5 μm）;流动相为乙腈-水（18∶82）;流速为1.0 ml/min,检测波长为320 nm。 结果 何首乌苷进样量在3.580～114.5 μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 94,n=6）,RSD=1.3%;平均回收率为100.3%,RSD=1.76%。结论 高效液相色谱法简便易行,结果可靠,可有效地控制生血宝颗粒的质量。     

参芪平喘颗粒治疗慢性阻塞性肺病缓解期疗效观察

目的 观察参芪平喘颗粒治疗慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease, COPD）缓解期的疗效。方法 共纳入41例缓解期COPD患者,在解痉平喘治疗的基础上,加服参芪平喘颗粒,3个月为1个疗程,共治疗3个疗程。观察治疗前后肺功能严重程度分级、ABCD分级、6 min步行距离的变化。结果 治疗9个月后,COPD患者肺功能严重程度分级和ABCD分级均无显著变化;肺功能Ⅲ级、Ⅳ级患者治疗后6 min步行距离较治疗前显著提高（P＜0.05）。结论 参芪平喘颗粒能够提高缓解期COPD患者的生活质量,ABCD分级系统较肺功能严重程度分级更适合COPD患者病情的评估。     

莪连颗粒治疗慢性萎缩性胃炎临床疗效观察

目的观察莪连颗粒治疗慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)的临床疗效。方法将60例CAG患者随机分为治疗组和对照组,每组30例,分别给予莪连颗粒、胃复春治疗,疗程均为6个月。观察并比较两组临床症状总积分的变化,以及单个症状疗效和胃黏膜萎缩、肠腺化生、慢性炎症的疗效。结果两组治疗后症状总积分均较治疗前显著降低(P0.01);两组治疗前后症状总积分差值比较,差异无统计学意义(P0.05)。在胃脘疼痛、胃脘痞闷、疲乏方面,以及在胃黏膜肠腺化生和胃黏膜萎缩方面,治疗组的疗效显著优于对照组(P0.05,或P0.01)。结论莪连颗粒能有效改善CAG患者的临床症状及胃黏膜的慢性炎症、萎缩、肠腺化生。     

参地颗粒对膜性肾病大鼠肾脏内质网应激及足细胞自噬的干预作用

目的 观察参地颗粒对阳离子化牛血清白蛋白（cationic bovine serum albumin,C BSA）诱导的肾炎大鼠肾脏内质网应激及足细胞自噬标志蛋白的干预作用。方法 将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、参地颗粒组、缬沙坦组,每组10只。参地颗粒组每日给予参地颗粒水溶液4.0 g/kg灌胃,缬沙坦组每日给予缬沙坦胶囊混悬液20 mg/kg灌胃,正常组、模型组予生理盐水灌胃,比色法检测各组大鼠24 h尿蛋白（24 hour urine protein,24hUPro）含量,Western blot法检测肾脏中葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78,GRP78)、人内质网应激相关蛋白（human endoplasmic reticulum stress related protein,CHOP）、Nephrin、Podocalyxin、Beclin1、微管相关蛋白轻链3（microtubule associated protein light chain 3,LC3) Ⅱ/LC3 Ⅰ蛋白表达水平。透射电子显微镜观察各组大鼠肾组织肾小球损伤情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠24hUPro显著升高（P＜0.05）,肾组织中GRP78、CHOP、Beclin1蛋白相对表达水平和LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值均显著增加,Nephrin、Podocalyxin蛋白相对表达水平显著减少（P＜0.05）。与模型组比较,参地颗粒组和缬沙坦组大鼠24hUpro含量显著降低（P＜0.05）,肾组织中GRP78、CHOP表达水平均显著降低,而Nephrin和Podocalyxin表达水平则显著升高（P＜0.05）;参地颗粒组Beclin1表达水平、LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值与模型组比较也进一步增加（P＜0.05）,而缬沙坦组增加不够显著（P＞0.05）;且参地颗粒组GRP78、CHOP、Podocalyxin、Beclin1表达水平和LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值变化均显著优于缬沙坦组（P＜0.05）。结论 C BSA肾炎大鼠出现内质网应激反应增强及足细胞损伤,而足细胞自噬活性也增强;参地颗粒能够通过增强自噬活性,减轻内质网应激所介导的足细胞损伤,进而降低C BSA肾炎大鼠尿蛋白水平。