表达新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

采用荧光染料SYBR Green渗入法,通过对real-time PCR反应条件进行优化,建立了real-timePCR检测方法,用该方法定量分析新城疫病毒(NDV)F基因在重组鸡痘病毒(rFPV-F-VP0)第1、5、10、15、20代次中的表达整合情况。结果表明,建立的标准曲线呈现良好的重复性和特异性,与模板浓度呈现良好的线性关系。在线性浓度范围内,随着模板量的减少,其对应的Ct值相应增大,0.99<相关系数(r2)<1,0.8<扩增效率(E)<1.2,熔解曲线为单一特征峰型。本试验精确定量了外源基因在重组鸡痘病毒中的表达水平,为阐明重组鸡痘病毒的表达机理提供了理论基础。     

鸡TLR2信号通路中相关分子mRNA实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

为建立鸡Toll样受体2(ChTLR2)信号通路中相关分子的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank中TLR2信号通路中的5种相关分子即ChTLR2-1,ChTLR2-2,ChTLR6,鸡骨髓分化蛋白88(ChMyD88)及鸡核因子κB(ChNF-κB)基因序列,以鸡3-磷酸甘油脱氢酶(ChGAPDH)基因为参考基因,设计特异引物扩增目的基因片段。将6种基因克隆至pMD8-T载体后得到各自的阳性克隆质粒,以6种阳性质粒为标准品建立了标准曲线并进行熔解曲线分析以及灵敏性、特异性和重复性试验分析。应用建立的方法对堆形艾美耳球虫核酸疫苗pcDNA/Ea3-1E免疫SPF雏鸡脾中ChMyD88和ChNF-κB mRNA的转录水平进行检测。结果显示,当标准品稀释度为1×102～1×1010copies/μL时,6种基因Ct值与浓度间具有良好的线性关系,相关系数均大于0.995。熔解曲线分析表明,产物为特异性单峰且重复性较好。免疫雏鸡脾中ChMyD88和ChNF-κB mRNA转录水平的检测结果表明,免疫组2种分子mRNA转录水平均极显著高于空白对照组(P<0.01)。本研究为ChTLR...     

REV感染的SPF鸡免疫器官中免疫相关因子动态变化的研究

先天性免疫反应是机体抵御病原微生物感染的第一道防线.为了解禽网状内皮组织增生症病毒(REV)感染的SPF鸡早期的天然免疫反应,本研究利用qRT-PCR技术检测了REV感染的SPF鸡主要免疫器官中的免疫应答情况.结果 显示,与病毒未感染组相比,感染鸡免疫器官中天然免疫受体TLR3和TLR7和Ⅱ型干扰素IFN-γ以及Vip...     

三种鸡细胞因子mRNA实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

为建立鸡细胞因子SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank中三种重要的鸡细胞因子即ChIL-12、ChIL-15、ChIL-18的基因序列,以鸡3-磷酸甘油脱氢酶(ChGAPDH)基因为内参,设计特异引物扩增目的基因。将四种基因克隆至pMD18-T载体上,得到各自阳性克隆质粒,以四种阳性质粒为标准品建立标准曲线并进行熔解曲线分析以及灵敏性、特异性和重复性试验。结果显示,当标准品稀释度为1×102～1×1010 copies/μL时,四种基因的Ct值与浓度间具有良好的线性关系,相关系数均大于0.985。熔解曲线分析表明,产物为特异性单峰且重复性较好。应用建立的方法对堆型艾美耳球虫核酸疫苗pcDNA-Ea3-1E免疫的SPF雏鸡脾中ChIL-12mRNA和ChIL-18 mRNA的相对表达量进行检测,免疫组ChIL-12mRNA和ChIL-18mRNA的相对表达量均极显著高于空白对照组(P<0.01)。研究结果为ChIL-12、ChIL-15、ChIL-18的定量分析提供了技术平台。     

一些“心灵鸡汤”不准确

鱼的记忆只有7秒常听的版本鱼的记忆只有7秒,7秒之后它就不会记得曾经的事情了,一切又都会变成崭新的开始。事情是这样的几乎所有关于鱼类记忆的研究都表明,鱼的记忆远不止7秒。1965年,美国密歇根大学的研究人员做了一个实验。他们把金鱼放在一个鱼缸里,然后在鱼缸的一端射出一道亮光。     

用间接ELISA法检测鸡痘病毒抗体的研究

建立了检测鸡痘病毒抗体的间接ELISA方法 ,用该法检测 2 0份人工感染鸡血清样品 ,抗体阳性率为 10 0 % ,康复期鸡群血清抗体阳性率为 4 3% ,人工接种弱毒疫苗 6 5d和 170d鸡群血清抗体的阳性率分别为 6 0 %、70 %。经反复试验 ,确定了诊断抗原的制备方法和间接ELISA检测鸡痘抗体的最佳反应条件 ,即抗原包被浓度 10 .8μg/孔 ,待测血清最佳稀释度为 1∶10 0。     

儿时的乡音——吹鸡

吹鸡是20世纪80年代以前广泛流行于云南昆明、昭通、红河等地民间的一种泥塑焙烧或阴干的泥土玩具,外形如鸡及其他各种动物和物品造型,内有空腔,头尾有哨孔（吹孔和气孔）,因能吹出咕咕的声音,又被叫做泥叫叫、泥咕咕。建水县碗窑村烧制的土陶吹鸡较为知名,尤其以延续至第七代家传的民间艺人邹荣珍所制备受推崇,题材以十二生肖为主,还有小绣花鞋、小花瓶、小香炉等款式,形象憨厚可爱,显现出拙朴的稚趣。     

受贿就像“小鸡啄米”一样

“刘兆义每次受贿数额并不大,但却像‘小鸡啄米’一样,具有连续性、经常性。”今年1月7日,吉林省长春市检察院办案检察官在剖析长春市二道区建设局原局长刘兆义案时这样说。在位8年,收受贿赂800余万元,刘兆义案在一定程度上反映了个别基层干部腐败的特点。     

全营养新观念辨析

<正>土鸡蛋更营养吗去超市、农贸市场买鸡蛋时,一般有两种鸡蛋:柴鸡蛋和普通饲养鸡蛋。消费者往往认为柴鸡蛋的营养价值更高。其实,从营养价值来说,柴鸡蛋的脂肪含量较鸡场蛋高约1%左右,胆固醇含量也较高,不饱和脂肪酸含量无显著差异。相反,鸡场饲养鸡的鸡蛋维生素和矿物质等营养素含量略高于柴鸡蛋。鸡蛋的营养品质,取决于饲料的配方,而与是否散养没有直接关系。柴鸡和笼养鸡的营养价值没有很大差异。     

特色养殖让农民有了“新奔头”

近日,笔者一行来到了同德县巴沟乡下阿格村珍珠鸡养殖点,只见周围树林茂密,灌木林多,一群形似孔雀,全身羽毛中布满亮晶晶圆点的鸡,正在林子里时而追逐觅食,时而追逐嬉戏。