骆驼β-防御素caBD-1 cDNA基因全序列RACE扩增方法的建立

为获得骆驼β-防御素基因(caBD-1 cDNA)的全长序列,采用锚定PCR RACE技术,根据已获得的骆驼β-防御素基因的部分已知序列,设计了1条特异性引物作为上游引物,将反转录引物中的部分序列即3′接合器引物作为下游引物,成功地克隆了caBD-1 cDNA的3′末端序列;采用反向嵌套PCR RACE技术,根据已获得的骆驼β-防御素cDNA的部分序列,设计了1条5′末端磷酸化的特异性反转录引物和2对特异性反向嵌套PCR引物,首先进行反转录(RT),然后将mRNA反转录的cDNA进行环化,最后进行反向嵌套巢式PCR,成功地克隆了骆驼β-防御素caBD-1cDNA的5′末端序列。结果显示,获得了骆驼β-防御素caBD-1 cDNA基因的全序列。证实,RACE技术用于防御素基因的扩增是可行的。     

物证检验技术在查处交通肇事案中的作用

物证检验技术在查处交通肇事案件中具有重要作用 :1、对车辆痕迹进行直观分析、测量比对 ,发现事实 ,确定事故责任 ,迅速解决纠纷 ;2、运用仪器分析技术 ,为查找逃逸车辆 ,认定肇事车辆、确定责任人提供科学依据 ;3、结合痕迹学原理 ,可重现案发的情况 ,为分析事故成因提供依据 ;4、充分运用物证检验技术识破伪装案件 ,去伪存真 ,正确认定案件性质 ,有效打击犯罪     

外伤后阴茎勃起功能障碍的夜间阴茎勃起功能监测

目的 夜间阴茎勃起功能监测(NPT)技术在阴茎勃起功能障碍程度鉴定中的法医学意义。方法 用RIGISCAN PLIJS SYSTEM,对13例外伤后主诉阴茎勃起障碍的被鉴定人进行监测。结果 NPT检查的13例被鉴定人,阴茎勃起功能正常者3例,轻度减退者5例,中度减退者2例,完全丧失者3例。其中在IIEF、自我勃起功能评价为严重功能障碍的5例中,NPT检查正常者1例,轻度减退者1例,中度减退者1例,完全丧失者2例。结论　NPT技术能够有效的确定阴茎勃起功能障碍的程度,为法医学损伤程度鉴定或伤残程度评定提供依据。     

阿片依赖患者血清FT3、FT4、TSH浓度变化

观察34例阿片依赖患者血清FT3、FT4及TSH浓度变化，结果显示，FT3、FT4及TSH浓度均明显低于正常对照组（P＜0．01）。说明阿片类毒品对丘脑－垂体－甲状腺轴具有抑制和损伤作用。长期使用阿片类毒品，甲状腺激素水平明显下降，从而产生一系列相应的生理变化和临床表现。     

Legal issues in oral fluid testing

The use of oral fluid for drugs of abuse testing has received increased attention with the availability of accurate methods for the collection and analysis of drugs in oral fluid specimens. Already used in the transportation and insurance industries, there is increasing interest in oral fluid drug testing in the workplace, schools, roadside driving under the influence of drugs, and criminal justice. Given that sanctions may accrue from positive test results, legal challenges are to be expected. However, with its established scientific base, demonstrated accuracy and reliability of collection and test methods, and current positive regulatory developments, it seems clear that the use of oral fluid as a specimen for drugs of abuse testing will be able to withstand judicial scrutiny.     

传染性腔上囊病病毒VP3蛋白模拟表位的筛选

为了研究传染性腔上囊病病毒(IBDV)的致病机理及研制有效的IBDV疫苗,利用噬菌体展示技术对IBDV VP3抗原表位进行了筛选。以4株IBDV VP3单克隆抗体HRB-3F、HRB-7B、HRB-7C和HRB-10E作为筛选分子,对噬菌体随机15肽库进行3轮吸附-洗脱-扩增淘洗,从每株单克隆抗体筛选到的噬菌斑中随机挑取20个单克隆噬菌斑,通过间接ELISA和竞争抑制ELISA检测,共选出13个单克隆噬菌斑,经噬菌体gⅢ部分基因的核苷酸序列测定,确定了8个15肽为IBDV抗原表位。这8个15肽在一级结构上没有3个以上连续氨基酸与IBDV Gx(Gen-Bank登录号:AY444873)VP3的氨基酸序列相同,但二级结构上均以β折叠为主,并且与单抗的结合可被VP3蛋白有效地抑制。证实,筛选的是IBDV VP3的模拟表位。     

口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因的原核表达及其产物的活性检测

利用分别带有BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的引物扩增出FMDV 3ABC基因,将其克隆到pMD18-T载体。经BamHⅠ和SalⅠ酶消化后,克隆到表达载体pGEX-6p-1上,构建重组质粒pGEX-3ABC。将该重组质粒转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)pLysS,经终浓度1 mmol/L的IPTG诱导,获得约70 ku的融合蛋白GST-3ABC。Western-blotting结果显示,表达的融合蛋白GST-3ABC可以与感染FMDV的牛血清发生免疫反应。以纯化的GST-3ABC蛋白为抗原的间接ELISA检测结果与以VP2蛋白为抗原的间接ELISA检测结果相比较,表明,融合蛋白GST-3ABC可以用于鉴别感染FMDV和疫苗免疫的牛血清。     

禽脑脊髓炎病毒 VP3基因的克隆与序列测定

根据已发表的禽脑脊髓炎病毒 (AEV)序列设计了 1对引物 ,利用RT PCR技术 ,从AEVVR株感染的SPF鸡胚脑以及内脏器官组织中成功扩增出了VP3基因 ,回收、纯化后克隆到T载体中 ,用常规方法转化JM1 0 9感受态细胞。阳性重组质粒经酶切及PCR鉴定后测定核酸序列。结果表明 ,VR株VP3基因全长 73 5bp ,共编码 2 4 5个氨基酸 ,与AEV 1 1 4 3标准毒株相应片段的核苷酸和氨基酸同源性分别为 93 .0 %和 97.0 % ;并将其与其他小RNA病毒进行了比较     

犯罪记忆检测技术的构成

犯罪记忆检测技术包括犯罪心理生理的诱导技术、记录技术和识别技术等核心技术。诱导技术借助适宜刺激诱导被测人员产生犯罪心理生理反应 ,因此需要对测试案情进行科学分析 ,并建构有效的测试结构。记录技术将诱导产生的生理反应记录下来供测量分析。目前使用频繁的是多导仪 ,记录皮肤电反应、心动反应、呼吸反应等生理反应。识别技术通过测量、比较记录下来的生理反应来确定事件相关反应的性质 ,即是否属于犯罪心理生理反应。     

犯罪心理测试技术实案应用研究

1991年,我国研制的PGA型心理测试系统正式通过公安部审定。十多年来,犯罪心理测试技术已达到排除无辜准确率100%,知情相关、作案相关认定准确率98%,测后讯问突破的案件占受理案件的80%。犯罪心理测试技术在刑事侦查中起到了重要作用。