Rab18调控禽偏肺病毒C型复制的研究

为探究Rab18调控禽偏肺病毒C型（aMPV/C）复制的分子机制,将aMPV/C感染A549细胞后进行激光共聚焦显微镜观察并用Image J软件分析共定位系数。结果显示,Rab18与aMPV/C N蛋白均在细胞质中表达并存在共定位,而未接毒组无明显的N蛋白荧光信号,接毒组共定位系数极显著高于未接毒组（P<0.01）。将pCMV-Flag-Rab18、pCMV-Flag、siRab18以及siNC分别转染A549细胞,接种aMPV/C后收集细胞和细胞上清,分别用qPCR、Western-blot以及TCID50检测aMPV/C N基因的转录水平、N蛋白的表达水平以及病毒效价。结果显示,过表达Rab18后aMPV/C N基因的转录水平、N蛋白的表达水平以及病毒效价均极显著升高（P<0.01）,而干扰Rab18表达后N基因的转录水平、N蛋白的表达水平以及病毒效价均极显著降低（P<0.01）。将pCMV-mcherry-Rab18分别与可融合表达GFP蛋白的aMPV/C各基因的质粒共转染A549细胞后进行激光共聚焦显微镜观察。结果显示,Rab18均可与aMPV/C各蛋白在细胞...     

猫CD3单克隆抗体的筛选与鉴定

为研究猫CD3的生物学功能、猫淋巴瘤和自身免疫性疾病的诊断及治疗方法,通过克隆构建含猫CD3胞外区基因的重组质粒,将ExpiCHO-S细胞和Expi293细胞表达的猫CD3蛋白分别作为免疫原和筛选抗原,利用杂交瘤技术制备抗猫CD3单克隆抗体（m Ab）,对其抗体亚型和杂交瘤细胞株稳定性进行鉴定和分析,IFA、Western-blot、免疫组化（IHC）和流式细胞术（FCM）分析其生物学特性。结果显示,成功制备了2株可持续稳定分泌抗猫CD3 m Ab杂交瘤细胞株,命名为2C9和3E1;亚型鉴定结果显示均为Ig G1型,轻链类型均为κappa型。IFA和Western-blot结果显示,2株抗猫CD3 m Ab均可与体外表达的猫CD3蛋白发生特异性结合。IHC和FCM结果显示只有2C9 m Ab可特异性识别猫脾、肠道淋巴组织及猫外周血单核淋巴细胞（PBMCs）中的T淋巴细胞。结果表明,本研究制备的猫CD3 m Ab为后续猫CD3分子的功能研究、猫淋巴瘤和自身免疫性疾病的诊断及治疗方法的建立奠定了基础。     

《C语言程序设计》课程线上实践教学环节的智能化运行及管理

本文将以《C语言程序设计》课程为例,讲述如何将实践知识贯穿于线上教学,实现实践教学环节的线上教学智能化运行及管理。     

重组CFP10-ESAT6蛋白通过TLR信号介导A549细胞抗BCG感染

本研究旨在探究重组CFP10-ESAT6蛋白在结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染肺泡上皮细胞过程中对肺泡上皮细胞TLR信号途径及其介导的炎症反应的影响.利用原核表达系统表达纯化Mtb重组蛋白CFP10-ESAT6,使用重组蛋白处理A549细胞,利用CCK-8试剂盒检测重组C...     

AQP9基因在不同闭锁进程水牛卵泡颗粒细胞中的表达及其与细胞凋亡关系的研究

为了解AQP9基因表达及其与水牛颗粒细胞凋亡的关系,初步阐明它在水牛卵泡闭锁中的作用,首先分析了不同闭锁程度水牛卵泡颗粒细胞中AQP9基因和凋亡相关基因的表达情况.通过构建颗粒细胞凋亡模型、过表达AQP9基因的方法分析了它对细胞凋亡相关基因表达的影响.为进一步了解PKC通路与AQP9基因表达的相关性,添加PKC抑制剂处...     

马动脉炎病毒的血凝性研究

在RK-13细胞上培养的马动脉炎病毒(Equine viral arteritis,EAV)在4℃、室温和37℃条件下,用多种动物的红细胞进行血凝试验,病毒在不同温度下均可凝集小鼠和鸡的红细胞,但不能凝集牛、绵羊、山羊、马、猪、豚鼠、仓鼠、兔及鹅的红细胞.将病毒用吐温-80和乙醚处理后,血凝活力会显著增强,其HA效价比未经处理的病毒高4-8倍,且血凝像更加清晰.处理病毒的最适条件是在冰浴状态下用终浓度0.6-1.25 mL/L吐温-80振荡处理15-60 min,再加1/2体积的乙醚振荡作用5-15 min.     

新城疫病毒HN基因在CHO/dhfr-细胞中的表达

为了实现新城疫病毒血凝素一神经氨酸酶(HN)基因在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达,构建了同时含有HN基因和二氢叶酸还原酶(dhfr)基因的真核表达载体pCI-HN-D.将纯化后的重组质粒通过脂质体转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢(CHO/dhfr)细胞,经3轮氨甲喋吟加压筛选,获得了稳定表达HN基因的细胞株.用间接免疫荧光和免疫印迹检测目的蛋白的表达情况.结果表明,HN基因在CHO/dhfr细胞中成功表达.     

环丙沙星和恩诺沙星联合肝毒性及其机制研究

研究动物性食品中常见抗菌药环丙沙星(Ciprofloxacin,CFX)和恩诺沙星(Enrofloxacin,ENR)残留联合肝毒性及其分子机制.以小鼠肝实质细胞AML12细胞为模型,通过结晶紫染色法与联合指数计算确定CFX、ENR引起协同毒性的浓度比,并使用蛋白免疫印迹法、Annexin V-FITC/PI双染法等方...     

美国法典1404(a)与非方便法院原则辨析

由于美国法典28卷1404（a）条款的立法规定在功能与措辞上均非常类似普通法上的非方便法院原则,因此很多学者误以为该立法规定与非方便法院原则之间并不存在实质性的差异。然而,这一看法并不正确。事实上,1404（a）条款立法在法律效果、证明标准以及具体适用方面均与非方便法院原则存在显著的区别。     

构建和谐社会创建和谐家庭

恩格斯曾经说过:“个体婚制是文明社会的细胞形态,根据这种形态,我们可以研究文明社会内部充分发展着的对立和矛盾的本来性质。”如果我们将人类社会看作是一个有机体的话,那么,家庭就是社会的组成“细胞”,它与整个社会“肌体”息息相关,每个“细胞”和谐了,整个社会“肌体”必然会和谐。从这个意义上说,构建和谐社会离不开构建和谐家庭,构建和谐家庭是构建和谐社会的重要组成部分,只有家庭和谐了,社会和谐才能有坚实的基础。