A型禽流感病毒NS1蛋白的表达及其诱导细胞凋亡功能的研究

利用瞬时表达方法表达禽流感病毒(AIV)NS1蛋白,并初步研究了体外表达的NS1蛋白对宿主细胞凋亡的影响.应用脂质体介导法,将含有不同亚型AIV NS1基因的阳性质粒pcDNA3.1(+)-qNS1(H5N1)、pcDNA3.1(+)-rNS1(H9N2)转染Vero细胞系及MDCK细胞系.经SDS-PAGE及Western-blotting检测,qNS1和rNS1基因在Vero细胞及MDCK细胞中均获得了表达.应用AO/EB荧光染色法、Annexin V-PI法分别对转染后的Vero细胞及MDCK细胞进行细胞凋亡检测,结果显示,转染阳性质粒的MDCK细胞凋亡率增高,而转染空载体pcDNA3.1(+)的MDCK细胞及转染的Vero细胞均无明显变化.表明,qNS1、rNS1蛋白在体外培养的MDCK细胞中表达并能够诱导其发生凋亡,而在Vero细胞中却不能发挥此功能.     

“铁匠”龚厚钦

<正>举报还会继续,他的微博名是张家界铁匠龚厚钦,铁匠,来自于打铁还需自身硬这句名言。咚咚咚,早上8点多,响起了警察查房一般沉重的敲门声。龚厚钦来了。眼前是一名高大健壮的男子,一身短打——短发,短袖T恤,短裤。视线从中间往上移,先被他五星红旗样式的鲜艳T恤吸引,热情而让人充满安全感。然后是那双眸子,不大,     

细胞粘附分子与疾病

细胞粘附分子（ｃｅｌｌ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ , ＣＡＭ） 是一类细胞表面分子,是细胞间通讯和细胞及其基质相互作用中的一种重要机制。ＣＡＭ 在炎症、肿瘤转移、免疫反应、伤口愈合等过程中具有重要作用。作者对ＣＡＭ 的分类、与疾病的关系、在诊断和治疗上的应用等进行了综述,对科研和临床实践具有指导意义。     

两种纯化试剂盒对人体脱落细胞检材STR检出率比较

正随着DNA检验技术的普及和发展,办案人员应用DNA技术的意识不断增强,采集人体脱落细胞进行DNA分析应用逐渐广泛。采用常规提取方法难以获得高质量的DNA模板,影响后续的STR分型。本研究分别采用QIA DNA Investigator试剂盒(德国QIAGEN公司)、PrepFiler~?Express BTA Forensic DNA Extraction试剂盒(美国AB公司,下文简称为PrepFiler~?Express BTA试剂盒)对129份不同载体上人体脱落细胞检材进行检验,评估两种方法的     

国家药品价格谈判取得重要进展和成果

对专利药品、独家生产药品,建立公开透明、多方参与的药品价格谈判机制,是深化医药卫生体制改革、推进公立医院药品集中采购、降低广大患者用药负担的重要举措。2016年5月20日,首批国家药品价格谈判结果向社会公布,其中有慢性乙肝一线治疗药物替诺福韦酯,非小细胞肺癌靶向治疗药物埃克替尼和吉非替尼。与之前公立医院的采购价     

绵羊睾丸支持细胞的分离鉴定及其在山羊痘病毒疫苗株培养中的应用

为研究绵羊睾丸支持细胞对山羊痘病毒的增殖特性,采用胶原酶Ⅳ和胰酶两步法分离绵羊睾丸支持细胞,通过倒置显微镜进行形态学观察、细胞染色鉴定以及特异性表达ABP蛋白鉴定,然后接种山羊痘病毒疫苗株。结果显示,分离的原代细胞24 h可长满单层,用0.05%的胰酶消化处理3次可得到纯度约为80%的睾丸支持细胞;油红O染色可观察到绵羊睾丸支持细胞的细胞质含有大量脂肪滴,细胞核可见双极小体;HE染色后细胞核为蓝色,细胞质呈红色或粉红色。ABP蛋白间接免疫荧光可观察到在绵羊睾丸支持细胞的细胞质和细胞核周围有绿色荧光,经显微镜下计数其纯度达80%以上。接种山羊痘病毒疫苗株后第4天有90%细胞产生病变,细胞变圆,细胞聚集成簇状,细胞收缩、细胞核出现空泡化。qPCR扩增Ct值为18.81,Ct值低于其他细胞传代数值。结论,本研究成功分离培养了绵羊睾丸支持细胞,该细胞能较好地培养山羊痘病毒疫苗株,对羊痘疫苗的生产有一定的现实意义。     

病毒是微观世界的“恐怖分子”

在这段不同寻常的日子里,几乎所有人都在关注新型冠状病毒。其实新型的背后,是各种各样旧型病毒,以及人类与之持续不断的斗争史,禽流感猪流感埃博拉……这些都不是多么久远的事。或许是时候深入了解一下这个被称作病毒的东西了。原来你是这样的病毒平时我们所说的生物,无论是原核生物(细菌和古菌),还是真核生物(动物、真菌和植物),都是由细胞组成的。除了这些细胞类型的生物,地球上还有另一类数量极其庞大的非细胞类型的生物体,这就是病毒(virus)。     

鸡传染性支气管炎病毒陕西分离株M蛋白基因的变异及其B细胞表位稳定性

以陕西8株鸡传染性支气管炎病毒(AIBV)分离株M蛋白的基因序列为基础,应用DNAStar软件中的MegAlign模块对其进行了同源性分析;用Kyte-Doolittle方法、Jameson-Wolf方法、Karplus-Schulz方法、Plot-Emini方法和Garnier-Robson方法综合预测了其中4株代表毒株的M蛋白B细胞抗原表位和二级结构。结果,8株AIBV的M蛋白主要在10~40 aa和90~175 aa处存在无规律的点突变,与参考毒株H52、M41、SAIB20、LX和Gray的M蛋白的核苷酸序列和预测的氨基酸序列的同源性分别介于87.4%~99.5%和96.3%~99.5%;分离株间的核苷酸序列和预测的氨基酸序列同源性分别介于91.8%~99.8%和95.4%~100%。4株代表株的M蛋白B细胞优势抗原表位都在159~164 aa和181~193 aa肽段区(这2个区域都包含了无规则卷曲和β-转角结构)或其附近。结果表明,AIBV分离株的M蛋白基因相对保守,只存在无规律的点突变,该变异对AIBV M蛋白B细胞表位的稳定性无影响。     

非鸡胚源细胞对传染性法氏囊病病毒的分离与鉴定

采用非洲绿猴肾细胞（Ｖｅｒｏ）直接从传染性法氏囊病（ＩＢＤ）死亡小鸡的法氏囊组织中分离到Ｘ毒株和Ｎ毒株，经电镜形态学观察和多项生物学特性试验的结果表明，分离到的Ｘ毒株和Ｎ毒株为传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）血清Ⅰ型     

硝基苯对小鼠脾的毒性作用

为探讨硝基苯对小鼠脾的毒性作用,采用灌胃的方法对试验小鼠用硝基苯染毒,染毒剂量分别为26 mg/kg、52 mg/kg、105 mg/kg,每天染毒1次,共30 d.于末次染毒后第2 d将小鼠脱颈处死,立即取出脾检测抗氧化指标MDA、SOD、GSH-Px和T-AOC,并对其进行了显微和超微结构的观察.结果,随着染毒剂量的加大,MDA含量逐渐升高,SOD、GSH-Px酶活性和T-AOC逐渐降低;与油对照组相比,各剂量组均表现为差异极显著(P＜0.01);光镜下白髓数量减少,体积变小,生发中心不明显,高剂量组能见到少量的凋亡细胞;电镜下白髓区淋巴细胞染色质聚集,核周隙增宽,核边集现象增多,高剂量组可见个别细胞核膜破损,核内容物外溢.结果表明,硝基苯对脾具有明显的毒性作用,能够诱发机体氧化应激和脾淋巴细胞凋亡,氧化应激与细胞凋亡的发生存在一定关系.