肺泡巨噬细胞在猪链球菌2型引致肺炎过程中的作用

为探明肺巨噬细胞在猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)引致肺炎过程中发挥的作用,用SS2体外感染4周龄SPF巴马小型猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM),首先以10倍递增的SS2∶PAM感染比(MOI)分别为1∶10～1 000∶1感染12h;其次以MOI=100∶1分别感染1、2、4、6、12、24h,ELISA检测三种主要炎性细胞因子TNF-α、IL-1和IL-6的质量浓度及动态变化,同时光镜观察PAM的形态变化。结果显示,三种细胞因子具有相似的动态表达趋势,其表达量均随MOI升高和作用时间的延长而上升,与对照组之间均差异极显著(P<0.01),菌液浓度之间和时间点之间均差异显著(P<0.05);同时PAM的形态异常和崩解死亡比例依次增多,表明三种炎性因子的表达量与SS2的浓度和感染时间之间呈正相关;受损或濒死细胞比例亦正相关;提示三种炎性因子由受损细胞或濒死细胞产生。MOI为1∶1感染12h,或MOI为100∶1感染6h的条件下均可致70%的PAM崩解死亡,表明此条件下SS2可摧毁由PAM构筑的第一道防线。三种炎性细胞因子表达最高峰的条件是MOI为100∶1,感染12h,此时镜下细胞几乎全部崩解死亡,表明PAM的完全死亡伴随炎性因子的最大释放,炎症随吞噬功能的完全丧失而开始。结果表明,在SS2引致肺炎过程中,AM的作用是炎症的起始者,而不是抵御细胞。     

内含肽和麦芽糖结合蛋白介导具有抗病毒活性牛α干扰素的表达

为了在大肠杆菌表达系统中高效表达具有抗病毒活性的重组牛α干扰素(BoIFN-α)蛋白,在BoIFN-α基因的上游无缝连接内含肽Ssp DnaB intein(SDI)序列,然后克隆至pMAL-c2X载体中,构建含有内含肽和麦芽糖结合蛋白基因的表达载体pMAL-SDI-BoIFN-α,将重组载体转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞,IPTG诱导表达。结果表明,融合基因获得高效表达,且产物主要以可溶形式存在。经直链淀粉树脂纯化后可得到纯度较高的目的蛋白。经MDBK-BVDV(牛病毒性腹泻病毒)干扰素活性系统检测,证实干扰素融合蛋白具有抗病毒活性。     

HaeⅢ和HinfⅠ酶解DNA指纹图的比较——一例乱伦案的亲子鉴定

<正> DNA指纹技术已经在法医生物物证鉴定中被日益广泛地应用。从理论上说,两种不同的限制性内切酶酶解同一个体DNA产生完全不同的指纹图,虽有这方面的一般性报道,但无进一步的研究。作者用α—珠蛋白-3’HVR探针比较了HinfI和HaeⅢ酶解的DNA指纹图,并将此结果应用于案例鉴定,报道如下。     

高特异性三唑仑代谢物单克隆抗体的制备

目的建立分泌抗三唑仑代谢物α-羟基三唑仑单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备高特异性的三唑仑代谢物单克隆抗体,为三唑仑及其代谢物免疫分析方法的开发奠定基础。方法在三唑仑分子的6位苯环对位上引入活性氨基基团,然后通过缩合反应分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)相偶联形成完全抗原。以三唑仑-KLH免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合,筛选等杂交瘤技术建立稳定的分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。纯化后的单克隆抗体,分别用SDS-PAGE电泳法、间接ELISA法和胶体金免疫层析法对其纯度、效价及灵敏度和特异性进行测定。结果获得3株能稳定分泌三唑仑代谢物单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2G4,4B2和5H6。2G4和4B2抗体只与三唑仑代谢物α-羟基三唑仑有反应,灵敏度分别为500ng/mL和750ng/mL。与其他参试物无交叉反应。因5H6抗体为IgM,考虑到纯化难度和实际应用的限制,暂未做深入研究。结论本研究制备的2G4和4B2单克隆抗体仅识别三唑仑代谢物α-羟基三唑仑,具有高度特异性和灵敏度。     

《圣经》中的“爱”

《圣经》(以下简称“BGT”)希腊文中用来表示“爱”的词主要有两种,一个是α’γαπáω,一个是φιλ`ω。前一个特指宗教含义的爱,后一个是一般泛指意义上的爱。《圣经》原文作如此用法和意义划分,并着意对此差别进行对比,既体现了其执笔人对世俗之爱的贬低和对宗教之爱的虔诚,也说明其用词上的深思熟虑。其他表示“爱”的词汇在《圣经》使用中也各有取舍,其中表示上帝仁慈恩宠的xápιs也是一个比较常用的词,而表示性爱的`pws则从未使用过。     

CCK受体拮抗剂对吗啡戒断大鼠海马神经元CaMKⅡα mRNA及蛋白表达的影响

目的研究胆囊收缩素(CCK)受体拮抗剂对吗啡戒断大鼠海马神经元CaMKⅡαmRNA及蛋白表达的影响,进一步探讨CCK受体拮抗剂抑制吗啡戒断症状的作用机制。方法应用剂量递增法皮下注射盐酸吗啡,建立大鼠吗啡躯体依赖模型,将模型鼠的海马组织制成细胞悬液,体外给予不同剂量CCK-A及CCK-B受体拮抗剂,采用RT-PCR和western blot技术分别检测海马神经元CaMKⅡα的mRNA及蛋白表达。结果①慢性吗啡成瘾大鼠海马神经元CaMKⅡα mRNA及蛋白表达与对照组相比均显著增高;②成瘾大鼠海马神经元细胞在给予纳洛酮催促戒断后,与对照组及吗啡组相比,CaMKⅡα mRNA及蛋白均显著降低;③纳洛酮催促戒断组加入不同剂量的CCK-A受体拮抗剂(CR-1409)、CCK-B受体拮抗剂(CR-2945),CaMKⅡα mRNA及蛋白表达与纳洛酮组相比显著升高,并随浓度的升高而升高,两种拮抗剂的作用以CR-2945起主要作用。结论CCK-A、CCK-B受体拮抗剂可以有效地抑制因纳洛酮催促戒断所引起的CaMKⅡα mRNA及蛋白表达降低,并具有剂量依赖性。     

αB晶状体蛋白在视网膜及眼外组织器官中表达及其作用机制

αB晶状体蛋白是脊椎动物晶状体的结构性蛋白,广泛表达于非晶状体组织中。αB晶状体蛋白作为热休克蛋白家族成员之一,具有分子伴侣和抗细胞凋亡等生物学功能。多种因素引起的损伤,如视网膜病变、炎症反应性疾病和神经系统疾病等都与αB晶状体蛋白存在密切关系。本文综述了αB晶状体蛋白在视网膜及眼外组织器官中表达及其作用机制的研究进展。     

Malapportionment in space and time: Decompose it!

Existing studies on legislative malapportionment often conceptualize and measure this phenomenon with little regard to intertemporal variations and the malapportionment-generating process (MGP). Our conceptualization leads us to introduce a measure called α-divergence that can identify the vote inequality derived from various stages of MGP. Using an originally created database that covers 440 elections in 112 countries, we decompose the overall degree of malapportionment into three stages: malapportionment that arises at the stages of interstate apportionment, intrastate districting, and allotment of seats to special districts. We also provide analyses that can decompose the demographic and political factors contributing to the trends of the overall degree of malapportionment for selected countries.     

分子生物学指标用于推断机械性窒息死亡的研究进展

体表损伤轻微或无损伤的机械性窒息死亡是法医学鉴定的难点之一。由于缺少病理形态学特异性变化特征,较难与部分存在缺氧过程的其他致死原因相鉴别。近年来,将具有相关性、特异性分子生物学指标用于推断机械性窒息死亡,已成为研究热点。本文就上述专题中法医学最新研究文献进行复习综述,以期为机械性窒息死亡的研究提供新思路。     

In silico toxicity as a tool for harm reduction: A study of new psychoactive amphetamines and cathinones in the context of criminal science

The emergence of new psychoactive substances (NPS) has raised many issues in the context of law enforcement and public drug policies. In this scenario, interdisciplinary studies are crucial to the decision-making process in the field of criminal science. Unfortunately, information about how NPS affect people's health is lacking even though knowledge about the toxic potential of these substances is essential: the more information about these drugs, the greater the possibility of avoiding damage within the scope of a harm reduction policy. Traditional analytical methods may be inaccessible in the field of forensic science because they are relatively expensive and time-consuming. In this sense, less costly and faster in silico methodologies can be useful strategies. In this work, we submitted computer-calculated toxicity values of various amphetamines and cathinones to an unsupervised multivariate analysis, namely Principal Component Analysis (PCA), and to the supervised techniques Soft Independent Modeling of Class Analogy and Partial Least Square-Discriminant Analysis (SIMCA and PLS-DA) to evaluate how these two NPS groups behave. We studied how theoretical and experimental values are correlated by PLS regression. Although experimental data was available for a small amount of molecules, correlation values reproduced literature values. The in silico method efficiently provided information about the drugs. On the basis of our findings, the technical information presented here can be used in decision-making regarding harm reduction policies and help to fulfill the objectives of criminal science.